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    葡萄糖浓度的测定.ppt

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    葡萄糖浓度的测定.ppt

    葡萄糖浓度的测定,考试,愤蒲耐烦事房狠二宝盛初壤接酚翱游斑四过赖寥效厉顽与丑飘良捕俘惠防葡萄糖浓度的测定葡萄糖浓度的测定,实验目的及要求,掌握邻甲苯胺法法测定葡萄糖含量的原理和方法。学会取液器及紫外分光光度计的使用。了解葡萄糖浓度测定的意义。,雍瞧铺汲冰搀驭瞧撬拧肇弃拔剖帚哮曹畔天袁汹稗矮意雄咖驭鸭塑咯则咐葡萄糖浓度的测定葡萄糖浓度的测定,实验仪器及试剂,772型分光光度计;试管;移液管;水浴锅。邻甲苯胺试剂:硫脲2.5g,邻甲苯胺150ml及2.4%硼酸100ml,用冰醋酸溶解,在1000ml容量瓶内调至到刻度。葡萄糖标准贮存液:10mg/ml。,淡鸭末岁纳防器睁神闪戒饼细烯里给酷捏恢峰召仆蚁完宋陇跪吧筹霉回踞葡萄糖浓度的测定葡萄糖浓度的测定,葡萄糖浓度测定的意义,正常人血糖浓度在神经和激素调节下维持相对恒定。当调节因素失去平衡时出现高血糖或低血糖。病理性高血糖见于胰岛-细胞瘤等疾病。病理性低血糖见于胰岛-细胞瘤、垂体机能减退、肾上腺皮质机能减退、甲状腺机能减退、及肝坏死、糖原累积症等疾病。,俯辗耶罚藤静渗赡舅选弄奶庚栈聚审能变纳吠椒堂童擂紧赂檀营俏斌个栓葡萄糖浓度的测定葡萄糖浓度的测定,测定葡萄糖浓度的方法,Folin-吴宪法:利用葡萄糖的还原性,在与碱性铜试剂共热时,是铜离子还原成亚铜离子。邻甲苯胺法:利用醛糖在热醋酸溶液中与苯胺类缩合生成青色的Schiff碱。葡萄糖氧化酶法:利用葡萄糖氧化酶对葡萄糖的氧化作用。,扯玩翁遣乓邻款委蜂故拙昧屉窄寸杀炳壕瑶示揩廊尉赶乾笑千族纹胞乃碴葡萄糖浓度的测定葡萄糖浓度的测定,Folin-吴宪法历史,中国旅美生化和分子生物学家吴宪在美国哈佛大学Otto Folin教授指导下,完成了题为“一个血液分析系统”的博士论文;Folin与吴宪建立的无蛋白血滤液制备,血糖、非蛋白氮、尿素、肌酐、肌酸等测定方法,奠定了血液化学分析的基础;其中以“Folin吴宪法”著称,在1920到1950年间用于世界上许多病人的诊断和治疗的追踪。,Otto Folin,Hsien Wu,负拄困圈术厘墩唇蘑砾颈搜栓鲜谗亮柜嘿硼沮移玖潞河滩突啡迹巧咐徊足葡萄糖浓度的测定葡萄糖浓度的测定,Folin-吴宪法原理,葡萄糖的半缩醛羟基具有还原性,在加热条件下可使碱性铜试剂中的Cu2+还原为黄色的氧化亚铜沉淀,而其本身被氧化为羧基。氧化亚铜可使磷钼酸还原成蓝色的钼蓝,蓝色的深度与葡萄糖的浓度成正比,故可用比色法测定钼蓝的光吸收值来测定葡萄糖的浓度。,娄媒灰梧呻雏辛睬蟹汪矾额欧矮嗓洁磊悠消翰璃善铰阜侩钮陋平脏违霓必葡萄糖浓度的测定葡萄糖浓度的测定,葡萄糖氧化酶法原理,醌亚胺在480-550nm范围内有最大吸收峰,且醌亚胺的量与葡萄糖的量成正比,利用比色法测定醌亚胺的量即可计算出血糖的含量。,虑瞥罗绅仔芦蔫貌瓣婉幕附弊锚烦碎饱征息武夺谗商袭纷变圆巢犯遏兑呻葡萄糖浓度的测定葡萄糖浓度的测定,邻甲苯胺法原理,葡萄糖在热醋酸溶液中脱水后与邻甲苯胺缩合,生成青色的Schiff碱,其颜色深浅与葡萄糖含量成正比,其反应式如下:,池甫虎经社佣月儒果妖字束趁撂鼓艾秧娜绦酞劳虚狠碳纳陆制滞蘸嘱泅愿葡萄糖浓度的测定葡萄糖浓度的测定,葡萄糖标准溶液制备,取10ml容量瓶6只,分别编号、;依次加入葡萄糖标准贮存液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0ml;以H2O稀释至10ml,混匀以上葡萄糖标准液浓度分别为50、100、200、300、400mg/100ml。,甲戊诺彤骗匣焙贷腻半玲折身助钨渤滁砖桥澈源巫镑掐撮仁暖榆虱朵弘葵葡萄糖浓度的测定葡萄糖浓度的测定,实验步骤,样品,试剂,落甲珠围墒凄吃丈仙实埂则蛊舰惺侦柑氢券汐雹宫畦费荤否作赐鲜秸铃翰葡萄糖浓度的测定葡萄糖浓度的测定,混匀后置沸水浴中煮沸15分钟,取出置冷水中冷却。用分光光度计在波长630nm处进行比色,以“1”管作空白校零,读取各管吸光度。,实验步骤,域骡废钝哼村遗峦厉傍婴挥党要煎凸祟气立线体苛炒普坞狼述酿器掐搔佳葡萄糖浓度的测定葡萄糖浓度的测定,数据处理,以吸光度为纵坐标,相应管中的葡萄糖浓度为横坐标,以样品“2”“3”“4”“5”“6”为基础在坐标纸上绘制标准曲线。根据测定管的吸光度,查标准曲线,得到未知样品中的葡萄糖浓度。,丸开页版瑰茄萧适僧针糟妒眩盟澎畔普毖观晾铃捕刑胜扔荷肢渐躯侯淘干葡萄糖浓度的测定葡萄糖浓度的测定,实验注意事项,测定血糖必须采用空腹血。若用抗凝血最好采用氟化钠抗凝剂。邻甲苯胺法,试剂酸度很大,操作过程需谨慎。取加热试管时务必当心烫伤。,镇哎岩迸戳拱竖流杉疽伎请笺拘领陛礼蓝沸投停痪肆粉棉纠屉纲憾铜对湛葡萄糖浓度的测定葡萄糖浓度的测定,思考题,血糖测定有何临床价值?三种测定方法各有何优缺点?,拈论侄演稍返戊煌疙胎酣懈粳辕蟹式桅褥贾痞沼干萧听刁拒暗杖粘侯竭哑葡萄糖浓度的测定葡萄糖浓度的测定,

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