1脱氧野尻霉素对肥胖小鼠肝细胞线粒体合成与自噬能力的改善作用及甲状腺激素稳态的影响.docx

肥胖是一种由多种因素导致的全球性慢性疾病，常起因于能量摄入与消耗失衡，给机体带来炎症、氧化应激、线粒体功能障碍等不利影响，同时也是糖尿病、心血管疾病等的主要风险因素，已被世界卫生组织认定为影响人类健康的五大危险因素之一。I-脱氧野尻霉素(DNJ)是一种主要从植物桑中分离得到的哌咤类生物碱，目前研究已经发现其具有降糖、降脂、抗肿瘤、抗病毒等生理活性。在脂代谢方面，该团队前期的研究发现DNJ降脂机理主要为调节脂代谢相关酶活性，抑制脂肪酸合成，促进脂肪酸P氧化。肝脏在脂代谢过程中扮演重要角色，线粒体是脂肪酸氧化的重要场所，以高脂膳食诱导的肥胖小鼠为实验材料，研究DNJ对肥胖小鼠肝脏细胞线粒体生物合成与自噬的影响，进一步探究其减肥机制，为后续更深入研究DNJ对肥胖小鼠线粒体的影响以及DNJ相关产品的开发提供依据。1、DNJ对肥胖小鼠体质量的影响DNJ各剂量组雌、雄鼠初始体质量与肥胖对照组雌、雄鼠初始体质量之间无显著差异(P>0.05),且均高出正常对照组体质量20%(P<0.05)以上，表明肥胖模型造模成功。灌胃结束后，肥胖对照组雌、雄鼠体质量显著高于正常对照组(PV0.05),而经过低、中、高剂量DNJ干预的雌、雄鼠体质量虽然仍显著高于正常对照组(PV0.05),但同时分别低于肥胖对照组体质量9.27%、9.08%>10.99%(P<0.05)和7.20%、6.34%、10.19%(P<0.05)o2、DNJ对肥胖小鼠血清脂联素及FGF21的影响与正常对照组比较，肥胖对照组雌、雄小鼠脂联素水平分别下降33.01%>32.35%(P<0.01),表明肥胖导致脂联素分泌下降，影响机体脂代谢。与肥胖对照组相比，中、高剂量DNJ的干预分别使雌鼠脂联素水平上升22.58%、43.19%(P<0.01),具有明显的量效关系且高剂量组脂联素水平恢复到正常水平(P>0.05)；中、高剂量组雄鼠脂联素水平分别上升25.87%、29.58%(P<0.01),均未恢复至正常水平(PV0.05)；低剂量DNJ对雌、雄鼠脂联素水平均无显著影响。与正常对照组比较，肥胖对照组雌鼠的FGF21水平下降35.02%(P<0.01),表明肥胖同样导致雌鼠FGF21的分泌下降。与肥胖对照组比较，低、中、高剂量DNJ干预使雌鼠FGF21水平分别上升16.04%(P<0.05)>26.28%(P<0.01)>37.03%(P<0.01),均未恢复至正常水平(P<0.05);与此不同的是，雄鼠肥胖对照组的FGF21水平相比正常对照组上升32.98%(P<0.01),可能发生FGF21抵抗现象，与肥胖对照组相比，中、高剂量DNJ干预使雄鼠FGF21水平分别下降10.94%(PV0.05)21.07%(PV0.01),且高剂量组恢复至正常水平(P>0.05),而低剂量DNJ对雄鼠FGF21的影响不显著(P>0.05)o3、DNJ对肥胖小鼠血清TNF-a、IL-6、iNOS的影响口正常对照肥胖对照口低剂量中剂量高剂量口正常对照肥胖对照口低剂量正常对照肥胖对照日低剂量:(H皇有果SoZ（P<0.01）；与肥胖对照组相比，#.差异显著（PVo.05）,#.差异极显著（尸V001）：同一性别不同DNJ剂量组之间，小写字母不同表示差异显著（PVO.05）：下同。ATNF质量浓度;B.IL-6质量浓度；CiNOS质量:浓度。图1DNJ对肥胖小且血清炎性因子质量浓度的影响如图IA所示，相比正常对照组，肥胖对照组雌、雄鼠血清TNF-水平分别上升53.03%、79.79%(P<0.01);相比肥胖对照组，低、中、高剂量DNJ使雌鼠TNF-(X水平下降18.73%、18.29%(P<0.05)和29.06%(P<0.01),其中高剂量组恢复至正常水平(P>0.05),各剂量之间量效关系不显著；低、中、高剂量DNJ使雄鼠TNF-a水平下降17.90%、16.32%、30.84%(P<0.01),其中高剂量DNJ效果较好。