基于二氧化锰纳米片-纳米金共振光散射法测定碱性磷酸酶.docx

背景介绍碱性微酸l(Alkalinephosphatase.A1.P)可催化磷酸酷"团的水解反应,广泛存在于人体的件骼、肝脏和肾脏等组织中血Tfi中A1.P舁常可提示与肝炎、骨病和轴尿病等多种疾病相关，对A1.P的灵¾检测时于临床诊断具有重要的研咒意义.已开发的分光光度法、电化学法、化学发光法和表面增强拉外散射法等多种检测A1.P活性的方法，分别具Yj各自的优点,但也存在磷酸基见光易发生水解导致出现假性结果：易受背景信号的影响,可Hi发性较低，雄以用女杂样品的分析：检定性欠佳：仪器价格较为昂货等不足.共振光散射法灵敏、操作简单.具有快速、选择性好及分析成本低廉等优点。金纳米颗粒之间距离的变化会使其等离子体共振效应发生改变，二纸化纳米片呈现出优异的吸附、伟化、氧化和电子转移等性能。本文将.氧化钛的吸附和化还原特性用于A1.P测定，利用纳米金颗粒间距离改变放大检测信号，实现血清'1'A1.P的高灵敏度检测.文章亮点1 .依据MnO?纳米片的吸附和氧化还原特性，基于纳米金表面等离子体效应的改变，建立了检测血清域性偶酸的(A1.P)活性的新方法：2 .A1.P浓度在0.2535mIUml.范围内与放射光强度的降低假d620nm呈现对数相关，检出限3o为O.I9mIUm1.:3 .方法已用于血清戚性磷酸穆的检测,检测结果与临床检验分光光度法?.现良好的相关性.图文介绍1动态光散射图采用改良柠株酸朋还原法合成的纳米金颗粒平均粒径约为11.7nm.MnO2的平均粒径为208.6nn2吸收光谱纳米金溶液呈澄清亮红色，在519nm处存在表面等窗子体共振吸收（图I）,而MnS的吸收峰在365nm处.当加入A1.P后.Mno?在365nm处的吸收峰逐渐消失,且随A1.P浓度的增加,纳米金在519nn处吸收岬的强度逐渐及弱。I.MaoJ纳米”:2.Mn6给米小热米企QmI1.lm1.A1.P;3.MO>S*)*K*ftfc-4mll-Vml.IJ>:4.MaO.S*>V-S*fc-HImllVm1.AU>:5.ZnO：MK片幽«如ISrum1.A1.P：6.纳米金存渔图I纳米金-MnO：纳米片-A1.P体系吸收光谱图Fig.1AbsoqilIixispelraofgoldmn>parliclesMnO:nax>shee<-A1.P3共振光Itt射光审纳米金溶液在620nm处有一共振光散射峰但光强度较弱。当MnO2纳米片被加至纳米金溶液中，纳米金在MMx纳米片发生聚集，纳米金在62Onm处的共振光散射信号显著增强。当加入A1.P后，体系的共振光散射强度随A1.P浓度的增加逐渐减弱，如图2所示。I(XX)8006004002002003004005006700波K/nm由上划下加人的A1.P分鹏为：0.2.4.H.IS.ZOmI1.Vm1.AU,E2纳米金腐粒eMnS纳米片.A1.P体系共振光放射光塔Fi.2Resonancelightscatteringspectraofgoldnanoparticles-MnO?nanoshcct-A1.P4g*的逸舞4.1 缓冲溶液的选择实脸考察了PH6.47-8.04Na?HPObKH：PO,慑冲溶液对体系wttIm的影响。实验衣明,当PH7.73W.体系A/加酸大(图3).故选用PH7.73.2001.2IIK>4KHsK>4帆冲的淞*M»叩E1.AP*660m1.MnOJT*)叩E1.B?於分,IOInIUjm1.A1.PB3缓冲溶液PH的选择Fig3SelectionofpHforbuffersolution4.2 纳米金溶液用量的影响考察纳米金溶液的用成对体系/62M(I影响(图4>o实脸表明，/««“先随纳米金溶液浓度的埴加而增大，后趋于稳定，-1012345678.t(W5m1.T)XIOjI1.pH7.73Na川KhKH96缓冲洛淞式IHgln1.P2.6OHan1.Mg沾米冷COmlUMA1.P三4纳米金溶液川业对A/小川的影响Fig.4En(XtofUSUgcOfgoldIumoPaniCkssolutiononron4.3MnO2纳米片用量:的影响考察MnO:纳米片用量对体系At>nm的影晌,如图5所示.结果表明.在一定质量浓度能国内,AAUtom随MnO2溶液浓度的增加而增大，后降低.3Q0lpH7.75NgHlIOrKHIPo,或冲活液-JDHBrm1.AAP+Mn6T0(irm1.物米l(lmlUu1.Al.FB5MnOi纳米片用一对nhn的影响FiR.SEffectsofusageofMnO?nanoshcctson/ax.结论通过反应体系的动态光散射粒径分析、吸收光谱和共振光放射光谱分析可知,MnO2纳米片可吸附纳米金颗粒在其表面发生聚集，聚集的纳米金颗粒可产生很强的共振光放射信号。当A1.P催化AAP水解生成AA时，AA可将Mn0?纳米片还原生成Mn2，纳米片溶解导致了纳米金聚集程度降低，62Onm散射信号的降低值与A1.P浓度呈良好的对数相关,已用于人血清中A1.P检测,并与临床检验分光光度法结果比较，2种方法间具有良好的相关性。因此，侬据MnCh纳米片的吸附和氧化还原特性，基于纳米金表面等离子体效应的改变，可建立一种测定人血清A1.P新方法。