五味子油抗氧化活性成分的提取与分离.docx

长春中医药高校毕业论文（设计）开题报告书课题名称：五味子油抗氧化活性成分的提取及分别学生姓名：伍良兰年级专业：年级生物制药班级学号：班02080129指导教师：至娜指导老师职称：副教授实习单位：长春中医药高校实习同学到实习单位后，在导师指导下，做好开题的各项打算工作，查阅文献、设计方案。三周内完成开题报告，并将打印稿及电子版交到院系办公室。另附文献综述一篇，要求文献综述在15()()字以上，参考文献不少于15篇，其中外文文献应在2篇以上，并将其中一篇或部分内容(不少于500字)译成汉语。毕业论文（设计）题目来源（科研、生产、教学、其他）:科研二、毕业论文（设计探讨的目的、意义、及国内外进展状况：1 .目的对五味子油的提取工艺加以优化，为五味子的开发利用供应理论依据及技术支持。2 .意义（1）使中药五味子得到良好的发展,对五味子的提取工艺和顺垃标准进行规范化.（2）建立有效的五味子甲素、五味子乙素提取工艺，并在此基础上建立快捷、精确的分析方法，此法对于限制五味了的质量,制定和完善五味了的侦量标准具有现实意义。（3）从五味子有效成分的提取分别、药理探讨到新药开发，必将对五味子的进一步开发利用开拓新的方向.3 .国内外进展状况五味子药材现今在市场上非常受欢迎，野生资源破坏较为严峻，由于五味子分布的地域不同，采收期也有少许差异，这样就造成五味子药材的品质具有肯定的差异性：另外，五味子药材中有效成分五味子甲素、五味子乙素等常及大量树脂状物共存，在般制备过程中不易被提取出来。给工业生产造成很大困难，同时也奢侈了大量药材。二、主要探讨内容和技术路途：1 .探讨内容采纳溶剂提取法对五味子相关组分进行提取分别，得到Ii味了多种仃效成分，在此基础上对五味子木脂素进行最佳工艺筛选2 .技术路途(I)五味了药材粉碎过筛,得五味了粉碎物：(2)加入石油隧，水浴，回流，得药液：(3)过滤，得液体和药渣，液体回收石油醍，并减压凝缩得脂肪油；药渣60C干燥，得干燥的药渣：(4)在干燥的药渣中加入乙解回流提取，并过滤，得药液和药渣，药液中乙醇回收并浓缩，得木脂素。(5)药渣加蒸懒水胭煮提取，过滋取药液酹沉后掰心取固体，固体用无水乙醇闪酮和乙都洗，得相多他。四、探讨(试验条件及可行性分析：多次参及育校生创业训练支配等课题，积累r丰富的试验阅历及试验技能，培育出了良好的科研看法，并且都精彩的完成了这些项目。总之，课题负货人有实力完成该课题。(1)有符合探讨条件的试验室，配备的试验设施能筋达到探讨要求。(2)试验药材产量多，便利获得.(3)课题负贲人本科期间学习了生物学以及化学相关理论，在学问结构上完全可以满意选题的须要。(4)指导老师具有丰富的指导学生的阅历,指导老师的试验室担当着国家自然科学基金等项I，试的室从试验条件上完全可以满意该项目的要求。因此，I前的现状分析看，课题会有好的预期。五、特色及创新：科学性：本探讨设计的试验方案可行、方法合理,试验室仪曙较为先进，所得数据真实牢狂，试验结果具有很好的实际意义。先进性及创新点：为五味子的进一步开发利用供应了依据，更为工业生产对五味子的应用供应了参考条件，削减了五味子工业化去产的损失，降低了工业化生产的成本及原料的消耗。六、探讨进度刚好间支配：2016年1月-2016年1月20日：资料收集阶段，通过杳找国内外近几年的有关五味子油抗氧化活性成分探讨的论文和书籍，熟识、了解五味子，做好相关的总结。2016年1月20日-2016年2月30日：预试验阶段“试验材料的购置、处理，记录各种试验材料的来源，处理方法。设计可行的试验方案，进行预试验操作。2016年3月-2016年5月：正式试验阶段。依据修改后的正式试验设计，完成五味子提取分别成分，记录数据以及相关指标的测定工作.2016年5月：成果总结阶段。在老师的指导卜.，学生对试验结果进行分析汇总，得出结论，撰写论文。七、指导老师看法:指导老师签字:长春中医药高校本科生毕业论文（设计）开题支配任务书姓名伍良兰年级、专业、班级2012然生物制药学号1202080129实习地点：长春中医药而校指导老师：课题题目：五味子油抗氧化活性成分的提取及分别开题计划指导老牌签字：学生签字：年月日五味子有效成分的分别及提取方法的探讨进展摘要五味f为木兰科植物五味fSchisandrachinensis<urcz.）Bai1.1.