如图IB所示，与正常对照组相比，肥胖对照组雌、雄鼠血清IL-6水平分别上升40.87%、38.29%(P<0.01);与肥胖对照组相比，低、中、高剂量的DNJ使雌鼠1L-6水平分别下降11.50%、18.12%、25.72%(P<0.01),高剂量组恢复至正常组水平(P>0.05);中、高剂量DNJ使雄鼠中IL-6水平分别下降16.80%(P<0.05)>37.80%(P<0.01),具有明显的量效关系，且均恢复至正常组水平(P>0.05),但低剂量DNJ对雄鼠IL-6无显著影响。如图IC所示，与正常对照组比较，肥胖对照组雌、雄鼠血清iNos质量浓度分别上升71.49%、61.44%(P<0.01);与肥胖对照组相比，中、高剂量DNJ使雌鼠iNOS水平分别下降21.10%、28.32%(P<0.01);低、中、高剂量DNJ能使雄鼠iNOS水平分别下降16.08%、21.59%>29.01%(P<0.01),但均未恢复至正常水平(P<0.05)o以上结果表明，肥胖可使机体处于炎症状态，而一定剂量DNJ的干预可以改善肥胖所导致的炎症程度。4、DNJ对肥胖小鼠肝细胞线粒体合成与自噬能力的影响DNJ对肥胖小鼠肝细胞线粒体生物合成的影响正常对照肥胖对照口低剂量642 0.8.642。 1 H 1> 1* Mw Mw -WM*YNNDJOJ口正常对照肥胖对照口低剂后中剂量 高剂量)o)o)o)oo (>5(M5O(5O)5 4 3 3 2 2 11 Quv号遍为XM .39dAPGC-lmRNA相对表达水平：B.PGC-Ia含耳t图2DNJ对肥胖小鼠肝脏PGClIlIRNA及蛋白表达的影响如图2A、B所示，与正常对照组相比，肥胖对照组雌、雄鼠PGC-IamRNA相对表达分别下调30.97%41.16%(PV0.01),蛋白水平分别下降31.71%、28.77%(P<0.01)o相比肥胖对照组，中、高剂量的DNJ能够使雌鼠PGC-IamRNA相对表达上调24.07%(P<0.05),33.37%(P<0.01),PGC-Ia蛋白水平上升24.82%、28.27%(PV0.01),低剂量组的PGC-IamRNA相对表达及蛋白水平无显著变化;低、中、高剂量DNJ使雄鼠的PGC-I(XmRNA相对表达分别上调71.95%、78.54%、108.76%(P<0.01),其中低、中剂量恢复至正常(P>005),高剂量组高于正常对照组(P<0.05),蛋白水平分别上升18.02%、19.80%(P<0.05)和43.99%(P<0.01),高剂量组PGC-Ia蛋白水平恢复至正常水平。DNJ对雌雄小鼠血清PGC-IamRNA相对表达与蛋白水平的变化趋势具有一致性。口正常对照肥胖对照口低剂量正常对照肥胖对照口低剂信ANmmRNA相对表达水平：BNrn含量。图3DNJ对肥胖小鼠肝脏NrfIIllRNA及蛋白表达的影响如图3A、B所示，与正常对照组相比，肥胖对照组雌、雄鼠NrfImRNA相对表达分别下调43.70%、50.18%(P<0.01),蛋白水平下降41.78%、29.49%(P<0.01)o相比肥胖对照组，低、中、高剂量DNJ使雌鼠NrflmRNA相对表达分别上调45.55%、45.21%>70.00%(P<0.01),高剂量组mRNA相对表达恢复至正常水平,Nrfl蛋白水平分别上升27.42%、36.15%、50.25%(P<0.01),均未恢复至正常；中、高剂量DNJ使雄鼠NrflmRNA相对表达分别上调54.13%、67.91%(P<0.01),Nrfl蛋白水平分别上升20.31%(P<0.05)>40.26%(P<0.01),低剂量组mRNA相对表达及蛋白水平均无显著变化，高剂量组Nrfl蛋白水平恢复到正常水平。