YY_T0331-2024脱脂棉纱布、脱脂棉粘胶混纺纱布的性能要求和试验方法.docx

ICS 11 120 20CCS C48YY中华人民共和国医药行业标准YY/T03312024代替YY/T03312006脱脂棉纱布脱脂棉粘胶混纺纱布的性能要求和试验方法performancerequirementsandtestmethodsforabsorbentcottongauzeandabsorbentcottonandvissegauze2024-02-07发布2025-03-01实施国家药品监督管理局发布前言In引言TV1范围2规范性引用文件13术语和定义14要求14.1 纤维鉴别14.2 酸碱度14.3 3外来纤维24.4 荧光物24.5 5纱线数24.6 每平方米质量N4.7 最小断裂力34.8 下沉时间334.9 默中可溶物4.10 10表面活性物质31.1 11水中可溶物31.12 淀粉和糊精1.13 可浸提的着色物质C34. 14干燥失重34.1 硫酸盐灰分34.2 环氧乙烧残留量,44.3 生物负载44.4 无菌45试验方法44.5 则44.6 维鉴别44.7 碱度54.8 来纤维54.9 光物54.10 线数65. 7每平方米质量65.8 最小断裂力65.9 下沉时间65.10默中可溶物75.11表面活性物质75.12水中可溶物75.13淀粉和糊精75.14可浸提的着色物质75.15干燥失重75.16硫酸盐灰分85.17环氧乙烧残留量85.18生物负载86包装及储存8附录A（规范性）测定液体色度的溶液9A.1初级溶液9A.2标准溶液9A.3对照溶液10附录B（规范性）试验液S的制备11附录C（资料性）生物负载试验方法12C.1原理12C.2仪器及试剂12C.3试验方法12C.4方法说明14C.5试验报告14参考文献15本文件按照GB/T1.12020标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。本文件代替YY/T03312006脱脂棉纱布、脱脂棉粘胶混纺纱布的性能要求和试验方法，与YY/T03312006相比，除编辑性改动外，主要技术变化如下：a）更改了"表面活性物质”的要求（见4.10,2006年版的4.10）；b）增加了"环氧乙烧残留量”的要求和试验方法（见4.16和5.17）；C）增加了"生物负载"要求和试验方法（见417和5.18）；d）增加了“无菌”要求（见4.18）；e）更改了"可漫提的着色物质"的试验方法（见5.14,2006年版的5.14）；f）更改了“干燥失重”的试验方法（见5.15,2006年版的5.15）；g）增加了"包装及储存"要求（见第6章）。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由国家药品监督管理局提出.本文件由山东省医疗器械和药品包装检验研究院归口。本文件起草单位：山东省医疗器械和药品包装检验研究院、亚都控股集团有限公司、奥美医疗用品股份有限公司、河南驼人贝斯特医疗器械有限公司、威海威高医用材料有限公司O本文件主要起草人：赵长帅、林则晨、刘减、另江蠢、曹孟杰、马恒、崔景强、邢玉珊、孟凯、曹新龙。本文件及其所代替文件的历次版本发布情况为：2002年首次发布为YY/T03312002,2006年第一次修订；一本次为第二次修订。本文件未规定纱布白度的要求，但纱布白度以及其经过相应灭菌后白度的保持性是反映纱布质量的一个方面，若需方有要求时，可在质量协议中明确相应的评价方法和评价指标。