毕业开题报告PPT.ppt
大果榛子腋芽无菌培养的建立,一、目的意义,二、文献综述,三、研究内容,四、研究方法路线,一、目的意义,榛子是一种重要的经济树种,通过组培对榛子优良品种的快速繁殖具有很大意义。,本研究针对内生菌污染严重的问题,筛选合适的外植体灭菌方法,同时,建立一个榛子快繁的无菌培养体系,为第一步芽诱导和芽增殖阶段的培养提供充足的无菌试材。,二、文献综述,1、植物组培研究概况2、榛子组培研究进展3、存在的问题,1、植物组织培养研究概况2、榛子组培研究进展3、存在问题,1、植物组培研究概况及进展,welcome to use these PowerPoint templates,New Content design,10 years experience,植物组织培养在20世纪30 年代初发展起。50年代中期,细胞分裂素的发现使组培再生植株成为现实。60年代后期,植物组织培养技术在基础理论和实际操作方面不断取得进展,并应用到很多相关领域。90年代后,我国植物组培产业开始发展。,2、榛子组培的研究进展,3月份采集的温室嫁接苗是最好的外植体材料,外植体消毒70-95%C2H5OH和0.5%-5.25%NaClO。,在组培的初代培养中,Nas和Read通过试验得出,WPM和NN69培养基适用于榛子组织培养。,在增值培养中,Bassil、Nas和Reed等对榛子增值各种培养条件做了相关研究。,3、存在的问题,榛子内生菌污染严重,使得榛子的组织培养很难建立一个无菌的繁殖体系。,本研究就是针对此问题,通过试验从而筛选合适的灭菌方法,并建立起无菌培养体系,为芽丛的诱导和增殖富集足够的无菌材料。,三、主要研究内容,1、外植体的表面灭菌,2、预培养,3、芽诱导培养,1、外植体的表面灭菌,野外采集大果榛子当年生枝条,室内剪取侧芽,流水冲洗,剥取外层芽鳞,进行表面灭菌。,灭菌处理拟采用灭菌剂HgCl2、NaClO、H2O2,或配合使用抗生素氨西林钠、制霉菌素、庆大霉素,设计不同的浓度和处理时间梯度进行灭菌,之后用无菌水充分浸洗。,welcome to use these PowerPoint templates,New Content design,10 years experience,将外植体接种于无激素的 DKW 培养基。培养3周后,根据外植体的染菌情况筛选适合的灭菌处理。,3、芽诱导培养,将上一阶段筛选出的无菌外植体再剥去外层芽鳞,接种于芽诱导培养基进行培养,筛选适合的培养基。,培养基设计拟选用DKW、WPM、NG1、NG2、DG、MG、MS几种,所有培养基中均添加BA(5mg/L),IBA(0.01mg/L),蔗糖30g/L,琼脂6g/L,PH调为5.8,培养条件为(23士2)的温度,16 h光周期、28mol/(m2s)光强。,四、研究方法路线,表面灭菌,筛选出最佳灭菌办法,Thank you!,