DNJ对肥胖小鼠肝细胞线粒体自噬能力的影响与正常对照组相比，肥胖对照组雌、雄鼠ULKl的mRNA相对表达分别下调35.16%、49.29%(P<0.01),蛋白水平下降26.78%、30.92%(P<0.01),表明肥胖抑制了小鼠线粒体的自噬。相比肥胖对照组，高剂量DNJ能使雌鼠ULKlmRNA相对表达上调27.71%(PVOO5),蛋白水平上升19.24%(PV0.05),低、中剂量的DNJ对雌鼠ULKl的mRNA相对表达及蛋白水平均无显著影响；高剂量DNJ能使雄鼠mRNA相对表达上调47.59%(P<0.01),蛋白水平上升22.76%(P<0.05),同样，低、中剂量的DNJ对雄鼠ULKl的mRNA相对表达及蛋白水平均无显著影响。DNJ对肥胖小鼠肝细胞AMPKmRNA表达的影响与正常对照组相比，肥胖导致雌、雄鼠AMPKalmRNA表达分别下调48.79%、49.88%(P<0.01),AMPKa2mRNA表达分别下调48.69%、48.23(P<0.01)；相比肥胖对照组，中、高剂量的DNJ能使雌鼠AMPKaImRNA表达分别上调37.04%、60.33%(PV0.01),使雄鼠AMPKalmRNA分别上调49.04%>50.68%(P<0.01);但各剂量DNJ均未对雌、雄鼠AMPK(12mRNA表达产生显著影响。5、DNJ对肥胖小鼠肝细胞CPTl活性的影响与正常对照组相比,肥胖对照组雌、雄鼠CPTI活力分别下降44.76%、35.52%(P<o.oi),表明肥胖个体脂肪酸分解代谢下降。相比肥胖对照组，中、高剂量的DNJ使雌鼠CPTl活力分别上升49.77%>58.05%(P<0.01),使雄鼠的CPTl活力上升21.39%(P<0.05)>49.60%(P<0.01),其中高剂量组雄鼠CPTl活力恢复至正常水平(P>0.05).以上结果表明，一定剂量的DNJ干预能够促进肥胖小鼠脂肪酸分解，达到降脂的目的。讨论DNJ可能通过降低肥胖小鼠炎症程度，改善FGF21与脂联素水平，进一步上调AMPKaI表达，促进肥胖小鼠肝脏线粒体生物合成与自噬，同时使线粒体脂肪酸氧化限速酶CPTl活性上升，促进脂肪酸分解，达到降脂的目的。肥胖是一种主要由长期能量摄入与消耗失衡而导致的全球性慢性疾病，影响机体的糖、脂代谢及激素代谢等诸多代谢系统，是癌症、高血压、2型糖尿病、心血管疾病的主要风险因素，已被世界卫生组织认定为影响人类健康的五大危险因素之一。甲状腺激素(THs)作为一种内分泌激素，能够促进脂肪酸氧化，促进胆固醇逆转运至肝细胞，进一步转化为胆汁酸外排，在调节脂代谢及能量平衡等方面具有重要意义。目前，已有大量研究报道了在肥胖条件下THS水平及其代谢的变化。尽管关于肥胖个体THs水平的变化没有一致的结论，但可以确定的是肥胖导致调节THS合成及释放的下丘脑垂体甲状腺轴(HPT)功能紊乱、THs功能异常、机体能量代谢失衡进一步加剧。由于THs特别是T3能够促进能量消耗，许多学者曾利用T3治疗肥胖，但最终因其对心血管存在负面效应而放弃，因此，寻找对肥胖患者甲状腺功能具有一定改善作用但毒副作用小的天然食品功能成分，对于肥胖的改善甚至治疗具有重要意义。脱氧野尻霉素(DNJ)是一种主要从植物桑中分离得到的哌咤生物碱，其降糖、降脂、抗肿瘤、抗病毒等生理活性已被科学实验证明。在脂代谢方面，目前发现DNJ降脂机理主要为调节脂代谢相关酶活性，抑制脂肪酸合成，促进脂肪酸B氧化，但对肥胖个体THS稳态的影响鲜有研究报道。以高脂膳食诱导的肥胖小鼠为模型，研究肥胖对THS稳态的影响以及DNJ的干预作用，探究DNJ改善肥胖的新途径。1DNJ对肥胖小鼠体质量的影响-正林时熙纲肥胖对照削薄"时间MArt: B缥性.，正常对熙姐与其他各世相比有U宫整弁(尸VO.05):* DNJ各剂Yffl与肥胖时熙扭相比有足若差弁(P<0 05 > .