新型近红外荧光探针成像细胞肺纤维化过程粘度变化.docx

背景介绍肺纤维化是一种致命疾病，患病率不断上升。肺纤维化的非放射性和无创性早期诊断可以改善预后，但却是艰巨的挑战.粘度的异常是肺纤维化的典型微环境特征。最近，粘度的精准可视化检测引起了人们的广泛兴趣.然而，由于其特性复杂，直接观察生物系统中的粘度仍然是一个巨大的挑战.线粒体粘度波动与航纤维化、解尿病、神经退行性疾病、癌症等多种疾病有关.NIRF1uocscfftcM本文亮点1开发了一种近红外荧光探针,NlR-V-BR.通过响应粘度变化来检刈细胞肺纤维化过程；2表现出很好的生物相容性且具有良好的线粒体靶向能力.内容介绍1实验部分2结果与讨论2.1探针的合成及探针的光学性质测试从图2中，可以看到NIR-V-BR的激发波长在水和50%的甘油体系中红移了40nm(520560nm),这可能是由于共匏体系的增加导致的结果.图2探针在水和50%甘油中的紫外吸收光谱Fig.2 UVHbSorPtionSlMvtraof><4minwat<rand50%Glyccml随后，测试了一系列不同的粘度悌度(08938560CP),以更准确地测试NlR-V-BR和粘度之间的响应关系.结果发现，MR-V-BR对粘度的反应可增强近180倍(图3).图3加入不同比例W油探针的荧光光潜变化及标准曲战Fig.3 HtH>rtMetM<-lml<-angt*sof>11>Im*ud<l<*<lwith<lilTrrrntprerXlrti（XZofGly<v11>larulthe?MaiMIanl<urve2.2 探针细胞毒性实验在荧光成像之前，通过标准的MTT细胞毒性实验评估了NIR-V-BR在A549细胞中的细胞毒性（图8）李3*>三i008808s888c(molI.,)图8探针在A549细肥中细胞毒性实验图Fig.RCytotoxirity<Jthrp11j>rin549<rlls2.3 线粒体共定位荧光成像线粒体内膜带负电，由于探针本身带正电，在AS49细胞中对NlR-V-BR和商用线粒体绿色定位剂进行了共定位实脸.从图9可以看出,NlR-V-BR的红色荧光与商用线粒体绿色定位剂的绿色荧光可以很好地重叠.探”英值偏色级N体-M色100200红色选出图9探针在A549细胞线快体中定位实验图Fig.9Ier。IiZHtinnMPmIinmit<Mm<lnaMA549Cdk2.4 探针细胞成像应用两种抗真菌药物，制霉菌素莫能闱素可诱导功能紊乱，导致细胞内粘度的变化如图IO所示，仅用7RW-BR处理的细胞荧光较弱，荧光强度随着制猿菌素或莫能菌素引起的细胞内粘度的增加而大大增强。图I。用物的做A549燔阻粘度荧光成像F.0DrugMimubrtniviw0*ityuncr<mrrimapnf.“A549CrllM3结论综上所述，开发了一种近红外荧光探针，NIR-V-BR,通过响应粘度变化来检测细胞肺纤维化过程。NIR-V-BR在低粘度卜.几乎没有荧光，而在高粘度条件下有明亮强的近红外荧光(73Qnm),最大可增强近18。倍。NIRT-BR对粘度具有良好的选择性。