《β-烟酰胺单核苷酸产品要求和测试方法》.docx

ICS07.100.99CCSX69食品药品企业质量安全促进会团体标准T/FDSAXXXXX-XXXXB-烟酰胺单核甘酸产品要求和测试方法Productrequirementsandtestmethodsfor-Nicotinamidemononucleotide（征求意见稿）XXXX-XX-XXXXXX-XX-XX实施中国食品药品企业质量安全促进会发布B-烟酰胺单核甘酸产品要求和测试方法1范围本文件规定了B-烟酰胺单核甘酸的产品要求，描述了相应的测试方法。本文件适用于进出口原料B-烟酰胺单核苜酸产品的质量控制。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成对本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB1886.174食品安全国家标准食品添加剂食品工业用酶制剂GB1903.45食品安全国家标准食品营养强化剂烟酰胺GB4789.1GB4789.2GB4789.3GB4789.4GB4789.6GB4789.10GB4789.15食品安全国家标准食品安全国家标准食品安全国家标准食品安全国家标准食品安全国家标准食品安全国家标准食品安全国家标准食品微生物学检验总则食品微生物学检验食品微生物学检验食品微生物学检验食品微生物学检验食品微生物学检验食品微生物学检验菌落总数测定大肠菌群计数沙门氏菌检验致泻大肠埃希氏菌检验金黄色葡萄球菌检验霉菌和酵母计数GB5009.3-2016食品安全国家标准食品中水分的测定GB5009.11GB5009.12GB5009.15GB5009.17食品安全国家标准食品安全国家标准食品安全国家标准食品安全国家标准食品中总碑及无机碑的测定食品中铅的测定食品中镉的测定食品中总汞及有机汞的测定GB5009.22-2016食品安全国家标准食品中黄曲霉毒素B族和G族的测定GB5009.237食品安全国家标准食品PH值的测定GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB25584食品安全国家标准食品添加剂氯化镁中华人民共和国药典（2020年版）四部3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1烟酰胺单核昔酸nicotinamidemononucleotide；NMN一种自然存在的生物活性核苜酸。3.2-烟酰胺单核昔酸-nicotinamidemononucleotide；B-NMN烟酰胺单核甘酸（3.1）的生物活性形式。4分子式、CAS号、相对分子质量、结构式P-烟酰胺单核甘酸，其分子式为CnH15N2O8P,CAS号为1094-61-7,相对分子质量为334.22（按2016年国际相对原子质量），结构式为：5产品要求5.1 原料要求5.1.1 烟酰胺、氯化镁、酶制剂应分别符合GB1903.45、GB25584、GB1886.174规定。5.1.2 其他原辅料应符合相应国家、行业标准要求。5.2 感官要求应符合表1的规定。表1感官要求i项目要求1色泽白色2组织形态粉末3气味本产品特有气味，无异味4杂质无正常视力可见外来杂质5.3理化指标应符合表2的规定。表2理化指标序号项目要求1纯度/（%）99.52含量/（%）98.0702.03水分/(%)0.5表2(续)序号项目要求4PH3.04.05溶剂残留甲醇/(gkg)0.016钾U(以K计)/(%)不得检出7钠&(以Na计)/(%)0.05S细菌内毒素Jv(EUmg)<().29黄曲霉毒素/(gkg)<0.5a仅客户有要求时执行。5.4 污染物限量应符合表3的规定。表3污染物限量单位为亳克每千克序号项目要求1铅(以Pb计)W0.12总碑(以AS计)0.13总汞(以Hg计)0.14镉(以Cd计)0.15.5 微生物指标应符合表4的规定。表4微生物指标序号项目要求1菌落总数/(CFUZg)50()2大肠菌群/(MPNg)33霉菌和醉母菌/(CFUZg)254沙门氏菌不得检出5金黄色葡萄球菌不得检出6致泻大肠埃希氏菌不得检出6测试方法6.1 感官要求取适量样本置于清洁的纯白色平面上,在自然光线下用肉眼观察色泽、组织形态和杂质,嗅其气味。6.2 理化指标6.2.1 纯度1.1.1 2.2含量按照附录B进行检测。1.1.2 2.3水分按照GB5009.3-2016进行检测。有结晶水时宜采用GB5009.3-2016第四法卡尔费休法。1.2.4 pH按照GB5009.237进行检测。