图1 DNJ对肥胖小一体*量的影¢(=1)&三堆由图1可知，肥胖对照组与DNJ各剂量组雌、雄小鼠的体质量在灌胃前(第0天)无显著差异(P>0.05)且均显著高出正常对照组体质量20%以上(PV0.05),表明肥胖模型造模成功。随着灌胃进行，从灌胃第30天起至灌胃结束高剂量组雌鼠体质量与肥胖对照组体质量差异显著(P<0.05),中、低剂量组雌鼠体质量从第35天起至灌胃结束显著低于肥胖对照组(PV0.05)；对于雄鼠，DNJ高、中、低剂量组体质量分别在灌胃第25、40天及第30天与肥胖对照组体质量出现显著差异(P<0.05)且差异持续至灌胃结束。整个灌胃阶段，肥胖对照组与DNJ各剂量组雌、雄鼠体质量均显著高于正常对照组(P<0.05)o表明在实验剂量范围的DNJ能够抑制高脂饮食引起的肥胖小鼠体质量增加，维持体质量稳定，但在实验的时间范围内并不能使之恢复到正常水平。2 DNJ对肥胖小鼠血脂水平的影响结果显示，与正常对照组相比，肥胖对照组雌、雄鼠TC、TG水平均显著上升(PV0.05),表明长期高脂饮食会引起高血脂。与肥胖对照组相比，经过45d的DNJ干预，中、高剂量组雌鼠TC水平分别下降14.63%、16.77%(P<0.05),雄鼠中只有高剂量组TC水平下降15.44%(P<0.05);低、中、高剂量组雌鼠TG水平相比肥胖对照组分别下降8.45%、13.29%、28.23%(P<0.05),中、高剂量组雄鼠TG水平分别下降14.20%>40.35%(P<0.05)oDNJ所有剂量组小鼠TC、TG水平仍显著高于正常对照组(PV0.05)。以上结果表明，用实验剂量的DNJ干预45d,能够改善高脂饮食引起的TC、TG水平升高，但并不能使之恢复到正常水平。HDL-C在胆固醇逆转运途径中发挥重要作用，可将胆固醇由肝外组织逆转运至肝脏进行代谢，防止过多的胆固醇沉积在血管壁上，起到防止动脉粥样硬化的作用，而LDLC则是心血管疾病的主要风险因素之一，降低其水平能有效降低心血管疾病发病率，VLDL-C除了携带胆固醇外还富含甘油三酯，其水平上升可能导致机体胰岛素抵抗及动脉粥样硬化。与正常对照组相比,雌、雄鼠肥胖对照组的HDL-C水平均显著下降(PV0.05),LDL-C及VLDL-C水平均显著上升(PV0.05),表明长期的高脂饮食会引起血清中脂蛋白水平异常。DNJ干预后，中剂量组雌、雄鼠和高剂量组雌、雄鼠HDL-C水平相比肥胖对照组分别上升30.21%、58.75%(P<0.05)和31.20%、42.80%(P<0.05);低、中、高剂量的DNJ使雌、雄鼠LDL-C分别下降19.30%、26.40%、30.86%(P<0.05)和8.90%、11.89%、33.33%(P<0.05);中剂量组雌、雄鼠和高剂量组雌、雄鼠VLDL-C水平相比肥胖对照组分别下降22.16%、31.01%(P<0.05)和20.93%、41.18%(P<0.05)o表明实验剂量DNJ干预45d,肥胖小鼠HDL-C、LDL-C和VLDL-C水平有所改善。综上，长期的高脂饮食使小鼠血脂水平异常，经过实验剂量的DNJ干预45d,实验小鼠血脂水平有不同程度的改善，表明DNJ能够促进机体脂代谢使血脂水平降低。3 DNJ对肥胖小鼠THS功能的影响THS能够促进脂肪酸氧化，降低机体脂肪积蓄及体质量，在调节脂代谢方面发挥着重要作用。肥胖个体中THs的合成及代谢紊乱，因此改善这紊乱状态对于肥胖的缓解甚至治疗具有重要意义。3.1 DNJ对肥胖小鼠TT4、TT3质量浓度的影响肥胖对组照高剂员组口低剂量组ax正常对照组肥胖对照组低剂量组中剂量组高剂量组A.TT4质或浓度；BT3质量浓度。相同性别，字母不同表示差异显著(PVO.05)：下同。