规模化养殖场口蹄疫疫苗免疫案例分享.docx

口蹄疫是由口路段病毒引起的,通过牛、卡、猪等偈蹄动物传播.呈现明显发热症状，并具有高度接触和远距离快速性插的动物疫烧.该病的发烧率接近100%.成年动物的死亡.率较低口一般可控.仔猪主要因出现急性Ff肠炎和致死性心肌炎，死亡率高达70%左右，断奶前幼苗死亡率可高达100%，我国目前采取以免疫为主的综合防控措施进行口蹄疫防控.由于口蹄疫病毒容易发生变异导致新毒株不断出现，所以，在对动物进行疫苗免疫时，应了解当地口踏凌流行情况免疫与当地流行谦株匹配的疫苗.才能有效防控口蹄疫,使疫苗发挥更大的作用.免疫抗体是衡此疫苗免疫效果的正要指标。目前，国际粮农殂织（FAO）和世界动物卫生组织推荐液相阻斯E1.ISA方法来对口蹄疫疫苗免疫效果进行评价，研究与实践去明，口蹄疫液相阻断EuSA抗体检测技术具有良好的敏感性、快速诊断性和可理复性，与攻毒保护有很好的相关性，现被广泛应用于门第投免疫抗体水平的监测。液相阻断E1.ISA方法专为检测FMD全病揖抗体设计，针对完整病毒粒子的抗原位点进行抗体定性定量检测,通过对被检Ihl法的倍比稀择,定量测定血清中抗体含量的高低，从而真实反映出免疫后机体抵御病格侵入的能力。授苗免授以后，为了掌握疫苗免役对猪群的保护力,需要抽检样品检测抗体.对兔我水平进行评价。一、材料与方法（-疫苗某企业猪口蹄投0、A型二价灭活疫苗.（二）实验器材单道、12道移液擀若干96孔U型反应板若干.37恒温生化培养箱、100mI求简、IMark-的标仪.（三）血清样品福建某养殖场提供50口龄、60口的、80口龄、IlOn龄、140口龄商品猪血清各20份.该规模化养殖场”踪疫及苗的免投程序为：母猪一年普免三次：仔猪90日龄免疫一次.（四）检刈试剂盒口蹄疫。里、A型液相阻断抗体悔测试剂盒，购自兰州曾研生物有限公司.（实脸方法及判定标准采用液和阻断E1.ISA测定免疫动物血清中口蹄疫特异性抗体，具体方法如下：1 .待检血清临修按503年孔用PBST做1:16开始的2倍桶择至1:128,母孔加入503桶择至规定浓度的门踹疫病毒灭活抗原,对照孔加100UI,娠荡混匀，4过夜.2 .过夜后,将抗原抗体板上的液体按每孔50ul转移到包装0型11雏疫病毒欠抗的EUSA反应板上,37避光温行60min,3 .弃去各孔中液体.他干。每孔加满PBST清洗液.静置的30s,重复5次.拍干，短孔加入50ul口蹄疫病毒豚以抗体工作液，37避光温付30mlrv4 .弃去各孔中液体.甩干.每孔加满PBST清洗液,静置的30s,重现5次.拍干，姆孔加入50Ul口蹄疫嵇毒兔抗豚以抗体的结合物工作液，37避光温方30min.5 .弃去各孔中液体，甩干。每孔加满PBST清洗液，峥豌约30s,由熨5次，拍干，每孔加入503显色液（TMB底物A、B溶液按1:1混匀,37避光涉对15min.6 .每孔加入SoUl终止液.读取0D450nm值.7 .结果判定：以抗原抗体对照平均OD4S0nm的50%为临界值，被检血清稀徉孔OD450nm的值大干临界值.抗体滴度为1:128：小于或等于临界值.抗体滴度为1:32：若临界他处于两个滴度之间，应取中间二、结果60日龄商品猪的115疫O型.A型免疫抗体合格率分别为60.00%,80.00%.80日龄商品猪的口蹄狡O型、A型免疫抗体合格率分别为60.00%,90.00%,其它群体免疫抗体合格率都能达到100.00%（详细结果见下图表.KUMtXXAlino111»O24RoMMMJDOBOJOO244OW0110I0jW*oN18IOjMt4t.tietr>*4."c但m<i.不t.如僧ceA9w*TOO三、讨论该场种猪一年普免三次.每次2ml：仔猪90H龄免疫一针直至出栏,免疫剂量为2ml。对在此免疫程序卜的抗体检测结果分析如卜，(一)50日粉猪81未免疫，。型、A型抗体合格率能膨保持100.00%.说明母猪群体免疫良好，0-50日龄仔猪具有高母源抗体水平.(一)60日静、80日龄两个阶段O型抗体合格率为60.00%已低于国家标准(70%>.A鞭抗体合格率也出现下降趋势，说明6080日龄阶段群体存在学染病毒的风险：该场90H龄苜免时间需提前至55-60日龄.（三）检测结果显示，90日龄免疫后110日龄、140日龄猪群能维持高抗体水平：但建议在160日龄、180日龄和出栏前采血监测抗体水平，确定免疫一付后裔抗体水平的维持期。综上所述，需监冽母源抗体水平,确定首先时间：对于口蹄授免疫，首次免疫为基础免疫.免疫后抗体水平相时较低，保护期较短，间隔1月加强免疫后.抗体水平才能快速达到高位水平，二免后保妒期可延长到4-6月.所以,根据上述检测分析结果，为保证猪群在各个阶段有足妹的保护力，需建立科学合理的免授程序，保证动物免受授病侵害.