或华中五味了SchisandraSphenaniheraRehd.etWik.的干燥成熟果实。前者习称“北Ii味子”，后者习称“南五味子五味子酸、甘、性温，有益气生津、收敛固涩、补肾宇心之功效.近年来，五味子在临床应用上更加广泛，随着对五味子化学和药理的深化探讨，对相识五味子及其成分多方面的药理作用和临床应用供应了理论基础。从五味子有效成分的提取分别、药理探讨到新药开发，必将对五味子的进一步开发利用开拓新的方向，现将五味子油的抗氧化成分的提取及分别进展综述如下。关健词五味子：有效成分：提取：分别：方法1 .概述五味子在全世界约有50种，主要分布在东亚地区。在我国五味子属植物在我国分布广泛，长期以来,人们依据产地不同，习愦地把产于东北三省及内蒙古的称北五味子（乂称辽五味子）；产于南方的称南五味了;产于西北地区的称西五味了二北五味了国内外久负盛名，以其果实肉厚、粒大、有油性、光泽好、药用成分高、疗效显著而著称,优丁西五味子和南五味子,颇受国内外众商和药厂:存昧.主要含有木脂素类、多犍类、挥发油类和其他类化合物。近年来探讨证明其活性成分具有抗肿痛、抗病毒等生物活性.五味子除药用外,还可以作为调味剂和食品添加剂用于炖鱼炖肉、熬汤、熬粥、泡茶、加工酸奶等果汁饮料卜1,现代药理探讨表明，多触、挥发油、木脂素是五味子的主要活性成分。'目前为止，五味子共分别鉴定出200余个化合物，其中含量较高、探讨较多、较深化目应用较广泛的主要成分为木脂素，约150多种，其次为多纳和挥发油。现将五味子有效成分的探讨进展介绍如卜,。2 .主要化学成分2.1 木脂素类五味子含多种木脂素成分，是五味子的主要有效成分之'O含限为2M8V。从1961年苏联探讨着KOChCtkoV等"第次从五味子果实中分别出了五味了醇、Y-五味子素、去辄五味子素、伪-Y-五味子素、五味子素等五种化合物起先，到目前为止，国门外探讨人员共分别出150余种木脂素类成分这些分别出的木脱素成分按分子结构特点进行分类，可将五味了木脂素成分为5大类:第类，联苯环辛二烯类：其次类，螺苯骄吹喃型联苯环辛二烯类：第三类，4-芳基四氮茶类：第四类，2,3-二甲基-1,4-二芳基丁烷类：第五类，2,5-二芳基四氢肤喃类。2.2多糖类目前国内外对五味子多犍探讨多集中在粗多糖的提取及定量测定方面”,而对其单一多触组分纯化以及鉴定方面的探讨还很少。五味子多糖的活性及木脂素的活性类似，且对糖尿病有显著的治疗效果。2.3挥发油类五味子中含有5%6%的挥发油，近年探讨认为，五味子挥发油主要成分为帮类化合物上包含单砧类、含氧单砧类、倍半带类、含氧倍半砧类，还有少量醇、酸等含氧化合物。五味子挥发油有侬咳的功效，间接调整中枢神经系统吗还有较强的抗纤溶筋原激活物抑制剂的活性2.4其他类近年来，众多探讨者在优化五味了提取工艺的同时，还分别H1.其它成分。五味子中含有机酸9%左右，主要为枸极酸、苹果酸、酒石酸、琥珀酸、维生素C等.此外，林伟卓等冈探讨表明，五味子干果中全氮量为1.37%,总械基酸量为9.231%.在分析的16种氨基酸中，人体必需氨基酸有6种，总量为3.135%.3.五味子化学成分的提取分别方法进展3.1木脂素类的提取分别方法进展1961年苏联探讨者Kochetkov等”第一次从五味子果实中分别出了五味子醇、Y-五味子素、去氯五味子素、伪-Y-五味子素、五味子素等五种化合物,五味子醇甲、五味子酯甲等木脂素类成分在传统提取方法中主要采纳冷浸法、回流法和渗漉法等，这些方法提取时间长、活性成分提取率低。我国学者分别五味子木脂素始于20世纪70年头，王慕邻采纳甲醇提取,高效液相层析法从北五味子中分得五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、五味子醇甲、五味子醇乙、五味了酯甲、五味子酯乙7种活性成分。宋万志等5从四川和云南产的红花五味子中分得8个木脂素成分,即五味了丙素、红花五味了酯、五味了甲素、红花五味子索、五味子,酚酯、五味子酚乙、五味了,酚和gomisino13 .2多篇类提取分别方法进展薛梅等M于2003年首次从五味子中提取多糖,并测定其含量为11.98%张兰杰等“在恒温中将北五味子水提取，经过戏液浓缩、醇析、SaVage法脱蛋白、脱脂、脱色、DATE纤维素柱洗脱等步.