脱脂棉纱布、脱脂棉粘胶混纺纱布分无菌供应和非无菌供应两种。由于脱脂棉纱布、脱脂棉粘胶混纺纱布有很高的吸附性，如果用环氧乙烧灭菌，吸附的环氧乙烧会对病人和医务人员带来较高的危害，因此本文件不推荐采用环氧乙烧对脱脂棉纱布、脱脂棉粘胶混纺纱布灭菌。对于非无菌供应的脱脂棉纱布、脱脂棉粘胶混纺纱布，制造商提供生物负载数据可作为医疗机构灭菌时确定灭菌参数的依据。以符合本文件要求的纱布为主要原料加工的外科医用纱布敷料的要求见YY0594外科纱布敷料通用要求。脱脂棉纱布、脱脂棉粘胶混纺纱布的性能要求和试验方法1范围本文件规定了脱脂棉纱布、脱脂棉粘胶混纺纱布的性能要求，描述了相应的试验方法。本文件适用于脱脂棉纱布、脱脂棉粘胶混纺纱布。本文件不适用于全部以粘胶纤维为纱线的纱布和含药物的纱布.2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T14233.1医用输液、输血、注射器具检验方法第1部分：化学分析方法GB/T19633.1最终灭菌医疗器械包装第1部分：材料、无菌屏障系统和包装系统的要求GB/T19973.1医疗器械的灭菌微生物学方法第1部分：产品上微生物总数的测定YY/T0615.1标示“无菌"医疗器械的要求第1部分：最终灭菌医疗器械的要求中华人民共和国药典（2020年版）二部3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。1.1脱脂棉纱布absorbentcottongauze由棉纱线织成的连续机织布，经脱脂、漂白或染色、纯化而成。3.2脱月髓粘胶混纺纱布absorbentcottonandviscosegauze由棉纱线、粘胶纱线或棉与粘胶混合纱线织成的连续机织布，经脱脂、漂白或染色、纯化而成。3.3脱脂棉纱布条absorbentcottonandribbongauze由棉纱线织成并有织边的连续机织布，经脱脂、漂白或染色、纯化而成。3.4脱脂棉粘胶混纺纱布条absorbentcottonandviscoseribbongauze由棉纱线、粘胶纱线或棉与粘胶混合纱线织成并有织边的连续机织布，经脱脂、漂白或染色、纯化而成。4要求4. 1纤维鉴别5. 1.1脱脂棉纱布按5.2.1试验时，棉纤维应符合鉴别试验A、B和C的要求。4. 1.2脱脂棉粘胶混纺纱布按5.2.2试验时，棉纤维应符合鉴别试验A和C的要求，粘胶纤维应符合鉴别试验B和（:的要求。若必须区分有光泽和亚光泽粘胶时，则应进行鉴别试验Do4.2 酸碱度按5.3试验时，溶液均不应显示粉红色。4.3 外来纤维按5.4试验时，只允许偶尔有少量孤立的外来纤维存在。4.4 荧光物按5.5试验时，脱脂棉纱布、脱脂棉粘胶混纺纱布只应显示微棕紫色荧光和黄色颗粒。除孤立纤维外，不应显示强蓝色荧光。4.5 纱线数按5.6试验时，每IoOmm的纱线数宜符合表1和表2给出的要求。表1纱布的纺织要求和物理要求类型（每c的纱线数）每100mm经纱线数每50mm经向最小断裂力N每100mrn纬纱线数每50mm纬向最小断裂力N最小质量gm2经纱支数“纬纱支数1273±445±413.0505013轻型73±457±414.0505013重型70±43560±42017.0404017100±55070±43023.0404018100±55080±53024.0404020120±66080±53527.0404022120±660100±54030.0404024a120±660120±65032.0404024b140±670100±64032.0404024c120±670120±66039.0323221c110±680100±55045.0213222c120±685100±56058.0212127.5c150±7105126±67572.02121特殊规格按供需双方协商。