(细节决定成败)溶出实验的注意事项（使用溶出仪做溶出试验时的注意事项）.docx

随着仿制药一致性评价工作如火如荼的开展，体外溶出曲线的测定与对比也引起了大家的重视，在CFDA发布了药物溶出仪机械验证指导原则后，相信有些研究单位会更换或增加许多先进的溶出设备，以减少旧的溶出设备引起的差异。但在验证合格的溶出仪上，重复检测样品的溶出度时，我们还是会遇到数据结果差异较大现象。而造成这种现象的原因可能就隐藏在实验过程的细节中。下面为大家总结一下，在溶出试验中，应引起大家注意的细节。配制溶出介质溶于溶出介质中的气体可能会干扰溶出结果的重现性。因此，在配制溶出介质前，因对纯化水进行脱气处理，具体方法有：超声、煮沸、加热至41°C后真空脱气等。若使用加热脱气的方法，要等脱气结束后，水温降至室温时，再进行配制，以免加入盐酸或醋酸后，其受热挥发，影响溶出介质的PH值。不同来源的纯化水PH值不同，当使用纯化水为溶出介质时，在使用之前最好确定水的PH值，以免因水的PH值不同，造成溶出数据的变化。安装搅拌桨（篮）在溶出仪出厂、安装时（或每隔6个月），都需进行机械验证。在验证通过后的使用过程中，我们安装搅拌桨（篮）的位置与验证时的安装位置不相同，就会影响搅拌桨（篮）与溶出杯的同轴度，进而影响溶出杯内溶出介质的流动状态,使样品的溶出数据发生变化。另外，有些厂家的溶出仪的搅拌桨（篮）是需要调节安装高度的，但常常我们为方便下次使用，在清洗设备时不拆除搅拌桨（篮），总认为已调好搅拌桨（篮）高度，不需再调节。但是，在使用过程中因搅拌桨（篮）的晃动，会使固定好的搅拌桨（篮）松动。长时间使用后搅拌桨（篮）的高度可能已降低，最终，使得样品的溶出度发生变化或组内溶出的平行性变差。应用转篮法进行试验时，应注意转篮的洁净程度，观察转篮空隙是否发生堵塞，如堵塞，用超声处理或在稀硝酸中煮沸、再经水中煮沸的办法进行清理，否则将影响溶出度数据的准确性。同时，还应注意转篮的形状是否完整，如发生扭曲变形，应及时更换新的转篮。安装溶出杯溶出杯与搅拌桨（篮）一样有不同的编号。使用时也应将溶出杯安装到对应的位置。除了溶出杯的编号要对应外，溶出仪通过了垂直度与同轴度验证后，溶出杯上缘与固定装置相连的位置上都做好标记。如：竖线、箭头。因此，在进行溶出度试验时，应将各篮轴、桨和溶出杯放在原已通过验证的位置上，保持各溶出杯与固定装置的相对位置不变。但是大家在安装溶出仪时往往会忽略这点，使的溶出杯的轴度与搅拌桨的轴度不重合，进而改变溶出杯内溶出介质的流动状态，使溶出数据发生变化。安装滤头现在点出仪一般为全自动或半自动取样，在自动取样溶出仪的取样端，一定要安装滤头，若不在取样针的取样端安装滤头，未溶解的样品颗粒会随取样溶液进入仪器管路，一方面，未溶解的颗粒可能堵塞管路，使仪器取样量不准确；另一方面,因为样品从取样端转移到试管的时间（根据取样量不同）一般会有2-5min的间隔，未溶解的颗粒在管路中转移时也会继续溶解，因此会影响测量的准确度或最终溶出度。试验结束后，使用过的滤头应在溶媒中超声20-3Omin后，再用纯化水超声清洗，不能仅用溶出介质浸泡后，用清水冲洗。因为这种方式不能将滤头清洗干净，会影响下次使用。样品位置在溶出实验投样时，样品的位置应在溶出杯的特定位置。如：桨法时，样品应都在溶出杯底，桨的正下方。若投药后部分片剂帖壁，则会造成溶出实验结果RSD偏大，样品溶出速度增加。因此，在溶出试验时还应注意，每次投样后注意观察，样品在溶出杯中的位置是否合理（或相同）溶出现象溶出试验结果并不只有溶出数据，在考察或对比溶出曲线时，大家只注意溶出数据，而忽略了对溶出现象的观察。其实溶出现象对原研制剂的处方分析和自制制剂的处方工艺调整具有指导意义。如原研制剂的崩解现象有：溶蚀型（可能处方中乳糖的含量较高），膨胀型崩解，有“发烟”现象（可能处方中微晶纤维素的含量较高）；片剂崩解后是否在杯底堆积成沙丘状。又如原研制的崩解后时颗粒，还是粉末。微丸的包衣膜是涨破，还是溶解，微丸在溶解过程中是否膨胀等。