报春苣苔组培快繁技术规程.docx

报春苣苔组培快繁技术规程1范围本文件确立了报春苣苔组培快繁技术的程序，界定了报春苣苔组培快繁技术所涉及的术语和定义、规定了组织培养方法、组培苗移栽、质量要求以及包装、标签和运输等阶段的操作指示。本文件适用于XX区内报春苣苔属的组培快繁。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T8321（所有部分）农药合理使用准则3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3 .1报春苣苔属Primu1.ina苦苣苔科植物，为多年生草本。3.2穴盘苗p1.ugp1.ant移栽到穴盘中培育的组培苗。4组织培养方法3.3 培养基各培养基参见附录A。3.4 培养条件培养温度为2528,光照强度为300O1.X5000Ix,光照时间为12hd°3.5 培养时间初代培养30d40d,增殖培养30d,生根培养30d40do3.6 灭菌4 .4.1外植体无病虫害、生长健壮植株的幼嫩或成熟叶片。5 .4.2灭菌前处理洗衣粉或洗洁精水溶液浸泡10min30min,流水冲洗10in30mio6 .4.3灭菌方法在超净工作台上，先用棉球蘸取75%乙醇溶液拭擦叶片两面，无菌水冲洗35次；再将叶片在75%乙醇溶液中浸泡并震荡10s20s,无菌水冲洗35次；最后用0.1%氯化汞溶液浸泡并震荡8minIOmin或浸泡并震荡6min两次，每次均用无菌水冲洗35次。将叶片切成1cm3cm×1cm3cmo4.5初代培养将叶块的叶面朝上平放在初代培养基上进行培养，初代培养基配方参见附录A中的A.1。1 .6增殖培养将从初代培养中获得的组培芽切下，以单芽形式接入增殖培养基中。2 .7生根培养将具有2对以上叶片的组培芽以单株形式接入生根培养基中。3 .8炼苗4 .8.1炼苗标准健壮，根数7条以上，根长3cm,具2对以上叶片。5 .8.2环境条件温度15°C30°C,光照强度50001.x100001.x。4.8.3方法先带瓶盖放置7d10d,再除去瓶盖，加入少量清水,继续放置5d7do5组培苗移栽6 .1基质腐殖土和粗河沙暗体积比为2:1混合均匀或泥炭和珍珠岩按体积比为2:1混合均匀。0.3%05%高镒酸钾溶液淋透。6.2 容器50孔育苗穴盘。6.3 移栽取出组培苗，洗去根部培养基，在50%多菌灵可湿性粉剂1OOO倍溶液中浸泡IOnIin15min,置阴凉处晾IOnIin。每穴种植1株，浇透定根水。6.4 移栽后管理6.4.1 环境条件温度1530,空气相对湿度70%80%,用遮光率为70%的遮阳网遮阴。6.4.2 病虫害防治每30d用50%多菌灵可湿性粉剂10001500倍液喷雾预防病害。病虫害的化学防治方法应符合GB/T8321（所有部分）规定。6质量要求6.1 组培苗健壮，叶片68枚，根数10条以上，无微生物污染。6.2 穴盘苗健壮，叶片8枚以上，根系充满穴盘孔，能轻易拔出而基质不散，无病虫害危害。6.3 、标签和运输按NY/T2306的规定执行。附录A（资料性）培养基配方A.1初代培养基配方MS培养基+1.00mg1.4.50mg/1.6-BA+0.01mg1.-0.25mg/1.NAA+30.00g/1.白砂糖+600g/1.琼脂，PH值为5.86.0。A2增殖培养基配方MS培养基+2.00mg/1.6-BA+0.05mg/1.NAA+30.00g/1.白砂糖+6.00g/1.琼脂或MS培养基十。00mg/1.3.00mg/1.ZT+0.05mg/1.O.10mg/1.NAA+30.OOg/1.白砂糖+6.OOg/1.琼脂或MS培养基+1.OOmg/1.3OOmg/1.ZT+O.25mg/1.IBA+30.00g/1.白砂糖+6.00g/1.琼脂，PH值为5.86.0。A.3生根培养基配方1/2MS培养基+010mg1.-0.50mg/1.IBA+O.05g1.-O.50g1.活性炭+30.00g/1.白砂糖+6.00g/1.琼脂或MS培养基+0.50mg/1.IBA+O.10g/1.活性炭+30.00g/1.白砂糖+6.00g/1.琼脂,PH值为5.86.Oo