Microbacterium(微杆菌属).docx

MiCrObaCteriUm(微杆菌属)将主要的人参皂昔Rb1.转化为20(三)-人参皂昔Rg3摘要：人参皂忒有多种药理活性，是人参中最重要的次级代谢产物。许多研究针对将主要的人参皂昔转化为更具有活性的稀有人参电背Rg3由于制备人参层昔Rg3酶的困难，该化合物主要由酸处理和热处理来生产。从人参根系土壤分离出一个微生物菌株GS514,用于人参Rg3酶的制备。该菌株GS514的16SrRNA基因序列高炉结果确定GS514属于微杆菌屈。它的16SrRNA基因序列分别表现出与M.esteraromaticumM.arabinoga1.actano1.yticum和M.1.acticum98.7%>98.4%和96.1%的致性。GS514有很强的能力将Rb1.或Rd转化为Rg3,酶法生产皂营Rg3是由连续水解人参皂背Rg1.C-20末端和内部的毗喃葡萄糖基而产生的，生物转化途径为：Rb1.-÷Rd÷Rg3引言：人参皂忒(人参皂昔)在人参中是一种重要的次级代谢产物并有多种药理活性(YokOZaWaeta1.,1985;KenarOVaeta1.,1990;Kimuraeta1.z1988;Otaeta1.,1991)0迄今,从人参中分离和确定的的约50种人参皂昔包括丙二Ra1.Ra2Ra3Rb1.Rb2RcRd,Ra1.,Ra2,Ra3,Rb1.,Rb2,Rb3,Re,Rd,Re,Rf,Rg1.,Rg2(R,S),Rg3(R,S),Rg5,Rg6,Rh1.(R,S),Rh2(R,S),Rh3,Rh4,Rk1.zRk2,Rk3,R1.,R2,F2,Rs1.zRs2Rs3(R,S),Rs4,Rs5,Rs6,Rs7,Ro,F1.,F2,F4,compoundK/Y/O,三七皂昔Rg1.,quinquenosideR1.所有的这些人参皂普，Rg3发挥了多种药理活性,如抑制肿瘤(Shinkaieta1.,1996),抗转移，抗癌，保肝，神经保护，免疫刺激，血管舒张作用。此外，Rg3(1.)是人参皂昔Rh2的一种前体物质,也有很强的抗癌作用.但是在正常人参体内人参皂营Rg3的含量极低。因此，人参皂甘RgS的生产是非常重要的，许多研究针对将主要的人参皂昔转化成更具活性的人参皂普Rg3人参皂背Rg3根据糖苜配基的手性碳(C-20)的羟基的空间排列可分为S(Ia)和R(Ib)两种光学异构体，同分异构体表现出不同的物理学特性和生物学特性。20(三)-Rg3(Ia)比20(R)-Rg3具有更高的水溶性和生物利用度。20(三)-Rg3(1.a)但不是20(R)-Rg3能抑制Ca2Kf和Na+途径和在裸露的内皮抑制冠状动脉收缩。主要的人参皂首像Rb1.,Rb2,Rc,Rd通过酸处理或热处理很容易转化成20(三)和20(R)人参皂昔Rg3混合物。但是从外消旋体混合物中分离每一种同分异构体是一项费时和复杂的过程。20(三)-Rg3(Ia)也可以用化学方法合成，但是这个合成步骤是复杂而且所有的产量是很低的。通过在人参皂背一个特殊部位的糖水解的施的转化法是制备人参皂昔Rg3的有价值方法。直到现在，没有一个报道通过使用微生物前制造人参皂苜Rg3.在本研究中，我们使用马栗树皮成-R2A琼脂培养基从人参根部土壤中分离得到一个能产生3-葡萄糖甘前的微生物GS514。研究将人参皂甘Rb1.转化为Rg3的转化活性,并确定它的相关的代谢产物。2结果和讨论2.1 产生人参空昔Rg3微生物的筛选和鉴别在马栗树皮昔R-2A琼脂培养基上共从人参根际土壤中分离得到200种产B葡萄糖普酶的微生物隔离种。在这些隔离种中，GS342,GS514,GS3072在营养液体培养基（肉汤培养基）中能将人参皂昔Rb1.转化为Rg3。菌株GS514在将人参皂昔Rb1.转化为Rg3表现出很强的活性，并且它的rRNA基因序列的高炉结果也在NCBI数据中。GS514菌株属于2.2 选择培养基GS514菌株在营养液体培养基中生长缓慢，且产生Rg3的活性也非常微弱。为了比较各种培养基的影响，GS514菌株在培养在1.B培养基,trypticsoybroth和肉汤培养基中分别培养24小时,在6、12、18和24小时时分别收集样品，在600nm下测定OQ值。1.B培养基，培养基和肉汤培养基在24小时时的OQ值分别是2.346,2.849和0,910,respective1.y。在IB培养基和培养基上的生长率比在肉汤培养基上要significant1.y高，