尖叶石竹组培苗生产技术规程.docx

尖叶石竹组培苗生产技术规程1范围本标准规定尖叶石竹QDianthUSSPiCUIifaIiUSSChg组培苗生产的环境与设备消毒、培养基配制、外植体制备、初代培养、继代培养、壮苗培养、生根培养、培养条件、移栽及生产档案。本标准适用于尖叶石竹的组培苗生产。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6001-1985育苗技术规程1.Y/T1882-2010林木组织培养育苗技术规程NY/T2306-2013花卉种苗组培快繁技术规程3环境与设备消毒3.1 接种室消毒接种室消毒按NY/T2306-2013中8.6进行。3.2 培养室消毒培养室消毒按NY/T2306-2013中8.7进行。3.3 超净工作台消毒超净工作台消毒按NY/T2306-2013中8.5、8.6进行。3.4 接种器具消毒接种器具按NY/T2306-2013中8.4进行。4培养基配制4.1 母液配制培养基母液配制按NY/T2306-2013中7.3执行。4.2 培养基配制4.3 2.1培养基配方培养基配制成分如下：a) 初代培养基：MS+蔗糖30g/L+X脂粉8g/L,pH值5.8；b) 继代增殖培养基：MS+0.2mgL6-BA÷4mgLKT÷O.02mgLIAA+蔗糖30gL+X脂粉8gL,PH值5.8；c) 生根培养基：1/2MS+l.Omg/LIBA+O.01mgLNAA+蔗糖30gL+X脂粉8gL,PH值5.8。4. 2.2培养基配制方法培养基配制方法按NY/T2306-2013中7.4执行。4.3 培养基灭菌及保存培养基灭菌及保存方法按LY/T1882-2010中4.2进行。5外植体制备4.4 外植体选择选取当年生的嫩茎作为外植体，宜晴天进行。4.5 外植体消毒外植体的处理：选取生长良好的茎段，自来水冲洗3h,75%酒精中浸泡消毒5s,2%次氯酸钠消毒3min,再用蒸储水冲洗45次，用滤纸吸干水分。6初代培养将消毒后的外植体切成ICm2cm的茎段，每段至少带有1个2个叶芽，将切好的外植体接种到诱导培养基中，注明接种物名称和日期，培养21d28d,记录诱导情况。7继代培养分化的不定芽接入继代增殖培养基中，约8个/瓶，培养28d35d,每个茎段萌发出5个8个不定芽，分割新长出的不定芽，可按需求重复继代。8壮苗培养切取继代增殖培养中长LOCm以上的不定芽，转接至壮苗培养基中，约8个/瓶，培养14d21d.9生根培养壮苗培养基中组培苗长到2.Ocm以XX度时，将小苗转入生根培养基中，约10株/瓶，培养7d10d,当小苗基部长出健壮的不定根3条以上，大部分苗根长为0.5cm2.0cm时，即可进行移栽。10培养条件无菌培养室白天的温度控制在23±2°C,夜间不低于15,相对空气湿度控制在60%80%,光照强度为2000LUX3000Lux,光照时间为12hd14hd,黑暗时间为10hd12hd.11移栽11.1 移栽基质的制备基质选择草炭土和蛭石混合，体积比约为1:1,栽植前用0.5%的高铢酸钾溶液浇透消毒24h。11.2 驯化移栽将生根培养瓶转移到过渡培养间，半开瓶口ld2d后，敞开瓶口炼苗2d3d后可移栽。11.3 组培苗移栽将幼苗取出，用清水洗净附着在根上的培养基，用清水喷湿，可进行移栽，移栽后压实小苗周围的基质，浇透水，覆70%遮阳网。11.4 移栽苗管理保证温室内幼苗水分供需平衡，育苗水分管理按GB/T6001中执行。移栽5d7d后，去掉遮阳网，浇1/2MS营养液1次，温度22C28°C,相对空气湿度60%80%,温室环境应保持清洁。12生产档案建立尖叶石竹组织苗生产技术档案，包括繁殖培养条件、培养基配制、外植体接种、增殖数量、种苗驯化移栽及管理等。