PH溶液浓度是100.00mg/m1.o1.2.5 溶剂残留（甲醇）按照中华人民共和国药典（2020年版）四部0861通则“溶剂残留测定法”进行检测。1.2.6 钾（K）、钠（Na）按照中华人民共和国药典（2020年版）四部0513离子色谱法进行检测。6. 2.7细菌内毒素按照中华人民共和国药典（2020年版）四部通则（1143）进行检测。7. 2.8黄曲霉毒素按照GB5009.22-2016第三法进行检测。6.3污染物限量6. 3.1铅（Pb）按照GB5009.12进行检测，7. 3.2总神（As）按照GB5009lI进行检测。8. 3.3总汞（Hg）按照GB5009.17进行检测。6. 3.4镉（Cd）按照GB5009.15进行检测。6.4微生物指标6.4.1采样及处理样品采样及处理按照GB4789.1执行。6.4.2菌落总数按照GB4789.2进行检测。6.4.3大肠菌群按照GB4789.3进行检测。6.4.4霉菌和酵母菌按照GB4789.15进行检测。6.4.5沙门氏菌按照GB4789.4进行检测。6.4.6金黄色葡萄球菌按照GB4789.10进行检测。6. 4.7致泻大肠埃希氏菌按照GB4789.6进行检测。附录A(规范性)纯度检测A.1试剂和材料除非另有说明，本检测中所用的试剂均为分析纯。A.1.1水：满足GB/T6682的要求一级水。A.1.2甲醇:色谱级。A.1.3磷酸二氢钠(NaH2PO4)oA.1.4氢氧化钠(NaoH)。A.1.5-烟酰胺单核甘酸对照品：可自制也可使用其他公司同类产品。A.1.6供试品溶液(0.35mgm1.)：取在环境温度25,相对湿度40%60%环境下恢好常温的供试品，精密称定，加水制成每Im1.含0.35mg的溶液，随用随配。A.1.7对照品溶液(035mgm1.)：取在环境温度25,相对湿度40%60%环境下恢更常温的P-烟酰胺单核甘酸对照品，精密称定，加水制成每Im1.含0.35mg的溶液，随用随配。A.2仪器设备A.2.1高效液相色谱仪：配有紫外检测器和柱温箱系统。A.2.2色谱柱：C18,5m×4.6mm×250mm(或同等分析效果的色谱柱)。A.2.3分析天平：感量0.01mg。A.2.4超声仪。A.2.5水系微孔滤膜：0.22m0A.3色谱分析条件A.3.1柱温：25,A.3.2检测波长：260nm。A.3.3流动相A：称取约11.9g磷酸二氢钠加水溶解，用氢氧化钠溶液调节PH至6.6,定容至1OOOm1.,用水系微孔滤膜过滤。A.3.4流动相B：甲醇，梯度洗脱程序见表A.1。A. 3.5进样量：201.0A. 3.5流速：1.Om1./min。表A.1梯度洗脱程序时间min流动相A/(%)流动相B/(%)O9914991595510851512802012.199116991A.4纯度测定检测前做空白+对照样。量取供试品溶液与对照品溶液各201.注入高效液相色谱仪，记录色谱图。典型色谱图如图A.I所示。图A.1典型色谱图12-3.225.863IQr$41369105-11.3536-12.880IlIlII附录B（规范性）含量检测B. 1试剂和材料除非另有说明，本检测中所用的试剂均为分析纯。8. 1.1水：去离子纯化水.B. 1.2氯化钠：优级纯GR。C. 1.3-烟酰胺单核甘酸。B.1.4氢氧化钠标准溶液：0.100OmOl儿。B.1.5酚猷指示剂。B.2仪器设备B.2.1电子天平：感重0.0001g。B.2.2碱式滴定管：50m1.。B.3试剂配制氢氧化钠标准使用液（0.010mol1.）：取50.Oom1.氢氧化钠标准溶液于5000m1.容量瓶中，用水定容至刻度。B.4检验步骤B.4.1空白消耗氢氧化钠标准使用液体积测定取3个250m1.锥形瓶，加入10m1.煮沸后刚刚冷却的水，加入10m1.饱和氯化钠溶液（配制时所采用的水同为煮沸后刚刚冷却后的水），加2滴酚战指示剂，用氢氧化钠标准使用液滴定至变色。30s不褪色即为终点。记录氢氧化钠标准使用液消耗的体积。B.4.2样品消耗氢氧化钠标准使用液体积测定称取样品约100mg（精确到0.1mg）于250m1.锥形瓶中加入IOm1.煮沸后刚刚冷却的水，IOm1.饱和氯化钠溶液，加2滴酚酸指示液，用氢氧化钠标准使用液滴定至变色。30s不褪色即为终点。记录氢氧化钠标准使用液消耗的的体积。并将滴定的结果用空白试验校正。每1m1.的氢氧化钠标准使用液相当于3.3422mg的P-烟酰胺单核甘酸。B.4.3结果计算按照公式（BJ）计算样品中P-烟酰胺单核甘酸含量，其中用公式（B.2）计算经滴定管校正后P-烟酰胺单核甘酸消耗氢氧化钠标准使用液的体积（VQ。