a对于纯棉纱线，英制支数（Ne）与特克斯数（Nt）间的换算关系为:Nt-583.lNe.对于混纺纱线，需根据混纺比例，查相关标准确定英制支数（Ne）与特克斯数（Nt）间的换算关系。表2纱布条的纺织要求和物理要求类型（每cm?的纱线数）每IOornm经纱线数每50mm经向的最小断裂力N每IOomm纬纱线数最小质量gm222a120±3a60100±533.522b120±3a60100±544.024a120±3a60120±636.0特殊规格按供需双方协商。*对于25mm或50mm宽的纱布条，极限增至士4,对于12.5mm宽的纱布条，极限增至±8。4. 6每平方米质量按5.7试验时，每平方米质量（以克为单位）应符合表1和表2的要求。4.7 最小断裂力按5.8试验时，每50mm的最小断裂力（以牛顿为单位）应符合表1和表2的要求。4.8 下沉时间按5.9试验时，下沉时间应不超过IOse4.9 酸中可溶物按5.10试验时，默中可溶物的总量应不大于0.50%。4.10 10表面活性物质按5.11试验时，供试液表面活性物质泡沫应不覆盖整个液体表面。4.11水中可溶物按5.12试验时，水中可溶物的总量应不大于0.50%4.12淀粉和糊精按5.13试验时，溶液不应显示蓝色、紫色、淡红色或淡棕色。4.13可浸提的着色物质按5.14试验时，获得的浸提液的颜色应不深于附录A规定的对照液Y5,GY6或按以下方法制备的对照溶液：向3.OmL初级蓝色溶液中加入7.OmL的盐酸溶液（质量浓度为10gL的HQ）,并用盐酸溶液（质量浓度为10gL的HCl）将0.5mL的上述溶液稀释至10.0mL。4.14干燥失重按5.15试验时，脱脂棉纱布质量损失应不大于8.0%；脱脂棉粘胶混纺纱布质量损失应不大于11.0%O4.15硫酸盐灰分按5.16试验时，硫酸盐灰分的总量应符合表3的要求。表3不同材料的硫酸盐灰分材料硫酸盐灰分脱脂棉纱布0.40%脱脂棉纱布类型：13轻型0.75%脱脂棉亚光泽粘胶混纺纱布三1.20%脱脂棉有光泽粘胶混纺纱布0.45%4. 16环氧乙院残留量脱脂棉纱布、脱脂棉粘胶混纺纱布若采用环氧乙烧灭菌，按5.17试验时，环氧乙烧残留量应不大于10gg。4.17生物负载非无菌供应时，供应商宜选择标示生物负载最大限量，以每克产品含有的微生物数量表示.按5.18进行试验。4. 18无菌无菌供应的脱脂棉纱布、脱脂棉粘胶混纺纱布，应符合YY/T0615.1的要求。注：如适用，无菌检直参照中华人民共和国药典（2020年版）四部通则IlOl无菌检直法进行试验.5试验方法5. 1总则应以材料的最终形态（如无菌或非无菌）进行所有的试验。使用的所有试剂均应为分析纯试剂，试验用水应为符合中华人民共和国药典（2020年版）二部中规定的纯化水。试验液S按照附录B制备。5.2 纤维鉴别5.3 .1脱脂棉纱布5.2.1.1 试剂5.2. 1.1.1碘化氧化锌溶液:用10.5mL±0.1mL水溶解20.0g±0.5g氯化锌和6.5g±0Ig碘化钾。加入0.50g±0.05g碘后振摇15min,必要时进行过滤，避光保存。