水浴高度溶出仪外围水箱中的水也会因受热而挥发，造成水箱中的液面下降。若溶出仪外围水浴高度低于溶出杯里溶出介质的液面高度时，将影响溶出杯中溶出液的温度，导致样品的溶出度发生变化，影响溶出结果。因此，在进行溶出试验时应注意溶出仪外围水浴的高度。周围环境溶出仪的搅拌桨（篮）的晃动，会影响搅拌桨（篮）与溶出杯的同轴度。搅拌桨（篮）的晃动，一方面来自于仪器自身因素引起的晃动，另一方面设备周围的环境，如：离心机、涡旋机、真空泵等设备产生的震动，也会使搅拌桨（篮）产生晃动。因此，在溶出实验进行过程中，尽量减少其他设备对溶出仪的影响。结语除此之外，在溶出试验时还应注意，取样针的高度，搅拌桨的（篮）转速、溶出介质的实际温度等其他因素，在考察对比原研制剂和自制品的溶出曲线时，造成溶出曲线不一致的并不只是处方工艺的差异，应注意实验中的各个细节对溶出结果的影响。使用溶出仪做溶出试验时的注意事项使用溶出仪的时候，溶出的结果准确与否关乎整个试验的有效性，为了确保溶出结果的科学性、准确性，在做溶出试验时一下几点注意事项不能忽视：1、配制溶出介质溶出介质如果有气体会干扰结果，因此，在配制前，需要对水进行脱气处理,注意使用的是加热脱气的办法，那么等到水温降低后在配制溶出介质。2、安装搅拌桨（篮）安装搅拌桨（篮）时需要注意安装的位置要调整好，一旦位置安装的不同，那么会影响搅拌桨（篮）与溶出杯的同轴度，导致溶出杯中的介质流动受到影响，使得溶出数据有偏差。3、安装溶出杯溶出杯与搅拌桨（篮）都是由偏好的，要注意一一对应，溶出杯的上缘部位和安装的位置都需要进行记录。4、安装滤头目前大部分溶出仪使用的是全自动取样或者半自动取样，在取样端，需要安装上滤头，这样可以有效的避免样品颗粒进入仪器管路，堵塞管路或者导致未溶解颗粒在管路中继续溶解，影响溶出度。5、样品位置在进行溶出仪溶出试验时，样品的位置应该要处于特定位置才行，因此在每次投药之后，应该要观察一下样品在溶出杯中的位置是不是和之前是一样的。虽然溶出仪进行溶出试验操作的步骤不是很复杂，但是操作中的细节不注意，容易导致结果出现误差，所以上面介绍的几点注意事项，一定要留意。溶出仪操作时的注意事项有哪些由于溶出仪具有控制精度高，操作方便，噪音低等特点，因此被广泛的应用。那么在操作时，有哪些注意事项？一，在你每次使用完溶出仪之后，要把它的各种附件给清洗干净，并且擦干,比如移液管，桨杆，溶出杯，取样器，试管，量筒等试验用仪器，都要在清洗后放在相应位置，千万不要随意乱放，以免丢失，与此同时，还要用提前准备好的防尘罩盖在上面，让它时刻保持清洁。二，当溶出仪的机头与电源连接后，要把加热键给开启，当你按下电源后，水浴箱的水就会处于循环流动的状态。三，要经常观察水浴箱的水位是否高于溶出杯内液面的高度，如果水位太低的话，会对实验结果造成影响，而且还会对加热器和水泵造成伤害。在此也要提醒各位，千万不要在没水的前提下，与电源连接。四，对于溶出仪的外壳清洁，千万不要使用有机溶剂，否则对它造成伤害。五，当实验结果之后，要马上关闭电源，并且在关机以后，还要对数据进行测定。提醒各位，在对溶出度仪进行操作的时候，要提前把样品编号，称重，记录,并且把溶出介质按照要求进行配制，调制出正常的PH值，均匀的摇晃，如果在摇晃之后有泡沫出现的话，就要放置一个晚上，待泡沫消失后再次使用。溶出试验仪的校准方法：校准主要有机械方法和化学方法两种。机械方法分为外观检查、转杆垂直度和摆动幅度校准、转速误差校准、控温误差校准和计时器误差校准。1、外观检查主要采用目测的方法，大致对被检溶出仪的外观情况作出评判。包括溶出仪是零部件是否齐全;溶出杯、转杆等是否有破损，温度时间等显示部分是否有缺字；2、转杆垂直度校准，选用直角尺或倾角仪观察其垂直度；3、摆动幅度校准，主要用百分表对转杆和转篮的摆动量进行测量；4、转速误差的校准可以用非接触式的转速表对每根转杆进行测量，此方法测量准确度较高。