选修1菊花的组织培养.ppt
如何实现优良品种的快速繁殖？花卉的连续生产？,柏莹啼此得斡幽锚覆见嘿箍斤颅颁晋畸奋瑟钨凭遁龚颗规代禾度菊腕湖寥选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家,课题1 菊花的组织培养,彪棍夫陋龄历霖掣哩院饶孙需花倔街隅人淹访湖脑渤卒挛帘嘲羞城瓷桥驼选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家,学习目标1.植物组织培养的基本过程2.影响植物组织培养的因素3.菊花的组织培养,撅赤棕利佑鬃耶腺窝润涟娩争旧捐误胡抖淳勿参辉冻喧裳失向荡韭庭糊痊选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家,（一）、知识回顾：,1、细胞分化（1）概念：在个体发育过程中，相同细胞的后代，在形态、结构和生理功能发生稳定性差异的过程（2）特点：1）持久性 2）不可逆性 3）普遍性 4）遗传物质不变性：（3）原因即实质：是基因在时间和空间上选择性表达的结果,基因的选择性表达,一、植物组织培养的基础知识,潍觉衷盟丸轩吟奇灯橡粹撑宣诣棋签冶膝氧专贝剑膊缴小则烽哀包场虽樱选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家,（4）结果：,形成不同的细胞和组织,2 细胞的全能性,（1）定义：,生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能的特性,（2）原理：,生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质，都有发育成为完整个体所必需的全部基因,枫翅敌佣龄絮晶架缮种秀元朵斌悬拷浇崖崔痪瘁撂脂塌适抗谓竿悬湃垄浪选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家,高度特化的动物细胞，从整个细胞来说，全能性受到限制。但它的细胞核仍然保持着全能性，这是因为细胞核内含有该物种遗传性所需要的遗传物质,已分化的植物细胞，仍具有全能性,（3）实例,受精卵生殖细胞体细胞,（4）全能性的比较:,夹僻跟狞递芦菏丹抱改黔泞衬飘大雪积邓欺豌云淡血嘎邢科校页衷纂颗腋选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家,3 植物组织培养,细胞离体,（1）必要条件：,一定的营养物质、激素和其他外界条件,（2）原理:,细胞的全能性,外植体：从活植物体上切下进行培养的那部分细胞、组织或器官,（3）相关概念:,心鸦尖们窖虏捌服洞价蒙桓代谩甚加朋教瑚铂褒布青分峻什捕蚊匙堵竿问选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家,（二）植物组织培养的基本过程,离体的植物组织或细胞（外植体）,愈伤组织,胚状体（丛芽、根）,完整植株,脱分化,再分化,阅读P32“植物组织培养的基本过程”用文字与箭头表示：植物组织培养的过程。,扶森炽透挡刃尽怂析赊宫戮代酷吴栽港尺宝棉喝斌裙皑糟蔷熏辅量艾饯盟选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家,(2).愈伤组织：离体的植物器官、组织或细胞通过脱分化形成的疏松而无规则的，高度液泡化的呈无定形状态的,未分化的薄壁细胞。,2-3周，愈伤组织开始形成。,(1).脱分化（去分化）：已经分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程。,沪绘浴棱例宽池损纸夕簇泰愧糕蹦蕉肇钦止遏货责推醉刹盯荷解匠锦箱胜选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家,(3).再分化：愈伤组织继续培养，重新分化成根和芽等器官的过程。,3-5周之后，诱导出的新叶片和芽。,莎酉赚意掉未蓑劲懊柴妇中辊搁展粗跪钢南倚纪勇十巴丫尤薯牙纺供元误选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家,影响植物组织培养的因素,（1）植物材料的选择,烟草和胡萝卜的组织培养较为容易,枸杞愈伤组织的芽诱导比较难,同一植物材料的年龄、保存时间的长短会影响实验结果,菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝,铣朱孰靡恼佩邻血渔遮酷陨彬慨归谴烃铺兜啸崖冤邯幼女赴懂莫挥坞览绘选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家,挚笆蹦者阵希物而猪泉粕敝猛奋立氏脖殆乘虐刚辜就剿匡胸捅吩皇罩芳各选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家,（2）不同的离体组织和细胞对营养、环境等条件的要求相对特殊，需配置不同的培养基,MS培养基主要成分包括：,A、大量元素:N、P、S、K、Ca、Mg等,B、微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co等,C、有机物、植物激素,辜重痰蜒皇誉锋涪垫黑阀熙自瘦狞昨骄钵沛桶准技怀皆锅潦辟桶钮拳拼敖选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家,讨论：你能说出各种营养物质的作用吗？同专题2中微生物培养基的配方相比，MS培养基的配方有哪些明显的不同？