骤，分别出两种多糖组分，质量分数分别为0.387%和0.06迷。孟宪军等"应用水提醇沉以及多种方法除蛋白，从五味子果实中获得一种粗多触SCP-BIk3.3挥发油类提取分别方法进展周英等“'报道,到2003年为止,从五味子属植物中分别鉴定了200个成分，其中包括31个三枯类成分。刘长姣等g采纳水蒸气蒸馈法提取五味子种子挥发油，得率为2.34%,采纳GC/MS联用法鉴定了52种化合物，含量最高的三种化合物依次为衣兰烯、B-雪松烯和双-表-雪松烯，鉴定的成分主要属于倍平菇类和单菇类化合物。李晓宁等他采纳GC-MS法从北五味子挥发油中分别鉴定了49个化合物,其中倍半菇类约占挥发油总贵的60%.4 .4其他类提取分别方法进展刘嘉森等E从湖北利川产五味子中分别得到5个化合物:表安五酸、2,3-二胫基丙基卜八酸酯、五味子酚、SChiSandrOniCaddiS6sdisandrOIiCaeid和B谷跄醉,其中表安五酸为首次从自然界分别得到。4.总结由于五味子品种繁多、分布广泛，所以出现混用、滥用等不良现象，给五味子的开发利用带来很大的闲难。且现在中药五味子已被制成多种剂型，而由于五味子分布的地域不同，各地的采收期也略有差界，这样就造成五味子药材品质也不能保证，而且五味子药材中有效成分五常及大量树脂状物共存，在一般制备过程中不易被提取出来。因此，建立有效的五味子有效成分的提取及分别方法，对于限制五味子的质量，制定和完善五味子的J贞曼标准具有现实意义O1.1YangFJ,MaCH.Yang1.Cta1.EnrichmentandpurificationofC1.coxyschizandrinand-schizandrinfromtheextractofSchisandrachincnsisfruitbymacroporousresinsj.Mo1.ecu1.es.2012»17(3):3510-3523.2 MaCH，1.iuTT.Yang1.,cta1.Preparationofhighpuritybipheny1.CyC1.ooCtCnCIignansfromSChiSandracx1.ractbyionexchangeresincat-a1.ytictransformationcombinedwithmacroporousresinseparationJ.Journa1.ofChromatographyB.2011.879(30):34443451.3 MaCH,1.iuTTYang1.,ea1.Studyonionic1.iquidbasedu1.tra-sonic-assistedextractionofbipheny1.CyC1.oOCtCnCIignansfromthcf11itofSchisandrachincnsisBai1.1.j.Ana1.yticaChimicaActa>2011,689(I):IIO-116.4程振玉，杨英杰，刘治刚，等.五味子主要有效成分的综合提取方法J.江苏农业科学，2014,42(6):273276.5王佳丽,杨洪涛.五味子主要化学成分的药理探讨.河南中医，2014.2,34(2):357358.6高建平.五味子南五味了基源植物的比较探讨D.上海：复旦高校药学院2003.7陈道峰，王彦涵，高建同等.植物化学分类学(周荣汉)M.上海:上海科技出版社，205:451-452.8史琳,王志成,冯叙桥.五味:化学成分及药理作用的探讨进展.药物评价探讨DrugEva1.uationResearch.2011.6,34(3):208212.9刘继永,王英平,刘洪章.五味子化学成分及药理探讨进展.中国科技核心期刊,2005,3:50-53.10应国清,俞志明，单剑锋,等.北五味子有效组分的探讨进展J.河南中医200525(6):8587.11戴好富，谭宁华,周俊,等.北五味子挥发性化学成分探讨U1.中草药200535(9):1309131012林伟卓,陈玉海.北五味了全氮及氨基酸含量测定J.特产探讨，1998(1):3536.13王慕邹,李百龙.