由于溶出仪使用时转速要求并不快，也可以用秒表计时，间接计算转速；5、计时误差校准即设定好计时状态，开启仪器，同时用秒表计时，在规定的时间要求内计算计时误差；6、化学方法相对简洁，即使用溶出度标准片，按照规定实验操作步骤，测出标准片的溶出度值，查看实验误差是否在允许范围内。溶出试验仪注意事项：1、水浴箱中无水时，严禁启动温控状态，否则将损坏加热器；2、应保持水浴箱中水位略高于溶出杯内液面高度，否则将影响实验结果；3、温控状态启动后，若水浴箱中水未循环，应立即检查管路与接嘴是否畅通，水泵内是否有空气，予以排除；4、勿使用有机溶剂清洗仪器外壳。一、药物溶出试验仪日常维护1、用纯化水将篮、篮转轴、浆、溶出杯、取样针等冲洗干净；2、清洁仪器表面；3、如果水箱移动后，需要对于转杆同心进行检查。1）溶出试验仪的周维护：清洗水槽，更换水槽内纯化水。2）溶出试验仪的月维护：检查每个溶出杯，杯体应光滑，无凹陷或凸起，无划痕、裂痕、残渣等缺陷；检查每个转篮，篮体应无锈蚀，无网眼堵塞或网线伸出，无网眼或篮体变形等现象，每个篮转轴是否能够夹紧转篮；检查每个篮（桨）轴，篮（桨）轴上无锈蚀现象，桨面涂层光滑、无脱落。二、药物溶出试验仪校正周期：每半年校正一次，若有特殊情况，校证周期不得超过12个月。您真的清楚和明白智能药物溶出仪的使用步骤吗？您有严格按照正规的操作流程来使用智能药物溶出仪吗？看了下文的流程介绍，相信您会学到很多东西哦！1、将溶出杯放入仪器的六个孔内，用同心环盖调整位置，然后用定位片固定»2、根据质量标准提供的方法选择转篮或转浆，用定位杆各调整转篮或转浆与溶出杯底的间距，然后旋紧旋钮固定转篮或转浆；3、给溶出杯中加入规定量的溶剂，再给水浴箱注水到水线位置；4、插上电源插座，开启电源开关，通过控制面板的各键预置好规定的转速、溶出时间、抽样间隔时间及水温控制参数；5、当杯内溶剂温度经水浴达到37±0.5°C恒温时，将供试品6片（粒）分别投入六个转篮或直接投入各转桨杯中，将转篮或转桨降入容器内，智能溶出仪选择“运行”键立即启动并开始计时，盖上有机玻璃盖，外孔插入取样针头；6、智能药物溶出仪至规定溶出时间仪器鸣叫时，在规定取样点分别吸取溶液适量，经0.8Um微孔滤膜过滤，注入试管内；7、完成取样后，关闭电源开关，拔出电源插头，升离转篮或转浆，除出篮体，倾去杯内溶液，一切用具清洗干净，倒置晾干备用。溶出仪机械验证的测量工具溶出仪的机械验证，应将待测部件置于正常溶出试验位置，由相关技术人员使用适宜的测量工具测量各项机械参数。可采用单一测量工具（如倾角仪、同轴度测量工具、摆度表、深度表、转速计和温度计等），也可采用模块化集成测量工具。不论哪种测量工具，均应在检定合格周期内使用，并能够进行量值溯源。溶出仪机械验证的周期溶出仪在安装、移动或维修后都应对其进行机械验证。除另有规定外，通常每六个月对溶出仪进行一次机械验证。如果在试验过程中发现异常现象，应立即对溶出仪进行机械验证。若溶出仪不常使用，可适当延长验证周期，一般不超过2个月。溶出仪机械验证前的检查1、溶出杯：杯体光滑，无凹陷或凸起，无划痕、裂痕、残渣等缺陷。2、转篮：篮体无锈蚀，无网眼堵塞或网线伸出，无网眼或篮体变形等现象。3、篮（桨）轴：篮（桨）轴上无锈蚀现象，桨面涂层光滑、无脱落。有很多客户不知道如何采购药物溶出度试验仪，在这里简单介绍一下药物溶出度试验仪的一些选购要点：主要考虑机械性能，比如转速、温度、同轴度等10项（机械验证指导原则）,而自动取样部分尚无相应的评价指标，或者,一些无用指标。药物溶出度试验仪在选购时需要注意以下几点：、溶出机械验证合格，校正片可能不合格，即使水杨酸片校准也合格，实际溶出结果差异也很大，有必要对水杨酸片测定3点溶出校准。2、补液也要考虑流路，考虑补液体积和取液体积差，最后看看最后溶出杯中体积与初始体积是否有偏差。3、过滤取样是否有初滤，滤头形式、材质、孔径，均需验证。4、取样取样能力，取样次数，取样体积，取样耗时，最小取样间隔等。5、自动取样整体评估对于自动取样单次评估采用上述指标，的整体评估可以采用黑箱法评价，同一台溶出，自动、手动同时取样，多个时间点取样，考察取样的稀释偏差、取样时间偏差。