图2DNJ对肥胖小鼠TT4及TT3质量浓度的影响(=10)由图2A可知，肥胖对照组雌、雄小鼠的Tr4水平与正常组比较均无显著差异(P>0.05)o与肥胖对照组相比，低、中、高剂量的DNJ使雌、雄鼠TT4水平分别上升12.72%、16.14%、22.03%(P<0.05)和11.95%>12.42%>15.99%(P<0.05),均显著高于正常对照组(PV0.05)。如图2B所示，肥胖对照组雌、雄鼠TT3水平相比正常对照组显著下降(PV0.05)；各剂量的DNJ干预45d后,雌鼠TT3水平相比肥胖对照组分别升高45.89%、60.22%、66.86%(P<0.05),其中低剂量组恢复至正常水平(P>0.05),中、高剂量组显著高于正常对照水平(P<0.05);低、中、高剂量组雄鼠TT3水平较肥胖对照组分别升高16.21%、40.06%、47.79%(P<0.05),但均未恢复至正常水平(PV0.05)。3.2 DNJ对肥胖小鼠TSH水平的影响甲状腺细胞与TSH结合后分泌THs,因此TSH对于维持机体THs水平的相对稳定极为重要，其微小变动都将影响THs的分泌与合成。(ImW) 'TtWHSJL雄性雌性性别图3DNJ对肥胖小鼠TSH水平的影响如图3所示，与正常对照组相比，肥胖对照组雌、雄鼠TSH水平均显著上升(PV0.05)；相比肥胖对照组，低、中、高剂量的DNJ能够使雌、雄鼠TSH水平分别降低7.15%、6.34%、9.65%(P<0.05)和5.75%、8.91%、9.73%(P<0.05)；所有DNJ剂量组的TSH水平仍显著高于正常对照组(P<0.05)o3.3 DNJ对肥胖小鼠TT3/TT4比值和肝脏DIOl的影响TT3/TT4比值可反映DIOI对T4的脱碘能力，Dlol主要在肝脏、肾脏、甲状腺和垂体表达，对于T4向T3的转化起到十分重要的作用。结果显示，肥胖对照组TT3TT4相比正常对照组显著下降，暗示肥胖可能影响到DIOl的脱碘能力，与肥胖对照组相比，低、中、高剂量的DNJ使雌鼠TT3/TT4显著上升(P<0.05),且恢复至正常水平(P>0.05),雄鼠中只有中、高剂量组TT3/TT4显著上升(PV0.05),但未恢复至正常水平(P<0.05)o表明DNJ可能对DlOl的脱碘能力具有一定改善作用。为了进一步研究这种改善作用，对肝脏DIOl活力、蛋白水平及mRNA相对表达进行测定，DIOI活力测定结果如图4B所示。相比正常对照组，肥胖对照组DK)I活力均显著下降(PV0.05)。相比肥胖对照组，中、高剂量的DNJ能够使雌鼠、雄鼠肝脏DIOl活力分别上升39.04%、40.99%(P<0.05)和26.29%、24.40%(P<0.05),但未恢复至正常水平(P<0.05)o表明DNJ能够改善肥胖引起的肝脏DIOl活性下降。肥胖对照组肝脏DIOl含量显著低于正常对照组（P<0.05）,经过中、高剂量的DNJ干预后，雌、雄鼠肝脏DIOI含量相比肥胖对照组分别上升27.09%、35.68%（P<0.05）和20.69%、29.50%（P<0.05）,并且恢复至正常组水平（P>0.05）；肥胖对照组肝脏DIOImRNA相对表达量相比正常对照组显著下调（P<0.05）,经过DNJ干预后，相比肥胖对照组，除了低剂量组雄鼠mRNA相对表达量无显著变化外（P>0.05）,其余各DNJ剂量组mRNA相对表达量均显著上调（P<0.05）o表明DNJ可上调肝脏DlcHmRNA表达，促进肝脏DIol蛋白合成。3.4 DNJ对肥胖小鼠肝脏TR含量的影响(MEaU)迫七1正常对照组肥胖对照组低剂量组中剂量组高剂量组A.TR0含量：8.7矽mRNA相对表达量。图5DNJ对肥胖小鼠肝脏TR含量及其IIlRNA表达水平的影响如图5所示，肥胖对照组雌、雄鼠肝脏TR含量及TRPmRNA相对表达量显著低于正常对照组（PV0.05）,DNJ干预后，相比肥胖对照组，雌鼠中、高剂量组TR含量显著上升27.45%、37.53%（P<0.05）,各DNJ齐IJ量组TRPmRNA相对表达量均显著上调;低、中、高剂量的DNJ使雄鼠TR含量分别上升21.97%、20.51%、27.81%（P<0.05）,中、高剂量组TRBmRNA相对表达量相比肥胖对照组显著上调（PV0.05）。