3.紫外分光光度法测定苯酚.docx
试验四紫外分光光度法测定苯酚1.目的要求1 .学会运用UV-2102PC型紫外可见分光光度计。2 .驾驭紫外光谱法定量分析方法与原理。2 .基本原理苯酚在220-380nm处具有特征汲取，因此其含量可用紫外分光光度计作测定，不需进行显色反应，方法简便，快速，且精确度高。3 .仪器与试剂1.仪器：UV-2102PC型紫外可见分光光度计；IOm1.吸量管1只；50m1.容量瓶7个；100m1.容量瓶5个。2.试剂：0250g1.苯酚标准溶液精确称取25.0mg分析苯酚，溶于适量水中，全部转移至100m1.容量瓶中，用纯水稀释至刻度，摇匀。4.试验步骤1 .绘制汲取光谱图和选择测量波长用吸量管取4m1.0.250g1.苯酚标准溶液于50ml容量瓶中，用纯水稀释至刻度，摇匀。此溶液在UV-2102PC型紫外可见分光光度计上，用ICm石英液槽，以纯水为参比溶液，于波长220-38Onm范围内，辨别精度Inm,绘制汲取光谱图，并选择测量波长入max.2 .绘制标准曲线取5只50m1.容量瓶，由吸量管分别加入2.00、4.00、6.00、8.00、10.Om1.O.250g1.苯酚标准溶液，以纯水稀释至刻度。摇匀。得一系列苯酚标准溶液。用Icm石英液槽，以纯水为参比溶液，在选定波特长测上列各标准溶液的吸光度。绘制标准曲线。3 .试样溶液的测定用移液管取适试样溶液于50m1.容量瓶中,按上述步骤2配制溶液并测定吸光度。平行测定二份。（黑体字部分试验报告中请按自己实际操作撰写）5.数据处理1.依据试验所苯酚汲取光谱曲线，运用理论学问依据汲取谱带的位置形态及汲取强度（摩尔吸光系数），对所做谱图进行解析，推断苯酚紫外光谱的汲取带与跃迁类型。2绘制标准曲线，并由曲线求算试样溶液中苯酚量（mg1.）.6.问题探讨本试验测定时能否用玻璃液槽代替石英液槽盛放溶液，为什么？紫外光谱试验参考文献紫外及可见光谱包括有几个谱带系，不同的谱带系相当于不同电子能级的跃迁。1、远紫外（真空紫外）汲取带这一块用的比较少，应当是特别少，一般紫外分光光度计的波长都是从200纳米起先的，因为远紫外（真空紫外）汲取带被空气剧烈汲取，顾名思义，也叫真空紫外。主要是烷燃化合物的汲取带，如C-C、C-H基团中，为6玲6*跃迁，最大汲取波长小于200纳米，范围在10-200纳米。2、末端汲取带饱和卤代烧、胺类或含杂原子的单键化合物的汲取带，由于这类化合物含有一个或几个孤对电子，因此产生nf5*跃迁，其范围从远紫外区末端到近紫外区，在200纳米旁边。所以，一般在紫外区扫描或全波长扫描的时候，建议从210纳米起先，因为许多物质都存在末端汲取，多扫了没有多大意义，从节约时间和笊灯的角度考虑，建议从210纳米起先扫描。3、R带这个汲取属于弱汲取带，但是溶剂效应比较明显，所以提示在选择溶剂的时候肯定要留意。R带是共规分子的含杂原子基团的汲取带，如C=O,N=O,N=N等基团，有n玲Tf跃迁产生，为弱汲取带，摩尔吸光系数K一般小于1001.mol随着溶剂极性的增加，R带会发生蓝移，旁边如有强汲取带，R带有时会红移，有时可能视察不到。4、K带这个用的比较多，也是有机物定性定量的基础，其最大汲取往往是由K带确定的，一般来说，假如某物质存在共枕双键，从理论上来将都可以用紫外去定性定量的，所以建议要特殊留意K带。共辗体系的TifH*跃迁所产生的汲取带，如共辗烯烽，烯酮等。K带的汲取强度很高，一般K大于100OO1.mol5、B带理论支持：芳香和杂环化合物几玲n*的特征汲取带。苯的B汲取带在230-270纳米之间，并出现包含有多重峰或精细结构的宽汲取带（这也是为什么有馒头峰的缘由）。但取代芳香燃的B带精细结构会消逝，极性溶剂也会使精细结构消逝。6、E带含有苯环的物质一般在B带和E带有汲取,但是B带的汲取远远K带剧烈，就以山梨酸和苯甲酸为例，相同浓度的山梨酸的汲取特殊剧烈，最大汲取很明显，可是苯甲酸的却象馒头峰，最大汲取特不明显，只有通过求导才能找出最大汲取来，比较郁闷。这也可以从吸光系数看出来，B带的吸光系数为250-3001.mol1小感觉不是很灵敏。E带汲取系数大，但由于E和B的作用，往往峰形不太好，不利于分析。也属于芳香结构的特征汲取，由处于环状共枕的三个乙烯键的苯型体系中的兀玲n*跃迁所产生。E带又分为El和E2带。E带属于强汲取带，K大于100OO1.mol1-1五.试验数据处理。1.依据试验所绘制的苯酚汲取光谱曲线，运用理论学问依据汲取谱带的位置形态及汲取强度（摩尔吸光系数），对所做的谱图进行解析，推断苯酚紫外光谱的吸带与跃迁类型。答：由图中苯酚的汲取曲线知入max=270nm,A=0.2570,依据朗博比尔定律A=2cb（其中A:吸光度;£：摩尔汲取系数，单位：1.mo1.1%;C样品的物质的量浓度（mo1./1.）；b:液层厚度，单位：Cm)得E=一；代入A=0.2570,b=lzc=(4x0.158)50g1.=1.264xl0-2mo1.1.(M机=94.11gmo1.)be得=1913.451.mo1.1由XmaX=27Onm,£=1913.451.mol_TT该物质在27Onm（E=1913.451.mo1.1-1）的汲取带是由11-11*跃迁产生的B带（B汲取带是苯环的特征汲取带在230270是一个宽峰是跃迁概率较小禁阻跃迁产生的弱汲取带,包含多重峰，当苯环上连有发色基团（QH）时B带的精细结构消逝,峰变包，并且产生红移，摩尔汲取强度增大）。2绘制标准曲线，并由曲线求算试样溶液中苯酚的含量（mg1.）.答：由试验数据=270nm条件下测未知试样的浓度如下表：123平均值C/mg/1.22.976222.943523.115623.0117CiW4isf=23.0117×50mg1.=1150.585mg1.六：试验思索题。本试验测定时能否用玻璃液槽盛放溶液，为什么？答：不行，玻璃比色皿与石英比色皿的透光率不同，一般在外光区用石英比色皿，可见光区用玻璃比色皿，石英比色皿可用在全波段，玻璃比色皿只能用于340nm以上波长，因为玻璃不透紫外光（对紫外光有汲取）。
