保健食品功能检验与评价方法（2023年版）有助于消化.docx

保健食品功能检验与评价方法（2023年版）有助于消化1.1 试验项目1.1.1 动物实验体重、体重增重、摄食量和食物利用率I .1.1.2小肠运动实验II .1.3消化酶测定1.1.2人体试食试验1.1.2.1 儿童方案1.1.2.1.1 食欲1.1.2.1.2 食量1.1.2.1.3 偏食状况1.1.2.1.4 体重1.1.2.1.5 血红蛋白含量1.1.2.2 成人方案1.1.2.2.1 临床症状观察1.1.2.2.2 胃/肠运动实验2.2试验原则2.2.1 动物实验和人体试食试验所列指标均为必做项目。2.2.2 2.2根据受试样品的适用人群特点在人体试食试验方案中任选其一。2.2.3 在进行人体试食试验时，应对受试样品的食用安全性作进一步的观察。3.2结果判定3. 2.1动物实验：动物体重、体重增重、摄食量、食物利用率，小肠运动实验和消化酶测定三方面中任二方面实验结果阳性，可判定该受试样品有助于消化动物实验结果阳性。3.2. 2人体试食试验3.2.2.1针对改善儿童消化功能的，食欲、进食量、偏食改善结果阳性，体重和血红蛋白二项指标中任一项指标结果阳性，可判定该受试样品具有有助于消化的作用。3.2.2.2针对改善成人消化功能的，临床症状明显改善，胃/肠运动实验结果阳性，可判定该受试样品具有有助于消化的作用。有助于消化检验方法1动物实验1.1 实验原理丹肠道是营养物质的摄取、消化与吸收的器官，对食物的消化作用主要是依靠其运动、消化酶的分泌来完成的。如果某一保健食品能对这一环节或几环节有调节作用，就可能具有有助于消化的作用。1.2 实验项目促进消化功能动物实验包括大鼠体重、体重增重、摄食量和食物利用率实验；小肠运动实验；消化酶的测定等三部分。1.3 实验动物根据实验项目可选用单一性别成年小鼠或大鼠。小鼠18-22克，每组10-15只，大鼠120-150克，每组8-12只。1.4 剂量分组及受试样品给予时间实验设三个剂量组和一个阴性对照组（或空白对照组）以人体推荐量的10倍（小鼠）或5倍（大鼠）为其中的一个剂量组，另设二个剂量组，必要时设阳性对照组和模型对照组。受试样品给予时间30天（小肠运动实验受试样品给予时间1530天）必要时可延长至45天。1.5 实验内容151体重、体重增重、摄食量和食物利用率选用同一性别的大鼠。实验开始时动物体重的差异应不超过平均体重的10%。分不同剂量实验组和阴性对照组，经口给予受试样品，每周测2次体重和食物摄入量。实验结束时计算体重、体重增重、摄食量和食物利用率。1.5.2 小肠运动实验选用同一性别的小鼠，分不同剂量实验组、空白对照组和模型对照组，模型对照组用复方地芬诺酯（或洛喉丁胺24mgkgBW）造模。可用墨汁或炭末加阿拉伯树胶作为指示剂。经口给予受试样品。实验结束前禁食不禁水16小时，于测定当天各实验组和空白及模型对照组再给予一次受试样品或蒸储水，30分钟后各实验组和模型对照组给予复方地芬诺酯（OO25%-O.（）5%）空白对照组给予蒸储水,30分钟后各组再给予指示剂，25分钟后断颈处死动物，计算墨汁推进率。按下式计算墨汁推进率：墨汁推进长度（cm）墨汁推进率=×100%小肠总长度（Cm）1.5.3 消化酶的测定选用同性别的大鼠。分不同剂量实验组和阴性对照组，实验开始时动物体重的差异应不超过平均体重的I0%o经口给予受试样品。实验结束前各组动物禁食不禁水24小时，采用乙酶（或异氟烷）麻醉大鼠幽门结扎法收集一定时间内排出的胃液，测定单位时间内胃液量。取胃液ImL放入50mL的三角烧瓶中，加入0.05molL盐酸溶液15mL摇匀，放入新鲜制作的蛋白管两根。塞好瓶口，在37C恒温箱中孵育24小时，取出蛋白管，用尺测量蛋白管两端透明部分的长度（mm）以四端之值求其平均值。计算胃蛋白酶活性和胃蛋白酶排出量。