表明DNJ能够促进肥胖小鼠肝脏TRP蛋白表达。3.5 DNJ对肥胖小鼠T3应答脂代谢基因的影响THs与TR结合后调控相关靶基因的转录，由于T3被认为是THs的主要活性形式，因此这些靶基因通常称为T3应答基因，已有研究表明脂肪廿油三酯脂酶（ATGL）、肉毒碱棕桶）酰转移酶Ia（CPTIa）、胆固醇7-羟化酶（CYP7A1）等脂代谢酶mRNA的转录表达受到T3的调控。结果显示，肥胖对照组中ATGL、CPTIa、CYP7A1mRNA相对表达量相比正常对照组显著下调（PV0.05）,与肥胖对照组相比，低、中、高剂量的DNJ干预均能使雌、雄鼠的ATGLCPTlaCYP7A1mRNA表达显著上调（PV0.05）。讨论田酸；图7DNJ对肥胖小鼠甲状腺激素的影响示意图M已有大量研究证实了DNJ在促进脂代谢、缓解肥胖方面的作用。在本实验所用DNJ剂量范围与实验周期内，TC、TG水平虽然有所改善但未恢复至正常水平，可能与灌胃剂量及实验时间长短不同有关。图7为DNJ对THS的影响示意图，总结了DNJ对肥胖小鼠的作用机制。THs的合成与释放受到HPT的反馈调节，当THs能够满足机体需要时，通过降低TSH分泌以减少THs合成，当THS不足时则通过增加TSH分泌促进THS合成释放。在本研究中，雌、雄肥胖对照组TSH水平显著升高,表明肥胖个体对THs的需求增加,希望通过增加TSH水平以促进THs合成释放，达到促进脂代谢的目的，但与此相矛盾的是肥胖对照组TT4水平无显著变化。T3是THS的主要活性形式，与TR结合的能力相比T4更强，然而甲状腺合成分泌的T3仅占血液循坏T3的20%,大部分T3由脱碘酶使T4脱碘产生，脱碘酶有3种亚型，其中DlCH主要在肝脏、肾脏等组织表达，决定循环T3的浓度。本研究中，TT3/TT4相比肥胖对照组显著下降，DNJ干预后，TT3/TT4上升，推测肥胖个体DIOl对T4的转化能力降低，DNJ的干预能够改善DIOl的脱碘能力，进一步对DlOl的活性、蛋白水平及mRNA相对表达进行研究，结果表明DNJ的干预能够使DIOl活性上升、mRNA表达上调，促进T4向T3转化。在本研究中，肥胖对照组TT4水平与正常对照组无显著差异，TT3水平显著低于正常对照组，与其研究结果相一致，并且DNJ干预后也出现TT4及TT3水平上升并显著高于正常对照组的现象,DNJ的干预可能使机体这种保护机制得以部分恢复，增加TT4及TT3促进能量消耗。另有研究表明肥胖造成的机体氧化应激对DlOl活性造成影响，因此，DNJ对DlOl活性改善可能与其具有抗氧化性有关。DNJ对于ATGL.CPTIa、CYP7A1mRNA表达的上调与其对THS功能的改善作用有关。此外，功能成分的效果也可能因性别不同而产生差异。因此，本实验设立双性别小鼠观察DNJ的降脂作用及对THS的改善作用是否存在性别差异。对于THs,中、高剂量的DNJ使雌鼠TT3显著上升并高于正常对照组，各剂量组的雄鼠TT3虽然上升却未恢复至正常水平；另一方面，低剂量组雄鼠TR。蛋白水平得到显著改善，而雌鼠则需要中剂量的DNJ才可使TR蛋白水平显著改善。本研究中，中剂量的DNJ便能使雌鼠TC显著下降，而雄鼠中只有高剂量DNJ才有效果，表明DNJ对雌鼠TC的改善作用较好。造成这些差异的原因有待进一步研究，同时这些差异也暗示对不同性别对象使用DNJ时，应充分考虑性别不同造成的影响，对使用剂量进行合适的调整。综上所述，DNJ能够改善机体对TSH的应答及脱碘酶活性，上调DIOl和TRmRNA表达来改善肥胖造成的THs功能紊乱，进一步靶向调节脂代谢相关基因表达，进而改善血脂水平，抑制体质量增加。