5.3. 1.1.2氯化锌-甲酸溶液:用80g±lg由无水甲酸配成的溶液（质量浓度为850gL）溶解20.0g±0.5g氯化锌.5.2.1.2分别拆取数根经纱线和纬纱线，从线中取出供试纤维，分别进行鉴别试验A、B和Co鉴别试验A:当在显微镜下观察时，每1根棉纤维长宜不超过40mm、宽宜不超过40m,应呈扁平管状、有天然转曲、横截面观察时具有形状不规则的内腔。鉴别试验B:当接触碘化氯化锌溶液时，纤维应显示紫色。鉴别试验C:将0.10g±0.05g样品加入10.OmL士0.ImL氯化锌一甲酸溶液，加热至40节，保温放置2.5h,并不时振摇，纤维不应溶解。5.2.2脱脂棉粘胶混纺纱布5.2.2. 1试剂稀过氧化氢溶液：体积分数3%的过氧化氢水溶液。5.2.2.2试验分别拆取数根经纱线和纬纱线，从线中取出供试纤维，分别进行鉴别试验A、B和U鉴别试验A:当在显微镜下观察时，每一根棉纤维长宜不超过40mm、宽宜不超过40m,应呈扁平管状、有天然转曲、横截面观察时具有形状不规则的内腔。鉴别试验B:粘胶纤维的平均长度应为25mm50mm,在干燥的状态下，用显微镜观察时，应有一致的宽度；粘胶纤维应为皱福状的，并应有多条在宽度方向上分布不均的轴向平行线。其端部切口应或多或少地呈直线状。每一根纤维的表面可能是不平的，但其横截面宜为直径IoPm20m的圆形或椭圆形。无光泽纤维中应含有无数平均直径直为025mlm的颗粒状粒子。鉴别试验C:当加入碘化氯化锌溶液时，纤维应显示紫色。鉴别试验D:用5mL硫酸溶解硫酸盐灰分试验（见4.15）中获得的残留物，同时缓慢加热，放冷后加入0.2mL的稀过氧化氢溶液，产品含有有光泽粘胶纤维的，其溶液的颜色应无变化；产品含有亚光粘胶纤维的，其溶液显示橙黄色，溶液颜色的深浅取决于所含二氧化铁的量。注：硫酸盐灰分试验中残留物的颜色可显示微黄色.5.3酸碱度5.3.1试剂5.3.1.1酪酥溶液用80mL96%乙醇溶液（体积分数为95.1%96.9%,约0.81gmL）溶解0.10g±0.Olg酪默,用水稀释至100mLe5.3 .1.2甲基橙溶液将0.10g±0.OIg甲基橙溶于80mL水中,用96%乙醇溶液（体积分数为95.1%-96.9%,约0.81gmL）稀释至100mL5.3.2试验向25mL试验液S中加入0.ImL的酪默溶液，向另外25mL试验液S中加入0.05mL的甲基橙溶液，观察溶液是否显示粉红色O5.4 外来纤维当在显微镜下检查时，纤维应全部或几乎全部是典型的棉纤维和/或粘胶纤维。检查纤维时，可以偶尔有少量孤立的外来纤维存在。5.5 荧光物在365nm紫外光灯下检杳双层纱布时，观察是否符合4.4的要求.5.6 纱线数产品应在20节±2节温度下和65%±5%的相对湿度下，放置至少24h后并在该环境中进行纱线数试验。对于脱脂棉纱布、脱脂棉粘胶混纺纱布，在远离边缘处取IOomm边长的正方形纱布片，进行经纱线数和纬纱线数计数，另取两个不同的位置，重复上述计数两次，试验位置的选取要使经向和纬向的3次计数在供试样品上是均匀分布的。计算3次计数的平均值作为纱线数，该值应与表1给出的相应纱布类型的数值相对应。对于脱脂棉纱布条、脱脂棉粘胶混纺纱布条，则对经纱和超过IOomm长度的纬纱计数；若纱布条的宽度小于IOomm时，则在纱布条的总宽度上进行经纱线和纬纱线的计数，并依据宣称的宽度计算每100mm上的纱线数。若纱布条的宽度大于Ioomm,则不对织边进行计数。另取两个不同的位置，重复上述计数两次，试验位置的选取要使经向和纬向的3次计数在供试样品上是均匀分布的。