胃蛋白酶活性单位（mL）=四端蛋白管透明部分长度均值2X16胃蛋白酶排出量（h）=胃蛋白酶活性X每小时胃液量1.6 数据处理和结果判定计量资料可用方差分析，但需按方差分析的程序先进行方差齐性检验，方差齐，计算产值，产值<尸0的，结论：各组均数间差异无显著性；产值2R>6,PW0.05,用多个实验组和一个对照组间均数的两两比较方法进行统计；对非正态或方差不齐的数据进行适当的变量转换，待满足正态或方差齐要求后，用转换后的数据进行统计；若变量转换后仍未达到正态或方差齐的目的，改用秩和检验进行统计。食物利用率和墨汁推进率资料需进行数据转换，X=Sin1、万，式中P为食物利用率和墨汁推进率，用小数表示，然后再进行方差分析。161体重、体重增重、摄食量和食物利用率实验组与阴性对照组比较，体重、体重增重、摄食量三项指标中任一指标增加，经统计处理差异有显著性，且食物利用率与阴性对照组比较不明显降低，可判定该实验结果阳性。1.6.2 小肠运动实验在模型成立的前提下，实验组与模型对照组比较，墨汁推进率增加，经统计处理差异有显著性，可判定该实验结果阳性。1.6.3 消化酶的测定实验组与阴性对照组比较，胃液量、胃蛋白酶活性，胃蛋白酶排出量三项指标中任一指标增加，经统计处理差异有显著性，可判定该实验结果阳性。结果判定动物体重、体重增重、摄食量、食物利用率，小肠运动实验和消化酶测定三方面中任二方面实验结果阳性，可判定该受试样品动物实验结果阳性。2.人体试食试验根据不同受试样品适应人群的区别，有助于消化人体试食试验建立两套试食试验方案，即针对适应人群主要为儿童的儿童方案和适应人群主要为成人的成人方案。2.1 JLM方案2.1.1 受试者纳入标准：受试者选择由单纯饮食不佳造成的体重在同龄平均正常体重值小于1个标准差以内，伴有食欲低下、食量减少、偏食等消化不良表现的4-10岁儿童。2.1.2 受试者排除标准2.1.2.1 急、慢性腹泻者。2.1.2.2 粪便常规检查虫卵阳性者。2.1.2.3 合并有心血管、肝、肾和造血系统等全身性疾病者。2.1.2.4 短期内服用与受试功能有关的物品，影响到对结果判断者。2.1.2.5 未坚持服用受试样品者。2.1.3 试验设计及分组要求采用自身和组间两种对照设计。按受试者体重、血红蛋白、进食量等随机分为试食组和对照组，尽可能考虑影响结果的主要因素如年龄、性别、家庭经济水平等，进行均衡性检验，以保证组间的可比性。每组受试者有效例数不少于50例。2.1.4 受试样品的剂量和使用方法试食组按推荐服用方法、服用量服用受试产品，对照组可服用安慰剂或具有同样作用的阳性物。受试样品给予时间30天，必要时可延长至45天。按盲法进行试食试验。试验期间不改变原来的饮食习惯，正常饮食。2.1.5观察指标2.1.5.1 安全性指标2.1.5.1.1 一般体格检查：试验前应询问和查阅受试儿童健康卡片，了解受试儿童的睡眠、精神情况。对所有儿童进行常规体格检查。2.1.5.1.2 血常规：红细胞计数、白细胞计数。2.1.5.1.3 尿常规：比重、PH值、白细胞。2.1.5.1.4 粪便常规：虫卵检查（试食开始前检查一次）2.1.5.2 功效性指标2.1.5.2.1 食欲：分为食欲佳，食欲可，食欲差三级。2.1.5.2.2 进食量:采用3天膳食调查法。记录试食开始前和试食结束前3天各受试儿童的总进食量（包括主食、副食、蔬菜和水果）以连续3天观察计算出1天平均的进食量。2.1.5.2.3 偏食：分为无偏食，中等偏食，偏食三级。2.1.5.2.4 体重测量和血红蛋白含量的测定：测定试食前后的体重和血红蛋白变化。2.1.6数据处理和结果判定试验数据为计量资料，可用，检验进行分析。凡自身对照资料可以采用配对，检验，两组均数比较采用成组，检验，后者需进行方差齐性检验，对非正态分布或方差不齐的数据进行适当的变量转换，待满足正态方差齐后，用转换的数据进行f检验：若转换数据仍不能满足正态方差齐要求，改用检验或秩和检验：但变异系数太大（如CV>50%）的资料应用秩和检验。2.1.6.1 食欲改善：食欲评价分为食欲佳（进餐时有食欲，喜欢吃饭，3分）食欲可（进餐时能吃饭但比同龄儿童少，2分）食欲差（进餐时不愿吃饭，比同龄儿童明显减少，1分）三级。试食前后试食组自身比较，食欲评分明显增加，试食后试食组与对照组比较，食欲评分或其试验前后的差值增加，经统计处理差异有显著性，可判定该指标阳性。