松材线虫分离方法教你如何快速分离松材线虫.docx

松材线虫分离方法，教你如何快速分离松材线虫松材线虫是一种毁灭性虫害，被松材线虫感染后的松树，针叶出现黄褐色或红褐色，会出现萎篇下垂的现象，树脂分泌结束，会整株枯萎死亡、最终腐烂。因为松材线虫危害大,所以要加强检疫与防治。分离检验是常用的检疫检验方法，主要的分离方式有漏斗法分离、浅盘法分离，还可通过线虫分离器快速分离。下面，我们就来详细地了解下这些方法。1、贝尔曼漏斗法：(1)、置备一只直径10T5cm的玻璃漏斗，玻璃漏斗末端接上一段长约15Cm的乳胶管，置于漏斗架上，在乳胶管上装一个止水夹。(2)、对媒介昆虫开展线虫分离时，可用剪刀将其剪碎或用箭头镶子、解剖针将其撕碎，剪取大小合适的2层纱布将碎体包裹后，放入漏斗中，关闭漏斗下端乳胶管上的止水夹，然后从漏斗壁慢慢注入清水，使清水充满漏斗和下面乳胶管，水要漫过纱布包。(3)、浸泡24小时后，将培养皿置于乳胶管下，打开止水夹，接取15Inl浸泡液，供镜检或作为样品送检。2、浅盘法：(1)、前盘分离装置由2个口径不同的用不锈钢或铝合金等材料制成的浅盘组成，将其中口径。略小，底部为粗网筛的浅盘放在另一个浅盘上面。(2)、将大小合适的2层少补平铺于筛盘上，松木样品细木条(或木片、木屑)置于筛盘纱布上面，慢慢注入清水，使清水浸泡全部样品。(3)、浸泡24小时后，移去筛盘，把大浅盘内的样品浸泡液倒入烧杯中，烧杯内浸泡液中的线虫可通过自然沉降或离心方法，移去多余的水分，浓缩至适宜的量，以便显微镜检验。3、线虫分离器：(1)、将采集的植株根部的样品轻轻的洗去其表面所附的土壤。(2)、将潮湿的根剪成2CnI的小段放入筛网(筛网底部可衬一块垫巾或纱布)。(3)、把内置样品的筛网放在接虫皿上，然后打开线虫分离器的箱盖，把接虫皿及筛网均匀的排列在箱体内(两层之间用筛网支架隔开)，盖上箱盖。(4)、把波纹管带盖的一端装在箱盖入雾口，另一端插入雾化器的喷雾口。(5)、用定时器设定通电雾化的时间(设定方法请仔细阅读定时器说明书)，把设置好的定时器插在220V50Hz电源上(此时定时器进入计时状态)，雾化器插头插在定时器插孔中。(6)、顺时针旋转雾化器的旋钮开关，电源指示灯亮，证明已接通电源，雾化器开始工作，可根据需要旋转开关旋钮调节雾量大小。(7)、12-24小时(根据样品种类来确定具体分离时间)后，关闭雾化器电源，打开箱盖，先把筛网拿起，取出接虫皿，放在双筒解剖镜或高倍显微镜下检查有无线虫及鉴定线虫种类。线虫分离器与浅盘法、漏斗法分离相比，一样点利用的都是线虫喜水的特性，不同的点在于线虫分离器利用的是水雾，耗水量低，雾气还能够提供充足的氧气，保证分离出来的线虫多数是获得，而且分离得到的线虫很干净，可直接用于检验。