计算每一方向的3次计数的平均值作为纱线数，该值应与表2给出的相应纱布条类型的数值相对应。5. 7每平方米质量产品应在20节士2节温度和65%士5%相对湿度下，放置至少24h后并在该环境中进行每平方米质量的试验。精确量取Im长度、全幅宽的脱脂棉纱布或脱脂棉粘胶混纺纱布，对于较小的敷料，每个试片则不小于0.025m2、总面积至少为OJOn?,进行称重。计算其每平方米的质量，得出的数值应不小于表1给出的供试纱布类型所对应的数值。测定全部脱脂棉纱布条或脱脂棉粘胶混纺纱布条的质量，用公称宽度乘以长度（将展开的纱布沿中心轻轻拉伸后测量）计算其面积，得出每平方米的质量。得出的数值应不小于表2给出的供试纱布条类型所对应的数值5.8 最小断裂力5 .8.1脱脂棉纱布和脱脂棉粘胶混纺纱布准备10片样品，其中5片沿纬向剪取，5片沿经向剪取，取样部位离边缘不少于15mm,避开皱福或磨损的区域。每一片样品应宽50mm,并有足够的长度，以便夹持在拉力机上相距20Omm的夹具上。依次将每一片样品夹在拉力机的夹板之间，使机器以100mmmin±10mm/min的恒定速度拉伸。检查每组5个样品，以所得的平均值报告结果。6 .8.2脱脂棉纱布条和脱脂棉粘胶混纺纱布条对于宽度大于50mm的纱布条，沿两织边的平行方向剪两刀。从两个边缘分别抽取经纱，确保剩余经纱的精确宽度为50mm对于50mm宽或更小宽度的纱布条，用现有宽度的纱布条作为试验样品，推算50mm宽时的断裂力。准备5片足够长度的纱布条，以便夹持在拉力机上间距20Omm的夹具上o依次将每1片样品夹在拉力机的夹板之间，使机器以100mmmin士IOmmmin的恒定速度拉伸。检查每组5个样品，以所得的平均值报告结果。5.9 下沉时间向直径为Ilomm12Omm的烧杯中加水（水温20节士2节）至深为IOomm士Iomm,用镜子将重1.00g±0.OIg的1片纱布对折4次（即16层），并平整表面对于狭长的纱布条，对折直到最终长度不大于80mm将纱布轻轻放于水面，使其逐渐下沉。用秒表记录纱布完全沉入液面所用的时间.重复以上试验。以3次测量的平均值报告结果。5.10酸中可溶物在连续浸提的装置（如索氏提取器）中，用乙醒浸提5.OOg的样品4h,且每小时至少浸提4次o蒸发醒漫提液，在100节105节下干燥残留物至恒重，以残留物重量所占样品重量的百分比表示试验结果。5.11表面活性物质将外径20mm、壁厚不超过1.5mm带磨砂玻璃塞的25mL量筒，先用硫酸，再用水分别冲洗，然后加入附录B中IOmL的未过滤的液体，在IOS内用力振摇30次，放置1min,再重复振摇。静置5min后观察并报告是否符合4.10的规定。5.12水中可溶物取7.00g±0.IOg样品，放入70OmL的水中煮沸30min,不时搅动并补充蒸发损失的水量。轻轻倒出液体，用玻璃棒挤压样品中的残存液体并混入已倒出的液体中留出20OmL的液体用于淀粉和糊精（见4.12）试验，趁热过滤剩余的液体。蒸发40OmL的水浸液，在100节105节下干燥至恒重。以残留物重量所占实际样品重量的百分比表示试验结果O注：实际样品质量为4/7样品的质量.5.13淀粉和糊精5.13.1 i翻5. 13.1.15molL乙酸溶液：285mL（300g）冰乙酸,用水稀释至于100OrnL6. 13.1.20.05molL碘溶液：用少量水溶解20g碘化钾，力口13g碘，溶解，加水至100OmU5.13.2 步骤将水中可溶出物试验（见5.12）中留出的20OmL未经过滤的浸提液冷却后，加入5mL5molL的乙酸溶液和0.15mL0.05molL的碘溶液，观察溶液颜色。