2.1.6.2 进食量改善：试食前后试食组自身比较进食量明显增加，试食后试食组与对照组比较，进食量或其试验前后的差值增加，经统计处理差异有显著性，可判定该指标阳性。2.1.6.3 偏食改善：偏食评价分为无偏食（进餐时不挑食，3分）中等偏食（进餐时挑食但在劝说下能进食，2分）偏食（进餐时挑食严重，在劝说下仍不进食，1分）三级。试食前后试食组自身比较，偏食评分明显增加，试食后试食组与对照组比较，偏食评分或其试验前后的差值增加，经统计处理差异有显著性，可判定该指标阳性。2.1.6.4 体重测量和血红蛋白含量的测定试食前后试食组自身比较，体重或血红蛋白明显增加，试食后试食组与对照组比较，体重或血红蛋白明显增加，经统计处理差异有显著性，可判定体重或血红蛋白指标阳性。2.2成人方案2.2.1 受试者纳入标准选择功能性消化不良，伴有长期胃肠不适，主诉食欲不振，早饱、气多，胃肠胀满，呕吐，不明原因慢性腹泻或大便秘结等自愿受试者。2.2.2 受试者排除标准2.2.2.1 急性腹泻者。1.1.1.1 器质性病变引起的消化不良者。2.2.2.3 体质虚弱无法接受试验者。2.2.2.4 合并有心血管、肝、肾和造血系统等严重全身性疾病患者。2.2.2.5 短期内服用与受试功能有关的物品，影响到对结果的判断者。2.2.2.6 要求服用受试样品，无法判断试食结果者。2.2.2.7 设计及分组要求采用自身和组间两种对照设计。按受试者的消化症状轻重随机分为试食组和对照组，尽可能考虑影响结果的主要因素如年龄、性别、病程等，进行均衡性检验，以保证组间的可比性。每组受试者有效例数不少于50例。2.2.4受试样品的剂量和使用方法试食组按推荐服用方法、服用量服用受试产品，对照组用安慰剂或空白对照，也可用具有同样作用的阳性物。受试样品给予时间30天，必要时可延长至45天。试验期间不改变原来的饮食习惯，正常饮食。2.2.2.8 指标2.2.5.1 安全性指标2.2.5.1.1 一般状况包括精神、睡眠、饮食、大小便、血压等2.2.5.1.2 血、尿便常规检查2.2.5.1.3 肝、仔功能检查2.2.5.1.4 胸片、心电图、腹部B超检查（在试验开始前检查一次）225.2功效性指标2.2.521临床症状观察：准确记录受试者试验前后的临床症状，按下表给予量化评分，比较试验前后症状积分的变化。2.2.5.2.2胃/肠运动试验：所有受试者在试验前、试验结束时均进行胃/肠运动检查，推荐用领条透视法（在进食的条件下检查）2.2.6数据处理和结果判定试验数据为计量资料，可用/检验进行分析。凡自身对照资料可以采用配对，检验，两组均数比较采用成组f检验，后者需进行方差齐性检验，对非正态分布或方差不齐的数据进行适当的变量转换，待满足正态方差齐后，用转换的数据进行检验；若转换数据仍不能满足正态方差齐要求，改用，'检验或秩和检验；但变异系数太大（如CVi>50%）的资料应用秩和检验。表临床症状积分症状轻（1分）中（2分）重（3分）腹痛持续时间短，不需服药疼痛时间较长，每日超4小时，尚能忍受疼痛较重，持续，需服药才能减轻暧气间有发作经常发作，引及两胁不适频繁发作，引及两胁疼痛泛酸偶有吐酸饮食不适即吐酸频繁吐酸腹胀腹胀在短时间内较甚腹胀较甚，在较长时间内不缓解整日腹胀食欲食欲较差，饭量减少1/2以内鲍塞饭量减少1/22/3无食欲，饭量减少2/3以上腹泻或便秘偶有腹泻或便秘饮食不适即腹泻或便秘频繁腹泻或便秘2.2.6.1 临床症状结果判定试食前后试食组自身比较及试食后试食组与对照组组间比较，临床症状积分明显减少，经统计处理差异有显著性，可判定该指标阳性。2.2.6.2 胃/肠运动试验结果试食前后试食组自身比较及试食后试食组与对照组组间比较，胃/肠运动试验指标明显改善，经统计处理差异有显著性，可判定该指标阳性。结果判定针对改善儿童消化功能的，食欲、进食量、偏食改善结果阳性，体重和血红蛋白二项指标中一项指标结果阳性，可判定该受试样品具有有助于消化的作用。针对改善成人消化功能的，临床症状明显改善，胃/肠运动实验结果阳性，可判定该受试样品具有有助于消化的作用。-11-