防控工作会议培训课件.ppt
动物疫病病原学监测技术,主要内容,一、2012年病原学检测工作情况二、病原学检测工作存在问题三、工作目标四、工作要求五、考核要求,一、2012年病原学检测工作情况,1、与2011年相比,病原学检测水平明显提高。大部分省辖市都已经把PCR检测作为日常动物疫病诊断的常规手段。驻马店、济源、焦作、郑州等实验室PCR检测工作量大,结果准确、报告规范。焦作、郑州、开封、平顶山等实验室具备荧光PCR检测条件,特别是焦作市可熟练进行荧光PCR检测,并且已作为动物疫病诊断的常规手段。固始等县实验室具备PCR检测能力和条件,可熟练进行PCR检测,并且已作为动物疫病诊断的常规手段。,一、2012年病原学检测工作情况,2、病原学检测的病种明显增加,检测工作流程和报告规范性明显提高。大部分省辖市实验室开展了5种重大动物疫病及其他疫病PCR病原学检测,为及时发现和排除疫情隐患提供了依据。大部分省辖市实验室通过实验室考核后,检测流程和报告出具规范性明显提高,检测结果准确率明显提高。,二、病原学检测工作存在问题,1、病原学检测病种偏少,样品份数偏少。个别省辖市没有开展PCR病原学检测或者重大动物疫病检测样品不足10份(只有一份检测报告)。个别实验室对检测的重大动物疫病病种只有1或2种,不能满足实验室动物疫病检测工作需要,更不能及时发现疫情隐患。,二、病原学检测工作存在问题,2、病原学检测结果不准确。PCR比对试验结果,部分省辖市如焦作市、驻马店市、开封市、济源市、安阳市 等达到100%的符合率。个别省辖市只有33%的符合率。PCR病原学检测不定期抽查工作中,对送检样品进行复核结果存在不一致。,3、检测报告编制不规范。检验方法依据标准不正确。检验结果明细表填写不规范。原始记录电源图不规范。个别地市存在原始记录中电泳图不客观,重复的电泳图片用在不同的检测报告中。没有严格按照检测报告要求进行逐级审核。,二、病原学检测工作存在问题,三、工作目标,1、省级兽医实验室将荧光PCR和PCR诊断技术作为日常动物疫病诊断的常规手段。2、省辖市级实验室在熟练掌握PCR诊断技术并将其作为日常动物疫病诊断的常规手段基础上,加强PCR病原学检测的规范性和准确性,2-3年内全省省辖市级兽医实验室熟练掌握荧光定量PCR诊断技术,将其作为日常动物疫病诊断的常规手段。3、省直管试点县及达标晋级示范县级实验室要熟练掌握PCR、荧光定量PCR诊断技术,2-3年内将其作为日常动物疫病诊断的常规手段。,1、各级实验室专业技术人员通过培训,熟练掌握PCR和/或荧光PCR检测技术,取得检验合格证。2、各级加强实验室建设和仪器配备,使其具备开展PCR和/或荧光PCR的条件。3、省辖市级实验室要把PCR和荧光PCR作为疫病诊断常规手段开展病原学检测。省直管试点县及达标晋级示范县级把PCR或荧光PCR作为疫病诊断常规手段。4、各级实验室要提高检测结果的准确性、加强检测流程和报告出具的规范性。,四、工作要求,五、考核要求,1、按照积分管理办法要求进行考核,符合要求者进行积分。省辖市及具备荧光PCR检测能力,且能正常开展病原学检测。省直管试点县(市)、各省辖市所辖县级兽医实验室具备PCR检测能力,且能正常开展病原学检测。,不定期对省辖市、省直管试点县(市)5种重大动物疫病PCR及荧光PCR检测情况进行抽查。按要求提交5种重大动物疫病PCR、荧光PCR检测报告副本(每种疫病检测样品不得少于30份)和相关凭证者(留样样品、原始记录、试剂凭证、电流图/扩增曲线等)。省中心对送检的阳性样品(5种重大动物疫病均应覆盖在内,检测阳性样品要全部送检)进行复核。,五、考核要求,按要求提交2种以上动物疫病荧光定量PCR检测报告副本(每种疫病检测样品不得少于30份)和相关凭证者(留样样品、原始记录、试剂凭证、电流图/扩增曲线等)。省中心送检的阳性样品(2种以上动物疫病均应覆盖在内,检测阳性样品要全部送检)进行复核。考核时根据检测结果的真实性、材料(尤其是检测报告)齐全、规范性以及样品的符合率进行评定。,五、考核要求,实现自动化减少人为因素,交叉污染少快速高通量提高了RNA提取效率和纯度,六、全自动提取核酸的优点,七、荧光PCR技术的优点,灵敏度高 比普通PCR最低检出限高100倍。快速 扩增片段小,反应时间短。高通量 一次可以在线检测96份样品,适用于批量检测。避免交叉污染 封闭反应,不需进行电泳检测。直观 在线实时检测,避免人为判断。,八、荧光定量PCR仪,