低密度脂蛋白胆固醇测定标准操作规程.docx

低密度脂蛋白胆固醇测定标准操作规程1.检验原理：采用能特异性水解样品中高密度脂蛋白(HDD,极低密度脂蛋白(VLDL)及乳糜微粒(CM)的表面活性剂，释放其胆固醵与酶试剂反应，产生的乩。2在无偶联剂时被消耗而不显色。当加入试剂R2时，低密度脂蛋白(LDL)被水解，与酶试剂反应而测定低密度脂蛋白胆固醇的含量。第一步：1.DLY表面活卷剂LDLY不溶性复合物胆固醇酯+也。游离胆固醇+脂肪酸HDL-C,VLDL-C,CM和游离胆固醇+。？胆固静氧化酶胆笛-4-烯-3-酮+也。2H2O2过氧化里陶H2O+O2第二步1.DL-C不溶性复合物衣吗朝冽LDLY可溶性复合物1.DL-C可溶性复合物+O2胆固醇氧化酶胆笛-4-烯-3-酮+/°2”2。2+4-氨基安替比林+TOOS”化取红色醍+H2OTOOS:N-乙基-间甲基苯胺-2-羟丙基磺酸钠2 .试剂主要组成成分产品组成成分浓度Rl1,4-哌嗪二乙磺酸倍半钠(PIPES缓冲液)50mmolL4-氨基安替比林(4-)5mmolL胆固醇氧化酶800U/L胆固醇酯酶400U/L过氧化物酶3kULTritonX-405(表面活性剂)0.1%(VV)R21,4-哌嗪二乙磺酸倍半钠(PIPES缓冲液)50mmolLN-乙基-间甲基苯胺-2-羟丙基磺酸钠(TOOS)2mmolL抗坏血酸氧化酶100U/LTritonX-1003%(VV)CAL低密度脂蛋白胆固醇(2.0-4.0)mmol/L3.样本要求；静脉采血后立即分离。新鲜无溶血血清。在2225°C可保存8小时，28保48小时，-20°C可保存7天。样本应避免反复冻融。4.检验方法；仪器法(详见DF-603DI-600标准操作规程)5参考范围：样本参考范围mmol/L血清1.50-3.106 .检验结果的解释：6.1 样本含量超出线性范围时，建议用0.9%(WV)的氯化钠溶液稀释样本。建议最大稀释倍数不超过10倍。6. 2,单位换算：ukatL=UL×16.67×W37.检验方法的局限性7.1 结果的准确性依赖于仪器的校正和测定温度、时间的控制。7. 2若试剂浑浊，或以水空白在600nm处吸光度大于0.05时不能使用。7. 3检验结果仅供参考，不作为临床诊断唯一依据。8. 产品性能指标8.1 空白吸光度：在60Onm波长，光径ICm时，空白吸光度AW0.05。8.2分析灵敏度：在600nm处，光径Icm时，测定InimO1/L的样本，吸光度差值4A>0.038.3线性区间：试剂的线性区间为0.3070mmolL,a)线性相关系数r应不小于0.995；b线性相对偏差不超过±10机8.4精密度8.4.1重复性：重复测试(2.50±0.50)mmol/L和(5.00±1.00)mmol/L的样本，所得结果的变异系数(CV)应不大于3.0%8.4.2批间差：测试(2.50±0.50)mmol/L的样本，所得结果的批问相对极差(R)应不大于10%.8.5准确度：相对偏差应不大于±10机8. 6校准品8.6. 1外观：冻干粉，复溶后为淡黄色液体。8 .6.2准确度：校准生化分析仪和试剂后，测定校准品，相对偏差应不大于10%o8.6.3均一性：瓶间均一性：CV5%8.7干扰试验干扰物浓度(gL)是否有干扰抗坏血酸0.3无明显干扰脂血3.0无明显干扰血红蛋白3.5无明显干扰无明显干扰：添加干扰物后的测定值与初始测定值的相对偏差处于±10%以内。9 .临床意义：低密度脂蛋白升高是高胆固醇血症最常见原因，与冠心病和动脉粥样硬化的发生呈正相关。