高密度脂蛋白胆固醇测定标准操作规程.docx

高密度脂蛋白胆固醇测定标准操作规程1.检验原理：(清除法)采用能特异性水解样品中低密度脂蛋白(LDL),极低密度脂蛋白(VLDL)及乳糜微粒(CM)的表面活性剂，释放其胆固醇与酶试剂反应，产生的凡。2在无偶联剂时被消耗而不显色。当加入试剂R2时，高密度脂蛋白(HDL)被水解，与酶试剂反应而测定高密度脂蛋白胆固醇的含量。第,步.HDL-CHDL-C不溶性复合物胆固静酯酶胆固静酯+%。->游离胆固醇+脂肪酸1.DL-C,VLDL-C,CM和游离胆固醇+02幽幽适胆笛-4-烯-3酮+H2O2过氧化氢酶、H2O2>H2O+O2第二步：表面活性剂、一r2一有人MHDL-C不溶性复合物>HDL-C可溶性复合物HDL-C可溶性复合物+ 02胆固醇氧化酶、，、E>胆备-4-烯-3酮+/O?过氧业氢酶“2。2+4-氨基安替比林+TOOS：'一红色醍+&。TOOS:N-乙基-间甲基苯胺-2-羟丙基磺酸钠1.试剂主要组成成分组成成分浓度Rl1,4-哌嗪二乙磺酸倍半钠(PIPES缓冲液)(pH7.0)50mmolLN-乙基-间甲基苯胺-2-羟丙基磺酸钠(TOOS)2mmolL抗坏血酸氧化酶100U/LTween(表面活性剂)0.1%(V/V)R21,4-哌嗪二乙磺酸倍半钠(PIPES缓冲液)(pH7.0)50mmolL4-氨基安替比林(4-AA)5mmolL胆固醇氧化酶800U/L胆固醇酯酶400U/L过氧化物酶3kULCAL高密度脂蛋白胆固醇Ommol/L3.样本要求：静脉采血后立即分离血清。新鲜无溶血血清。在2225°C保存8小时，28保48小时，-20°C可保存1年。样本不可反复冻融！4.检验方法；仪器法（详见DF-603/DI-600标准操作规程）5参考范围：样本参考范围（mmol/L）血清男性1.07-1.73女性1.26-1.906.检验结果的解释：6.1 样本含量超出线性范围时，建议用0.9%（WV）的氯化钠溶液稀释样本。建议最大稀释不超过10倍6. 2.单位换算：mgdL=mmolL×38.77.检验方法的局限性7.1 结果的准确性依赖于仪器的校正和测定温度、时间的控制。7. 2若试剂浑浊，或以水空白在60Orlm处吸光度20.05时不能使用。7. 3检验结果仅供参考，不作为临床诊断唯一依据。8.产品性能指标8.1 空白吸光度：在60Onm处，光径ICm时，空白吸光度A0.05。8. 2分析灵敏度：在60Onm处，光径ICln时，测定ImmOl/L的样本，吸光度值大于0.048. 3线性区间：试剂盒的线性区间应覆盖0.20-2.5gL,在此线性区间内：a）线性相关系数r应不小于0.995；b）线性相对偏差不超过±10%。8. 4精密度8. 4.1重复性：重复测试（0.8±0.20）mmol/L和（1.50±0.50）mmol/L的样本，所得结果的变异系数（CV）应不大于4.0%8. 4.2批间差：测试（L50±050）mmol/L的样本,所得结果的批间相对极差（R）10%8. 5准确度：相对偏差应不大于±10%。8. 6校准品8.6. 1外观：冻干粉，复溶后为淡黄色液体。8.6.2准确度：标准生化分析仪和试剂后，测定校准品，相对偏差应不大于±10%o8.6.3均一性：瓶间均一性：CV5%8.7干扰试验干扰物浓度(gL)是否有干扰抗坏血酸0.3无明显干扰脂血3.0无明显干扰胆红素0.4无明显干扰血红蛋白3.5无明显干扰无明显干扰：添加干扰物后的测定值与初始测定值的相对偏差处于±10%以内。9.临床意义：高密度脂蛋白（HDL）负责将外周组织中的胆固醇逆转运入肝脏。然后，肝脏将胆固醇转化为胆汁酸，通过胆道排入肠道。血清中HDLY的浓度与动脉硬化疾病的危险性呈负相关，所以监测血清中的HDLY浓度有重要的临床意义。血清中HDL-C浓度升高有助于防止冠心病，而HDL-C浓度降低，尤其伴有甘油三酯浓度升高时，会增加心血管疾病的危险。