5.14可浸提的着色物质在一个狭长的漫提器中，用96%乙醇（体积分数为95.1%96.9%,约0.81gmL）对10.Og样品缓慢浸提，直至获得50mL浸提液。用完全相同的无色、透明、内径为15mm25mm的中性玻璃平底试管，对棕一黄一红范围内的液体色度进行测定。将上述漫提液与对照液进行比较，液面高为40mm±2mm。在漫射日光下，垂直于白色背景比较各溶液的颜色。用来测定液体色度的对照溶液应按附录A进行配制。5.15干燥失重样品在试验前应在温度为20节士2节、相对湿度为65%士5%的大气环境条件下进行状态调节至少24h,并在该条件下进行试验O称取约5.OOg样品，在105节烘箱中干燥至恒重。按式（1）计算质量损失的百分比：W1-U/1、x=-4T'-XIoo%（1）W.式中：X一干燥失重；M干燥前样品重量，单位为克（g）;2一干燥后样品重量，单位为克（g）。5. 16硫酸盐灰分称取约5.OOg样品，放入已恒重的坤锅内，缓缓地加热，然后在600节下小心地加热至暗红色。放冷，加入少许几滴稀硫酸，加热灼烧直至全部黑色颗粒完全消失。放冷，加入少许几滴质量浓度为158gL的碳酸锁溶液，蒸发并灼烧，放冷后再次称重。再灼烧至恒重。以残留物质量所占样品质量的百分比报告结果。6. 17环氧乙院残留量按GB/T14233.1中规定的方法进行试验。7. 18生物负载按GB/T19973.1规定的方法进行。注：附录C给出了一种适用于该产品的生物负载方法，生物负载测定可参考附录C.6包装及储存8. 1应有防尘包装并储存于干燥处。6.2无菌产品的无菌包装设计、包装材料选择和包装验证应符合GB/T19633.1的要求。附录A(规范性)测定液体色度的溶液A.1初级溶液A.1.1初级黄色溶液将46.Og氯化铁溶于900mL±IOmL盐酸溶液(由25.OmL±O.5mL浓盐酸溶液和975mL水混合而成)，并用该盐酸溶液定容至100OmL滴定并通过加入该酸混合液，调整至溶液中六水合氯化铁(Fecl3.6H20)的含量为45.Omg/mL该溶液应避光保存。滴定：将10.0mL±02mL上述溶液、15.OmL士0.2mL水、5.OmL士0.2mL盐酸和4g碘化钾加入到25OmL带磨砂玻璃塞的锥形烧瓶中，具塞，暗处放置15min后，加入IoOmL士5mL的水。用0.50mL士0.05mL的淀粉溶液作为指示剂，用硫代硫酸钠标准滴定溶液c(Na2S2O3)-0.Imol/L滴定释出的碘离子，滴定至终点。InlL硫代硫酸钠标准滴定溶液相当于27.03mg的Fecl3.6H20oA.1.2初级红色溶液将60g±1g氯化钻溶于90OmL士IOmL盐酸溶液(由25.OmL±O.5mL浓盐酸溶液和975mL水混合而成)，并用该盐酸溶液定容至100OmL滴定并通过加入该酸混合液，调整至溶液中六水合氯化钻(cocl2.6H20)的含量为59.5mgmL滴定：将5.OmL士0.2mL上述溶液、5.00mL±0.02mL3%(体积分数)的稀过氧化氢溶液和10.0mL±0.5mL质量浓度为300gL的氢氧化钠溶液加入到25OrnL带磨砂玻璃塞的锥形烧瓶中。轻轻煮沸IOmin,放冷后加入60mL士ImLIrnOI/L的硫酸溶液和2.Og士0.1g的碘化钾，具塞，轻轻振摇使沉淀物溶解o用0.50mL±O.05mL的淀粉溶液作为指示剂，用硫代硫酸钠标准滴定溶液c(Na2S2O3)-0.InIol/L滴定释出的碘离子，滴定至终点.