(B.1)(B.2)x=(-Vo)xcx3.3422x1qom×(-w)Vft=V+V潴定管校海仇,式中：X样品中B-烟酰胺单核甘酸含量，%；V校一经滴定管校正后P-烟酰胺单核昔酸消耗氢氧化钠标准使用液（0.010mol1.）的体积，单位为亳升（m1.）；空白溶液消耗氢氧化钠标准使用液（0.0IOmOI/1.）的体积，单位为亳升（m1.）；C氢氧化钠标准使用液（0.01Omol/1.）经邻苯二甲酸氢钾标定后浓度，单位为摩尔每升（mol1.）；m-烟酰胺单核甘酸的称样量，单位为亳克（mg）；w水分，%;V-烟酰胺单核甘酸消耗氢氧化钠标准使用液的体积，单位为亳升（m1.）；V前定音校准值滴定管体积校准值，单位为亳升（m1.）。8烟酰胺单核甘酸产品要求和测试方法（征求意见稿）编制说明一、工作简况，包括任务来源、协作单位、主要工作、团体标准主要起草人及其所承担的工作等1 .任务来源B-烟酰胺单核甘酸产品要求和测试方法团体标准是由中国食品药品企业质量安全促进会批准立项，计划号：FDSA-2021-Z1.-01o2 .协作单位邦泰生物工程（深圳）有限公司、华熙生物科技股份有限公司、苏州引航生物科技有限公司、北京国康健康服务研究院、中国食品药品企业质量安全促进会、杭州瑞旭科技集团有限公司、深圳瑞德林生物技术有限公司、上海诚一芸健康管理咨询有限公司、康盈红莓（中山）生物科技有限公司、湖北广辰生物科技有限公司、山东颐然健康科技集团有限公司、奕柯莱生物科技（上海）股份有限公司。3 .主要工作起草阶段：2021年11月，成立该团体标准起草工作组。搜集国内外有关标准，结合企业标准，起草标准草案，并按照中国食品药品企业质量安全促进会团标管理办法要求，准备立项相关材料。2021年12月13日，工作组召开了线上讨论会，讨论并完善了文本相关技术内容。会后补充了相关资料，进一步对立项文件进行了整理。2021年12月22-23Bt工作组对立项审查专家的意见进行处理，修改完善相关文件。2021年12月24日，工作组代表参加了中国食品药品企业质量安全促进会组织的团标立项答辩会。与会专家均投票同意该团体标准的立项。2022年1月-4月，标准根据立项会专家意见及工作计划，通过研讨、调研、试验验证等方式，进一步修改完善标准。2022年2月18日，工作组召开标准研讨会，会议对主要技术指标和试验方法展开了充分讨论。会后，工作组内部又经反复沟通，最终于2022年3月下旬形成征求意见稿上报协会征求意见。征求意见阶段：审查阶段：报批阶段:4 .团体标准主要起草人及其所承担的工作本标准主要起草人：梁伟森、付杰、谢新开、黄晓飞、姜姗、俞秋莉、刘建、李泼、程丹、金彩科、陈绍彦、赵波、徐斌、张琦、张天萌、邹奔。承担的工作：梁伟森、付杰、谢新开、黄晓飞、姜姗、俞秋莉、刘建、李泼、程丹、金彩科、陈绍彦、赵波、徐斌、张琦、张天萌、邹奔负责提供验证数据和完善文本。二、标准编制原则和确定标准主要内容的依据1、标准编制原则本标准的制定符合产业发展的原则，本着先进性、科学性、合理性和可操作性的原则以及标准的目标、统一性、协调性、适用性、一致性和规范性原则来进行本标准的制定工作。本标准起草过程中，主要按GB/T1.1-2020标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则进行编写。本标准制定过程中，引用或参考了以下标准或文件：GB1886.174食品安全国家标准食品添加剂食品工业用酶制剂GB1903.45食品安全国家标准食品营养强化剂烟酰胺GB4789.1食品安全国家标准食品微生物学检验总则GB4789.2食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定GB4789.3食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群计数GB4789.4食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验GB4789.6食品安全国家标准食品微生物学检验致泻大肠埃希氏菌检GB4789.10食品安全国家标准食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检GB4789.15食品安全国家标准食品微生物学检验霉菌和酵母计数GBGB5009.11食品安全国家标准食品中总珅及无机种的测定GB5009.12食品安全国家标准食品中铅的测定GB5009.15食品安全国家标准食品中镉的测定GB5009.17食品安全国家标准食品中总汞及有机汞的测定5009.3-2016食品安全国家标准食品中水分的测定GBGB5009.22-2016食品安全国家标准食品中黄曲霉毒素B族和G族的测5009.237食品安全国家标准食品PH值的测定GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB25584食品安全国家标准食品添加剂氯化镁中华人民共和国药典(2020年版)四部2、确定标准主要内容的依据(1)原料要求主要原料应符合相关标准规定，如烟酰胺应符合GB1903.45食品安全国家标准食品营养强化剂烟酰胺；氯化镁应符合GB25584食品安全国家标准食品添加剂氯化镁；酶制剂应GB1886.174GB1886.174食品安全国家标准食品添加剂食品工业用酶制剂。