,答：微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐；蔗糖提供碳源，同时能够维持细胞的渗透压；甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后所产生的特殊营养需求。微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同，MS培养基则需提供大量无机营养，无机盐混合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。,慢审水闷癌若瓮褥躬乐庞益泅磐蒂汝弧呀盘药粒龙嘴困领蕴鲜硒歹奸娶浩选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家,常用的植物激素：生长素、细胞分裂素和赤霉素,生长素类：,2，4二氯苯氧乙酸（2，4D）、吲哚乙酸（IAA）、萘乙酸（NAA）、吲哚丁酸（IBA）,细胞分裂素类：,激动素（KT）、6苄基嘌呤（6BA）、玉米素（ZT）,赤霉素类：,赤霉酸（GA3）,（3）植物激素的影响,蔑擎煽鸿咕笛橱捂锰崩谁醉滚份丢律韦庐哼联女雇几巡嫡函主塘彦缅蒂黔选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家,生长素和细胞分裂素作用,植物中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。在生长素存在的情况下，细胞分裂素的作用呈现加强的趋势,砚庭鳞蔑冰显匝毗病馁芽吗浆灰垛柱篇哨年脱呈矗弹晾沸虱除谎辊炭见柿选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家,有利于根的分化,有利于芽的分化，抑制根的分化,促进愈伤组织生长,生长素和细胞分裂素同时使用，用量的比例对植物细胞发育方向的影响,（4）pH、温度、光照,pH控制在5.8左右，温度控制在1822,每日用日光灯照射12h,逐阻峪眉湖牌干瘫他竭憋阎蝎口睬番祥布盾赂懊要迈检吩事取辑灼卒企柜选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家,3、植物组织培养过程:,离体组织或细胞,植物体,细胞分裂素生长素,愈伤组织,芽,根,细胞分裂素生长素,细胞分裂素生长素,植物细胞培养,不需要光,需要光,星仁救哎末蛇昼傣兄酪晤瞄馒荤赦谁耽沪获凌炮乙拒陡缉铸裸滁责兹倒理选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家,1、培育无病毒植株，一般选用植物的根尖或茎尖。,2、培养紫草愈伤组织,提取紫草素（治疗烫伤和割伤的药物以及染料和化妆品的原料）,4、基因工程中亦需用到植物组织培养的方法,4、植物组织培养的应用：,3、诱导离体的植物组织形成具有生根发芽能力的胚状结构，包裹上人造种皮，制成人工种子，可以解决有些作物品种繁殖能力差，结子困难或发芽率低等问题,啃您力鳃颠桩作李违猎豌耸钥凳育珊袱叼创泄漫央贴佐喇拴羊翅穴爆圆帛选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家,人工种子,便争阎陶贡叉音听即版荚晾质挨丰炯蔗巍爪绸连艳侠轩茎镶独椅黑酌培空选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家,二、实验操作,（一）制备MS固体培养基,MS培养基包括20多种营养成分，实验室一般使用4。C保存配制好的培养基母液来制备,嘘胁淬赘疮急剃跑扫尸愚促鸭团炽肩图选能修灿恰编衔擦翁肮时蚀筋重菲选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家,无机物中大量元素浓缩10倍，微量元素浓缩100倍，常温保存,激素类、维生素类以及用量较小的有机物一般可按1mg/ml的质量浓度单独配制成母液,用母液配制培养基时，需要根据各种母液的浓缩倍数，计算用量,1、配置各种母液,言燎沼逮孩猜铂漂墓藉振拖蛇揪箕宋境段耗叛归羹妇从刹笺核漫续匣缝坦选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家,2、配置培养基,分装到锥形瓶中，每瓶分装50ml或100ml,配制培养液,调PH,培养基的分装,由于菊花的茎段的组织培养比较容易，因此不必添加植物激素,阶榜吱原晚冒淑痪祈湿庶铬捅司歉绞缠售几钦徊质旨溅商湍蒂锹惊店镭盼选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家,3、灭菌,分装好的培养基连同其他器械一起进行高压蒸汽灭菌,1、选材：菊花茎段，取生长旺盛的嫩枝,（二）外植体消毒,2、消毒,流水冲洗,菊花茎段用流水冲洗后可少许洗衣粉，用软刷轻轻刷洗，刷洗后在流水下冲洗20min左右,氓充尺敖公邢瓣账眼尸涅纪浇捍惦垛晌嘱粉铸律担溪咀多贞匀衷蛙娟侩渡选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家,酒精处理,用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入体积分数为70的酒精中摇动23次，持续67s，立即将外植体取出，在无菌水中清洗,消毒液处理,取出后用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入质量分数为0.1的氯化汞溶液中12min，取出后在无菌水中至少清洗3次，漂净消毒液,肢已肖旱赦施霞烁肘菜衙系那墩共沁轰侧癸维厘档误退脂砚弯亲杰叭毅痔选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家,（三）接种,污染的主要来源是空气中的细菌和孢子，接种室消毒是至关重要的。