溶液变为粉红色即到达滴定终点。ImL硫代硫酸钠标准滴定溶液相当于23.79IIlg的cocl2.6H20A.1.3初级蓝色溶液将63g士Ig硫酸铜溶于90OmL士IOmL盐酸溶液(由25mL±0.2mL浓盐酸溶液和975mL水混合而成)，并用该盐酸溶液定容至100OmL滴定并通过加入该酸混合液，调整至溶液中五水合硫酸铜(cUS04.5H20)的含量为62.4mgmL滴定：向25OnlL带磨砂玻璃塞的锥形烧瓶中加入10.OmL±O2mL上述溶液、50.OmL±O.2mL水、12.OmL±O.5mL2molL的醋酸溶液和3g碘化钾。用硫代硫酸钠标准滴定溶液c(Na2S2O3)，01molL滴定释出的碘离子，临近滴定终点，加入0.50mL±0.05mL的淀粉溶液作为指示剂，继续滴定至溶液蓝色消失即到达滴定终点。ImL硫代硫酸钠标准滴定溶液相当于24.97mg的cUS04.5H20A.2标准溶液用3种初级溶液按表A.1给出的比例制备两种标准溶液。表A,1标准溶液标准溶液体积mL初级黄色溶液初级红色溶液初级蓝色溶液盐酸（质量浓度为gL）丫（黄）2.40.6O7.0GY（淡绿一黄）9.60.20.20A.3对照溶液用按表A.1制备的两种标准溶液分别按表A.2和表A.3给出的比例制备对照溶液。表A.2对照溶液Y对照溶液体积mL标准溶液丫盐酸（质量浓度为gL）Yl100.00Y275.025.0Y350.050.0丫425.075.0Y512.587.5Ye5.095.0丫72.597.5表A.3对照溶液GY对照溶液体积mL标准溶液GY盐酸（质量浓度为gL）GYi25.075.0GY215.085.0GY38.591.5GYx5.。95.0GY5-97.0GYe-98.5GY70.7599.25附录B（规范性）试验液S的制备将15.Og的样品放入适宜的容器中，加入15OmL水，密闭容器浸泡2h。轻轻倒出液体，用玻璃棒挤压样品中的残存液体并混入已倒出的液体中。留出10mL的未过滤液体用于表面活性物质（见4.10）的试验,然后过滤剩余液体，得试验液S0附录C（资料性）生物负载试验方法C.1原理设定适宜的洗脱程序，采用振摇法对试样上自然污染的微生物进行洗脱，对洗脱液进行薄膜过滤，并对滤膜进行培养计数，得到试样上洗脱的微生物总数.再以产品接种的方式将一定数量的需氧芽抱接种到灭菌后的相同试样上，用相同程序进行操作，得到洗脱芽抱总数，用接种芽抱总数和洗脱芽抱总数求得修正系数.最后，通过修正系数对试样上洗脱的微生物总数进行修正，从而确定试样的生物负载水平。C.2仪器及试剂微生物过滤装置，配套无菌滤杯（标称孔径0.45m）、洁净工作台、生物安全柜、恒温培养箱、压力蒸汽灭菌器、萎缩芽抱杆菌ATCC9372.胰酪大豆陈琼脂平板（TSA平板）、含氯霉素的沙氏葡萄糖琼脂培养基平板（SDA）、洗脱液（PH7.0氯化钠-蛋白陈缓冲液）C.3试验方法C.3.1洗脱菌落数的测定C.3.1.1试样制备在洁净工作台中，分别称取5个试样，每个L0g±0lg,记为1号5号。C.3.1.2试样洗脱以无菌操作的方式将5个试样分别投入含20OmLPH7.0氯化钠-蛋白陈缓冲液的无菌三角瓶中。手动振摇Imin（建议上下振摇、左右振摇同时进行，频率约为150次min）,对试样进行洗脱。C.3.1.3移入培养基将过滤装置置于洁净工作台中，以无菌操作的方式将滤膜和滤杯装载于过滤装置上°将每份体积为20OmL的洗脱液分别经两个滤膜各过滤IoomL将滤膜菌面朝上贴于TSA平板和SDA平板上。