其他原辅料应符合相应国家、行业标准要求。(2)感官要求根据企业标准，确定指标：a）色泽：白色；b）组织形态：粉末；c）气味：无味；d）杂质：无正常视力可见外来杂质。（3）理化指标纯度：射烟酰胺单核甘酸的重要的理化指标。企业内测数据如表1所示，最高值99.90%,最低值99.50%,参考企业标准，确定指标为N99.5%。水分：企业内测27组，数据如表1所示，最高值0.35%,最低值0.02猊参考企业标准，确定指标为W0.5%。pH：企业内测27组，数据如表1所示，最高值3.79,最低值3.00,参考企业标准,确定指标为3.04.0。表1批号纯度水分PHBT05H1211.09399.64%0.21%3.15BT051.1211.094-F305199.90%0.20%3.41BT051.121M10099.66%0.22%3.41BT051.121M10199.65%0.24%3.61BT05M1211.08999.50%0.090%3.79BT05M1211.09099.69%0.07%3.60BT05M1211.09199.55%0.15%3.39BT05M121M09599.78%0.070%3.15BT05M121M09799.64%0.19%3.31BT05M121M09899.75%0.06%3.35BT05M121M09999.53%0.10%3.43BT05M121M10299.50%0.13%3.46BT05M121M11099.53%0.16%3.47BT05M121M11299.59%0.16%3.42BT05M121N11399.69%0.08%3.38BT05N121H06499.52%0.16%3.12BT05N121J06699.84%0.11%3.25BT05N121J06899.76%0.11%3.00BT05N121J06999.68%0.18%3.35BT05N121J07299.60%0.20%3.41BT05N121K07699.62%0.02%3.13BT05N121K08099.72%0.18%3.15BT05N121K08199.58%0.23%3.14BT05N1211.09299.69%0.15%3.36BT05N221J06799.59%0.35%3.42BT05N221K07499.77%0.30%3.10BT05N221K07899.63%0.23%3.21含量：B-烟酰胺单核甘酸的重要的理化指标。企业内测27组，数据如表2所示，最高值1008K,最低值99.12%,平均值99.94%,参考企业标准，确定指标为98.0%-102.0%o表2序号批号含量1BT05N121K08599.23%2BT05N121K08699.12%3BT05N121K08799.57%4BT05N1211.08899.58%5BT05M1211.090100.81%6BT05M1211.09199.44%7BT05N1211.09299.69%8BT05H1211.09399.24%9BT051.1211.094100.19%10BT05M121M095100.24%11BT051.121M100100.68%12BT051.121M101100.76%13NMN-210914100.64%溶剂残留（甲醇）：从食品安全的角度考虑，考虑到中国食品有要求甲醇里包括白酒都没有高过IOppm的，因此确定甲醇指标为0.01gkgo钠（Na）、钾（K）：企业自测钠（Na）、钾（K）34组，其中钠（Na）最高值0.088%,最低值未检出，如表3所示，平均值0.016%,确定指标为钠（Na）W0.05%；钾（K）均未检出，确定指标为钾（K）不得检出。同时考虑到此指标并非所有客户都要求，故补充说明只在客户有需求时才执行。