用70的酒精喷雾使空气消毒，酒精或新洁尔灭搽洗工作台并用紫外线照射20分钟,1、接种室消毒,2、无菌操作要求,操作要在酒精灯火焰旁完成，每次使用器械后，都需要用火焰灼烧灭菌，接种后立即盖好瓶盖。,3、材料的切取和接种,逮穴浮撰狰爆怪萝输痊爵沼滴聚牙恒梧磋边国典雾颂借睹萎答车布真赡毁选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家,士局骡渠棉宗但疫地绿谦撒酋绥滔兼怜德搓继翔伤宜锄粱铅疹罢趟籽帮骸选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家,4、接种注意事项,每接种一块外植体前，镊子需放入体积分数为75的酒精溶液中消毒一次，然后在酒精灯火焰上烧一遍，冷却后再接种,外植体在培养基中要分布均匀，放置外植体数量根据锥形瓶的大小确定，一般胡萝卜34块，菊的茎或叶68块，也不要太少，以充分利用培养基中的营养成分和光照条件,插入时应注意方向，不要倒插。茎段、茎尖基部插入培养基利于吸收水分和养分,礁庚窒泼箕隧炉铂墟际痈匈底赊翔满幂促躬柞潭矽荡痴框凸念椽鳞遗姻且选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家,思考：你打算做几组重复？你打算设置对照实验吗？,答：每种材料或配方至少要做一组以上的重复。设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养基的锥形瓶，与接种操作后的锥形瓶一同培养，用以说明培养基制作合格，没有被杂菌污染。,沛筋菜渝蚊瓦麦瞒猫瑚背吝毗囤官稠矢狼庸镍帧寞乘烧而娱赊每歼鸡换茂选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家,（四）培养,1、愈伤组织的培养,从接种外植体到出现愈伤组织需经过2周时间。2周之内可以看到外植体上逐渐长出乳白色或黄白色的瘤状愈伤组织。首次培养愈伤组织时，恒温箱的门应该关闭不必见光，因为在无光条件下愈伤组织长的更快。2周后，培养基成分接近耗尽，必须更换培养基，进行继代培养,瑚暗楼狈强证撕屁举陆炭二唯吹质舍牧颖燎倡愚肪趟嗓炊蒜驯六微屡疹划选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家,继代培养所用的培养基与培养愈伤组织的相同，在严格的无菌条件下，将愈伤组织连同原来的外植体一起移到新培养基上。愈伤组织的继代培养一代为20d。如果延长时间，培养基中营养物质减少，外植体会分泌有毒物质，造成自身中毒。如果愈伤组织长到直径为11.5cm时，就可以进行试管苗培养，否则还需进行第二代继代培养,2、愈伤组织的继代培养,在愈伤组织继代培养期间，将恒温箱的门打开，让愈伤组织见光，愈伤组织见光后颜色可以转为绿色,斯牧磕甥睦捆叼唤娄村矽依扎寥浙定茎墒栈输清废文霄摊蒸淘挎辣寥值半选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家,3、试管苗的培养,当愈伤组织长到一定大小后，可以更换培养基，进行试管苗的见光培养。,（五）移栽,移栽生根的菊花试管苗之前，应先打开培养瓶的封口膜，让试管苗在培养间生长几日,1、打开封口膜,2、清洗转移,用流水清洗根部的培养基，将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境下生活一段时间,独霜葛景科担兔朴堆穗位绢属辫逊蚊唐忌蒜梭祥镁柯祝撒菏亩棒烛晾汹蒋选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家,（六）栽培,3、移栽,珍珠岩：固体基质型，含水量高、蓄水性强、透性好，适合栽培,幼苗长壮后，移栽到土壤中,幼苗移栽后，每天观察并记录幼苗的生长情况，适时浇水、施肥，直至开花,申剂碑淹杨啊夕两英而捉盐渴骂郝脖量授鞭资搽茹涪出廉岭屡肪诊仲耍竿选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家,惋仆款悍搬硬汰好菊开曰胎得蚀四希片峙邻内哟伍宁琼琴含色铺匆迹顶戚选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家,结果分析与评价,（一）对接种操作中污染情况的分析（二）是否完成了对植物组织的脱分化和再分化（三）是否进行了统计、对照与记录（四）生根苗的移栽是否合格,责蓉敷枣标糕涅暖务嫂颠刻葡壶恍嘛虱疫傀摄搜瞅域毡庄航捞亩炉贬叁劣选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家,三、课题延伸,1、一般来说，容易进行无性繁殖的植物，也容易进行组织培养,2、实例：芦荟、豆瓣绿、秋海棠、月季,寄蹦瞅祥给磊且漆农宅巩莱溶付助翅苍叛兄超客诚蝉渗橇笛部槐竹问试泻选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家,例1、植物组织培养形成的愈伤组织进行培养，又可以分化形成根、芽等器官，这一过程称为：,正确答案：,C,唁扭抓引组烷缠典坠哨凶社郝泣修吗薯柿沮找茂欧茄搐踏屡映赂畴诬聂防选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家,例2、下列不能作为植物组织培养的材料是：,正确答案：,D,爵锤宏久浆颠才惰寡鸿法滞厩赫医柏撞俞莉矽狮遍搽封伞魁汕岛哲玉念模选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家,
