交叉配血试验临床应用.ppt

交叉配血试验,交叉配血试验,一、实验目的二、实验原理三、实验步骤四、方法学局限性五、临床意义六、临床新进展,实验目的,掌握凝聚胺交叉配血试验的原理、方法、结果判读熟悉交叉配血试验的临床意义,实验原理,交叉配血试验分两管：主侧：受血者血清+供血者红细胞 次侧：供血者血清+受血者红细胞,实验原理,红细胞表面带有大量的负电荷，悬浮在电解质溶液中，会吸引大量阳离子，红细胞则被扩散的双层离子云所围绕，形成zeta电位。,实验原理,凝聚胺技术首先利用低离子溶液（LIM）降低介质的离子强度，减少红细胞周围的电子云，如有红细胞抗原相应的血清抗体存在，则可促进红细胞抗原与血清抗体的特异结合。,实验原理,再加入凝聚胺溶液，溶解后产生很多正电荷，中和红细胞表面带有的负电荷，红细胞zeta电位降低，缩短红细胞距离，无论是否有红细胞抗原相应的血清抗体存在，主、次侧管均可产生非特异性聚集。,实验原理,最后加入悬浮液，具有中和凝聚胺阳离子的作用，使正常红细胞的非特异性凝集散开，红细胞抗原与相应血清抗体的特异性凝集仍然存在。,实验步骤,一、取出供血者血浆及红细胞，并将冰冻血浆放入37温箱解冻15分钟。,实验步骤,二、受血者抗凝全血标本离心备用,3000r/min，5min,实验步骤,三、将受血者血浆2滴加入主侧管，红细胞1滴加入次侧管,实验步骤,四、剪下供血者血袋上的血辫，将供血者红细胞1滴加入主侧管，血浆2滴加入次侧管,实验步骤,五、在主次侧各加入低离子溶液各0.65毫升，混合均匀。,实验步骤,六、在主、次侧管分别加入2滴凝聚胺溶液，混匀后3400r/min离心10秒，弃去上清，观察红细胞的非特异凝集现象。,弃上清,实验步骤,七、最后各加入悬浮液2滴，轻轻转动试管混匀并观察结果。,实验步骤,八、如果在60秒内，主、侧管凝集均散开，说明是由凝聚胺溶液引起的非特异性凝集，配血相合。,实验步骤,九、如果凝集不散开，则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应，配血结果不相合，如有疑问，可进一步镜检确认。,实验步骤,十、同时对受血者ABO和RH血型使用玻片法进行复查。,实验步骤,十一、对受血者ABO和RH血型使用玻片法进行复查。,临床意义,一、保证输血安全二、发现亚型和不规则抗体,方法学局限性,对罕见不规则抗体抗K敏感性低！,临床新进展,流式细胞术基因分型技术卡式微柱凝胶法,卡式微柱凝胶法,卡式微柱凝胶法,戴安娜全自动配血系统,卡式微柱凝胶法可实现自动检测,二 实验原理,血型就是红细胞膜上特异抗原的类型。在ABO血型系统中，红细胞膜上抗原分A和B两种抗原，而血清抗体分抗A和抗B两种抗体。血型鉴定是将受试者的红细胞加入标准A型血清（含有抗B抗体）与标准B型血清（含有抗A抗体）中，观察有无凝集现象，从而测知受试者红细胞膜上有无A或/和B抗原。在ABO血型系统，根据红细胞膜上是否含A、B抗原而分为A、B、AB、O四型。见下表,谢谢！,