表3批号钠(Na)钾(K)报告曰期BT05H1211.0930.0069%未检出2021.11.08BT05H1211.0930.021%未检出2021.11.30BT051.1211.094-F30510.0060%未检出2021.11.10BT051.121M1000.0029%未检出2021.11.29BT051.121M1010.0014%未检出2021.11.29BT05M1211.0890.057%未检出2021.11.15BT05M1211.0900.010%未检出2021.11.29BT05M1211.0910.0043%未检出2021.11.29BT05M121M0950.0099%未检出2021.11.15BT05M121M0970.017%未检出2021.12.07BT05M121M0980.019%未检出2021.12.13BT05M121M0990.012%未检出2021.12.13BT05M121M102O.0015%未检出2021.12.13BT05M121M110O.0052%未检出2021.12.01BT05M121M112O.0029%未检出2021.12.06BT05M121N113O.0030%未检出2021.12.13BT05N121H064O.020%未检出2021.07.30BT05N121J066未检出未检出2021.08.23BT05N121J068O.010%未检出2021.08.29BT05N121J0690.013%未检出2021.08.30BT05N121J072O.0059%未检出2021.09.06BT05N121J0730.015%未检出2021.09.08BT05N121K075O.013%未检出2021.09.23BT05N121K076O.061%未检出2021.09.27BT05N121K077O.055%未检出2021.09.23BT05N121K079O.088%未检出2021.09.27BT05N121K080O.018%未检出2021.09.28BT05N121K0810.014%未检出2021.09.28BT05N1211.092O.014%未检出2021.11.16BT05N221J067O.0078%未检出2021.09.07BT05N221J067O.0079%未检出2021.08.31BT05N221J071O.0070%未检出2021.08.28BT05N221K074O.010%未检出2021.09.11BT05N221K0780.0076%未检出2021.09.18细菌内毒素：企业委托第三方检测机构进行检测，实测0.100EUmg,如表4所示，确定标准指标为0.200EUmg0表4送检曰期批号检验项目检验方法检验结果2021.04.25BT05N221C053细菌内毒素中国药典2020年版1143方法2<0.100EUmg2021.10.14BT05N121K082细菌内毒素中国药典2020年版1143方法2<0.100EUmg黄曲霉毒素：GB2761食品安全国家标准食品中真菌毒素限量规定了黄曲霉毒素等真菌毒素在食品中的限量，根据GB2761要求，确定黄曲霉毒素指标为VQ5gkgo（4）污染物限量铅、总珅、总汞、镉：企业委托第三方检测机构依据相关国家标准对铅、总珅、总汞、镉进行检测，除铅有一次实测0060mgkg外，其余均未检出，详见表5,参考企业标准，确定标准指标为WO.lmg/kg。表5送检日期批号检验项目检验方法检验结果铅2021.05.11BT05N121F054总汞镉GB5009.12-2017GB5009.17-2014GB5009.15-20140.060mgkg未检出未检出总碑GB5009.11-2014未检出铅2021.05.18BT05N121F055总汞镉GB5009.12-2017GB5009.17-2014GB5009.15-2014未检出未检出未检出总碑GB5009.11-2014未检出(5)微生物指标菌落总数：企业内测20CFUg,参考企业标准，确定指标为W500CFUg0大肠菌群：企业内测未检出，参考企业标准，确定指标为W3MPNg°霉菌和酵母菌：企业内测未检出，参考企业标准，确定指标为W25CFUg°沙门氏菌：属致病菌。企业委托第三方检测机构实测未检出，确定指标为不得检出。金黄色葡萄球菌：属致病菌。企业委托第三方检测机构实测未检出，确定指标为不得检出。致泻大肠埃希氏菌：属致病菌。企业委托第三方检测机构实测未检出，确定指标为不得检出。三、与现行法律法规、强制性标准和其他有关标准的关系，采用国际标准的程度及水平简要说明本标准与现行法律法规、强制性标准和其他有关标准协调一致。本标准制定过程中未查询到国际标准。本标准达到国内领先水平。四、重大分歧意见的处理结果和依据。本标准制定过程中无重大分歧意见。五、贯彻促进会标准的要求和措施建议(包括组织措施、技术措施、过渡办法等内容)建议本标准发布即实施。六、其他应予说明的事项。无O