天门冬氨酸氨基转移酶测定标准操作规程.docx

天门冬氨酸氨基转移酶测定标准操作规程1.检验原理：（IFCC法）L-天冬氨酸和-酮戊二酸在AST的作用下生成草酰乙酸和L-谷氨酸。草酰乙酸在苹果酸脱氢酶作用下生成L-革果酸，同时还原型辅酶【（NADH）被氧化为氧化型辅酶I（NAZr）,在340nm处测得吸光度呈下降趋势与AST活性成正比。根据NADH吸光度下降程度计算AST的活力单位。试剂内不含磷酸弼哆醛。1.-天冬氨酸+-酮戊二酸谷氨酸+草酰乙酸草酰乙酸+NADH+/T迎L-苹果酸+¼O'2.试剂主要组成成分组成成分浓度Rl3羟甲基氨基甲烷缓冲液（pH6.1）1OOmmo1/LL-天冬氨酸250mmolL乳酸脱氢酶>700UL苹果酸脱氢酶>700UL烟酰胺腺喋吟二核甘酸0.18mmolLR23羟甲基氨基甲烷缓冲液（pH9.7）1OOmmo1/L-酮戊二酸12mmolL3.样本要求：新鲜无溶血血清。在2225保存8小时，28°C保48小时,-20°C保存7天，样本不可反复冻融！4.检验方法；仪器法（详见DF-603/DI-600标准操作规程）5.参考范围：样本参考范围（U/L）血清8-406.检验结果的解释：6.1 样本含量超出线性范围时，建议用0.9%（WV）的氯化钠溶液稀释样本。6. 2.单位换算：ukatL=UL*16.67×1037.检验方法的局限性7.1 结果的准确性依赖于仪器的校正和测定温度、时间的控制。7. 2若试剂浑浊，或以水空白在34Onm处吸光度小于LoOO时不能使用。7. 3检验结果仅供参考，不作为临床诊断唯一依据。8.试剂性能指标8.1 试剂外观：无色透明液体，无悬浮物及沉淀。8.2装量：不低于标识值。8. 3试剂空白8.3. 1试剂空白吸光度：在34Onm处，光径ICm时，空白吸光度A2L0008 .3.2试剂空白吸光度变化率:在34Onm处，光径ICm时，Amin0.0049 .4线性区间:试剂的线性区间为10-500UL,在此线性区间内:a）线性相关系数r应不小于0.9900；b）10-50UL区间内，线性绝对偏差不超过±5UL;（50-500）U/L区间内，线性相对偏差不超过±10机8. 5准确度：相对偏差应不大于±15%。8. 6分析灵敏度：在340nm处，光径Icm时，测量W/L的天门冬氨酸氨基转移酶时，吸光度变化4AULmin22Xl（48. 7精密度8.7. 1批内精密度：CV5%8. 7.2批间精密度：R10%9. 临床意义：天门冬氨酸氨基转移酶（AST）亦称谷草转氨酶（GOT）属于转氨酶类，它能够通过氨基转移催化氨基与酮酸之间的相互转换。在人体的很多组织中均能发现AST。但发现此酶在心肌中的活性最大，在脑、肝、胃肌、脂肪组织、骨骼肌以及肾等组织中亦有显著活性。AST存在于细胞的胞浆和线粒体中，在中度组织损伤时，AST占优势的形式是来自细胞质，少量来自线粒体。严重的组织损伤时线粒体酶释放较多。转氨酶增高指示心肌梗死、肝脏疾病、肌营养障碍和组织损伤。