C.3.1.4培养和计数将TSA平板置于30节35节恒温培养箱中培养3d5d,将SDA平板置于20节25节恒温培养箱中培养5d7d。定期观察菌落生长情况，点计菌落数。C.3.1.5结果计算按式（C.1）计算每个试样洗脱的菌落总数。2（C.1）式中：yi第/个试样洗脱菌数，CFU；A第7个试样TSA平板菌数，CFU；B1一第/个试样SDA平板菌数，CFU；/1,2,3,4,5.C.3.2修正系数的测定C.3.2.1制备接种悬液按照制造商说明制备每0.1mL中含有约IOoCFU萎缩芽抱杆菌芽抱的接种悬液,并精确测定0.ImL接种悬液中的芽抱数。C.3.2.2无菌试样制备按照C.3.Ll进行操作,称取5个试样,分别记为ae号用制造商推荐的灭菌方式对试样进行灭菌,并备用。C.3.2.3试样接种将5个试样分别置于直径为150mm的无菌培养皿中,向每个试样接种0.1mL芽抱悬液(约100CFU),涂布均匀,置于洁净工作台中使其干燥。C.3.2.4试样洗脱按照C.3.1.2进行操作。C.3.2.5移入培养基按照C.3.L3进行操作,将5份体积为20OmL的洗脱液分别经薄膜过滤,将滤膜菌面朝上贴于胰酪大豆陈琼脂平板上。C.3.2.6培养和计数按照C.3.1.4进行操作,将胰酪大豆陈琼脂平板置于30节35节恒温培养箱中培养3d0逐日观察菌落生长情况,点计菌落数。C.3.2.7结果计算C.3.2.7.1按式(C.2)计算5个试样洗脱的平均菌落数。X：(Xs+Xb+Xc+Xd+Xe)(C.2)式中：X一5个试样洗脱平均菌落数，CFU；XS一试样a洗脱菌落数,CFU;Xb一试样b洗脱菌落数,CFU;XC一试样C洗脱菌落数，CFU；Xo一试样d洗脱菌落数,CFU；X。一试样e洗脱菌落数,CFU。C.3.2.7.2按式(C.3)计算回收率。N-JXlo0%(C.3)式中：回收率；X-5个试样洗脱平均菌落数，CFU；N一接种芽抱数,CFU。C.3.2.7.3按式（C.4）计算修正系数。C.4 )式中:f修正系数；6回收率。C.3.3生物负载的计算按式（C5）对试样的洗脱菌落数进行修正。C. 5 )M-f×Y式中：M一试样洗脱的菌落总数的修正值,CFU；f修正系数；Y一试样洗脱的菌落总数，CFU。C.4方法说明C.4.1某些产品采用本文件给出的微生物洗脱方法（见C.3.1.2）可能得不到较高回收率。若发现回收率低于50%,可考虑对洗脱方法进行调整。C.4.2对个别产品,如果有足够的证据表明产品的回收率不可能高于50%,这时应按能获得最高回收率的试验方法进行测定°C.4.3在特定产品的常规检验中,在试验方法没有改变的前提下,可以利用已得到的修正系数进行结果计算,不必每次试验都测定修正系数。C.5试验报告试验报告应至少包含以下方面的信息：a）本文件编号；b）制造商识别和产品识别（制造商名称、产品批号、产品型号等）；c）洗脱参数；d）每个试样的洗脱菌落数、回收率、修正系数和生物负载结果（修约到整数位）；e）对试验方法任何偏离的描述。参考文献1 YY0594外科纱布敷料通用要求2 EN14079:2003Non-activemedicaldevicesperformancerequirementsandtestmethodsforabsorbentcottongauzeandabsorbentcottonandviscoegauze3中华人民共和国药典（2020年版）四部