北五味子有效成分高效液相层析测定J药学学报，1983,18(3):209'214.14宋万志,童玉懿,吴丰.红花五味子的资源利用探讨J.中草药，1990,21(11):36.15薛梅,周静.五味子多糖的提取及含量测定J.陕西中医，2003,24(3):267268.16张兰杰，张维华，赵珊红.北五味子果实中多糖的提取及纯化探讨J.鞍山师范学院学报，2002,4(1):58-60.17孟宪军，秦琴，高晓旭.五味子多糖的分别纯化及清除自由基探讨J.食品科学，2008,29(1):91-94.口8周英,杨俊山，王立为,等.五味干科植物三帮成分J.中国药学杂志,2003,38(2):8183.19刘长姣，张守勤，孟宪梅.五味子种子油脂和挥发油的成分分析.食品工艺科技,2014,35(16):52-54.20李晓宁，崔卉,宁又群，等.辽五味子果实挥发油成分的鉴定。药学学报,2001,36(3):215'219.21刘嘉森,王文贵,黄梅芬.湖北利川产五味子化学成分探讨J.中草药，1990,21(7):6.EnrichmentandpurificationofdeoxyschizandrinandY-SchizandrinfromtheextractofSchisandraChinensisfruitbymacroporousresins.Inpresentstudy,theperformanceandseparationcharacteristicsof21macroporousresinsfortheenrichmentandpurificationofdeoxyschizandrinandv-schizandrin,thetwomajorIignansfromSchisandraChinensisextracts,wereeva1.uated.Accordingtoourresu1.ts,HPD5000,whichadsorbsbythemo1.ecu1.artiersmode1.,wasthebestmacroporousresin,offeringhigheradsorptionanddesorptioncapacitiesandhigheradsorptionspeedfordeoxyschizandrinand-schizandrinthanotherresins.Co1.umnspackedwithHPD5000resinwereusedtoperformdynamicadsorptionanddesorptionteststooptimizethetechnica1.parametersoftheseparationprocess.Theresu1.tsshowedthatthebestadsorptiontimeis4h,therateofadsorptionis0.85m1./min(4BVh)andtherateofdesorptionis0.43m1./min(2BVh).Aftere1.utionwith90%ethano1.,thepurityofdeoxy-schizandrinincreased12.62-fo1.dfrom0.37%to4.67%,thepurityofY-SChiZandrinincreased15.8-fo1.dfrom0.65%to10.27%,andtherecoveryratewasmorethan80%.大孔树脂从五味子的提取物中浓缩及纯化五味子甲素和五味子乙素摘要：在本探讨中，由于21个大孔树脂对五味子甲素和五味子乙素的浓缩纯化性能和分别特性，对五味子木脂素中五味子甲素和五味子乙素这两个主要的提取物进行评估。依据我们的结果显示,HPD5000吸附的分子层模型,是最好的大孔树脂,它的的吸附和解吸实力更强和吸附速度更快相比其他树脂对五味甲素和五味子乙素的分别和纯化。充溢了HPD5000树脂被用来执行动态吸附和解吸试验优化技术参数的分别过程。结果表明,最佳吸附时间是4h,吸附率为0.85亳升/分钟(4BV/h)和解吸率是和43毫升/分钟(2BV/h).用90%的乙醉洗脱后,五味子甲素的纯度增加12.62倍,从0.37%提高到4.67%,五味子乙素的纯度增加15.8倍,从0.65%提高到10.27%,回收率是80%以上.