α-羟丁酸脱氢酶（α-HBDH）测定标准操作规程.docx

。-羟丁酸脱氢酶（Q-HBDH）测定标准操作规程1.检验原理：（酶学速率法）羟丁酸脱氢酶催化酮丁酸还原为羟基丁酸，在此过程中，还原型辅酶I（NADH）被氧化为氧化型辅酶I（NAD+）,通过在340nm处监测吸光度下降的速度，即可计算出样本中a-羟丁酸脱氢酶的活力。A-酮丁酸+NADH+H+3建J邀脱和a-羟基丁酸+NAD+2.试剂主要组成成分组成成分浓度Rl三羟甲基氨基甲烷缓冲液（pH6.1）1OOmmo1/L酮丁酸3.5mmolLR2三羟甲基氨基甲烷缓冲液（pH9.3）1OOmmo1/L还原型辅酶I（NADH）Immo1/L3.样本要求：静脉采血。新鲜无溶血血清。28保48小时，-20C保存7天，样本不可反复冻融！样本中抗坏血酸含量W0.3g/L、胆红素含量0.4gL血红蛋白含量W5.Og/L、乳糜含量W5.Og/L对检测结果基本无影响。4.检验方法；仪器法（详见DF-603Db600标准操作规程）5.参考范围：样本参考范围（U/L）血清72-1826.检验结果的解释：6. 1样本含量超出线性范围时，建议用0.9%（W/V）的氯化钠溶液稀释样本.建议最大稀释不超过10倍。7. 2.单位换算：ukatL=UL×16.67×1037.检验方法的局限性7.1 结果的准确性依赖于仪器的校正和测定温度、时间的控制。7. 2若试剂浑浊，或以水空白在340nm处吸光度小于0.800时不能使用。8. 3检验结果仅供参考，不作为临床诊断的唯一依据。8.试剂性能指标8.1 试剂外观：无色透明液体，无悬浮物及沉淀。8. 2装量：不低于标识值。8. 3试剂空白8.3. 1试剂空白吸光度：在37、34Onm处，光径ICm时，空白吸光度A21.0008. 3.2试剂空白吸光度变化率:在370C>340nm处，光径Icm时,AULmin0.002.8 .4分析灵敏度：在340nm处，光径ICm时，测量1U/L的-羟丁酸脱氢酶时，吸光度变化4AlVminL26XIO-9 .5线性区间:试剂的线性区间为25-750UL,在此线性区间内：a)线性相关系数r应不小于0.9900；b)25TOOUL区间内，线性绝对偏差不超过土10ULo10L750UL区间内，线性相对偏差不超过±10%。8. 6精密度8. 6.1重复性:CV5%9. 6.2批间差:R10%8. 7准确度：8. 7.1使用比对试验，测定结果的相关系数r0.9759. 7.272UL范围内，每个浓度点的绝对偏差不超过±7.2U/L；>72UL范围内，每个浓度点的相对偏差不超过±10%。10. 床意义：-羟丁酸脱氢酶(-HBDH)与乳酸脱氢酶(LDH),肌酸激酶(CK)>天门冬氨酸氨基转移酶(AST)一起构成了心肌酶谱，对于诊断心肌梗死有重要意义。血清a-羟丁酸脱氢酶增高主要见于：心肌梗死、活动性风湿性心肌炎、急性病毒性心肌炎、溶血性贫血等。尽管肝脏和心脏疾病均可引起aTBDH活性增高，但aTBDH活性在肝脏疾病时变化不是很大，而在心脏疾病时有明显增高，故aTBDH可用于肝病和心肌梗死的鉴别诊断。活动性风湿性心肌炎、急性病毒性心肌炎、溶血性贫血等因可引起血清中LDHl和LDH2活性增高，故a-HBDH活性亦增高。