稳定同位素标记苯丙氨酸-D5的合成研究.docx
背景介绍苯丙IW尿症是一种先天代谢疾旃，它是由于肝脏苯丙氨酸羟化靓跳乏而引起的.对茶丙胡尿症，其筛查和诊断检测的主要标记物是Hii液中藻丙奴酸浓度水平.目前，针时血液中笨丙酸的检测方法主要有细菌抑制法、荧光法、毛细管电泳法、将效液相色谱法、串联质谱法、同位素稀择短谐法等.而同位素稀和侦诺法能泌很好的避免血液我杂的电质效应和前处理的影响,方法以敬位高、准确性好,从而被广泛的应用.但同位素稀择侦谱法所用的内标试剂，基本上被国外公司所举断。合成稳定同位素标记紫丙宛酸内标试剂.应用于血液中军丙弧能含Jft准确定球检测意义很大.文章亮点1 .结合文献对于天然丰度朱丙氨酸的合成方法，设计出定同位素标记荤丙氨BbD合成路我；2 .所合成的朱丙飒酸R、产物钱被磁共振波、高效液相色谱和质谱等表征确认，化学纯度99.0%,同位素丰度99.5atom%D；3 .可作为同位素内标用于新生儿考!丙!尿症篇查，解决了新生儿率丙阴尿症研吏所需关键内标试剂紧缺的现状。内容介绍I实验部分1.1 主要仪曙与试剂1.2 实验方法1.2.1 节醇-A的制得1.2.2 浜化节-DS的制备1.2.3 笨丙氨酸中间体-DS的制备1.2.4 笨丙氨酸-Ds的制备13产品结构表征苯丙氨酸-DS的，HNMR谱图如图2所示.谱图积分为4个软（2个氨基包未出峰）,与天然丰度的苯丙氨酸结构相比，苯环上的氢原子被笊取代，在低场区域没有出现笨环峰，与苯丙第酸-D，的结构吻合.图2苯丙氨腋J）,的'HNMK诺图Fig.21IINMK<»fIilirnyliilaniiie-D92结果与讨论2.1 浪化存D，合成中浜化试剂的选择苇髀-D,演化制备澳化节D,可以采用多种汉化试剂，如；Bn和PPh,、48%HBr溶液、NaBr和破酸、六波丙IW和PPtu等.六双丙阳和PPh,体系价格品费.原料不易获得.48%HBr溶液、NaBr和硫酸等作为双化试剂，反应温度较高，反应体系是怎酸环境，容易引起紫环上笊同位素稀择,综合考虑选择条件品和、廉价易得的B力和PPtu体系作为¥«?-DS的漠化试剂，冽备阻化不D,产率和丰度都获得不错的效果.2.2 紫丙氨酸中间体-DS的制备的影响因素茶内依酸中间体-DS的制备反应是整个反应中较为关键的步骤，对相转移催化剂种类、反应物物质的限比和反应温度等进行了探讨和优化，以期也到设住的反应条件.2.2.1 相咕称催化剂种类对藻内始酸中间体-D,产率的影响二米基变甲基第基乙肝和谀化MDS反附生成茉内我酸中间体-6是典型的两相反应.相转移催化剂的选择时反应产率影响较大，选择了不同的相转移催化剂进行反应，结果如表I所示,从表I可知，节基三乙基级化钱作为相转移催化剂效果最好，所以选择X：基乙基氯化能为反应的最优相转移催化剂。表1不同种类相转移催化剂对茶内氨酸中间体-DS产率的影响JtTab.lFlflt<of<li(<*rr11tkindsof4aw*Irunwfirr(taly*tx<atheyi*4<l</plwnyaIaniiieinttne<liale-l)5名称产率/%名称产率/%TM三乙珞氯化犊78.5十二烷解三甲幕氨化钺57.5三辛底甲胚氨化能68.7*乙二解53.7园丁基溟化使64.6注:以投入的演化节%的物质的量计算产率。2.2.2 反应物物质的ht比对米丙氨酸中间体-DS产率的影响为了提高货重九标记原料澳化节-D,的原子利用率，对浪化节-D,、二米基亚甲基获基乙脑的物侦的武比为反应产率的影子J进行探索研究,结果如表2所豕.*2反应物物质的后比对聚丙氨酸中间体D,合成的影响性Tab.2HTrct<fItuilrriiilratio（tl*ZynIh（，IJirrnIaIanitN*inte11ne<liiilr-l）,反应物物质的依比"I08l：Q9IiOl：l.I1：1.21：1.3产率/%”62.478.676.I67.963.755.4注：1）反应物物质的量比为“（二羊基花甲基找基乙脐）：C（漠化K：D,）；2）产率以投人的溟化KD,的物成的收计算。2.2.3 反应温度对笨内史酸中间体-D,产率的影响为了研究反应温度对苯丙数酸中间体g、产率的影响，选择和转移催化剂为节基1乙基浪化筱反应时间12h,反应物物质的量比”（二笨基亚甲基氨基乙腑）："（浜化节-DJ=I：0.9,反应温度对苯丙氨酸中间体D,产率影响如表3所示.表3反应温度对年内氨酸中间体-D,合成的影响汁Tab.3EfIiytoftemM-raturronth'SynthrSkof4<arlulaninrirt<*11n<a<iiairl)s反应温度ZtC-5051015产率/%19.I22.230.843.755.1反应温度Zt2025303540产率/%69.478.575.170.661.4注:产率以找入的浓化节%的物质的后计算©结论本文以苯甲第-5为起始原料，经过还原、澳化、烷基化、水解等4步反应制备得到聚丙纸酸D,。以投入的笨甲醛D,的物质的量计矩茶丙软酸D,总产率为67.1%。所合成的苯丙氨酸-DS产物经核磁共振波谱、高效液相色谱和质谱等表征确认，化学纯度99.0%,同位素F度995atom%D,可作为同位素内标用于新生儿苯内阴尿症筛查。
