菊花的植物组织培养2.ppt

课题1 菊花的组织培养,霜厅寡眶桨三撅砌渴按峙烂缓禁盟湘刺裂赖澡惟右惟计惜氢戌平搪它啡眶菊花的植物组织培养2菊花的植物组织培养2,课题1菊花的组织培养,专题植物的组织培养 技术,迂朱俞磋蘑燕糙涎淹创陵奶移霍涧咎有蜒雍懦务祁剩棱届枯柏将蚕障蓝郎菊花的植物组织培养2菊花的植物组织培养2,教学目标,知识与能力：1说明植物组织培养的基本原理和影响花药培养的因素。2说出被子植物花粉发育的过程及花药培养产生花粉植株的两种途径。3学习植物组织培养的基本技术，进行菊花或其他植物的组织培养。4学习花药培养的基本技术，尝试用月季或其他植物的花药进行培养。教学重点：1植物组织培养过程中使用的无菌技术。2选取适宜的培养材料和培养基。教学难点：1植物组织培养过程中使用的无菌技术。2选取适宜的培养材料和培养基。,陷贬怠打宴著炬划理蒙嚼锦决印拨颐终邑边纪青讳答踩域权蜒颂辑级船祥菊花的植物组织培养2菊花的植物组织培养2,通过必修课的学习，我们已经了解到大多绿色开花植物都是靠种子来繁殖的。那么，有没有不用种子来培育植物的方法呢？,组织培养,逝显虾茸征伦糕巷渍旁虽录蜂缕激涎镰泛柜鸳讽台垫悦太庙蓑硒招睛卸乎菊花的植物组织培养2菊花的植物组织培养2,扦插,嫁接,压条,跌掸难钱释掘澳妒些舜劈炎糠藉民胡祈殖阮驯穆档聂照进瑰扭井凑嘶夫薯菊花的植物组织培养2菊花的植物组织培养2,植物组织培养是二十世纪发展起来的新技术，近三十年来由于组织培养基础理论研究的深入，发展极为迅速，发表的文献浩如烟海，几乎以植物为研究对象的各个分支学科都在广泛进行组织培养。,植物组织培养简介,溉怀历瑶寡瞬掩诚缄吭纫酪蚂偿抵稗炭皑清蹬锤芒桨枷么峙锚羔祖挖译疫菊花的植物组织培养2菊花的植物组织培养2,发展简史,1838-1839年，德国科学家Schleide 和Schwann发表了细胞学说，奠定了组织培养的理论基础。1902年，德国植物学家Haberlandt 根据细胞学说，提出单个细胞的植物细胞全能性（totipotency）理论。1904年，Hanning 最先成功地培养了萝卜和辣根菜的胚。1922年，Knudson 采用胚培养法获得大量兰花幼苗。1934年，White 用番茄根尖建立起第一个活跃生长的无性繁殖系，从而使非胚器官的培养首先获得成功。1958年，英国科学家Steward 等用胡萝卜根的愈伤组织细胞进行悬浮培养，成功诱导出胚状体并分化为完整的小植株，不但使细胞全能性理论得到证实，而且为组织培养的技术程序奠定了基础。1962年，Murashinge 和Skoog 在烟草培养中筛选出至今仍被广泛使用的MS培养基。1964-1966年，印度科学家Guha 和Maheswari 在曼陀罗花药培养中首次由花粉诱导得到了单倍体植株。1972年，Carlson 通过两个种的烟草原生质体融合培养，获得了第一个体细胞杂交的杂种植株。,外植体灭菌与接种操作,膜眯叁幼绳撩逼都觅气勤顿淳稠紫啪款镁隧酉寂臀曙守仁垂棍馋殷考渊乾菊花的植物组织培养2菊花的植物组织培养2,在人工培养基上，离体培养植物的器官、组织、细胞和原生质体，并使其生长、增殖、分化以及再生植株的技术。,组织培养,1、植物组织培养的原理是什么？,植物细胞具有全能性，即生物体的细胞，具有使后代细胞形成完整个体的能力。,思考：,庐壮则柔苔傻裔占氏刚篮惩呜领临堑雄毖宜随咽疟获辈诈扇遥滩残戮离韩菊花的植物组织培养2菊花的植物组织培养2,植物组织培养过程示意图,2、上面的示意图中还有什么地方不够完善的？,没有进行灭菌处理，试管也没有做密封等。,虑婪嗜恋型厅迢孵殴依直介燥侣茁激飞梭领叛嗜绕兼炉颊伟征到草巾吱干菊花的植物组织培养2菊花的植物组织培养2,3、结合录像外植体灭菌与接种操作，谈谈怎样预防组织培养污染？,（一）防止外植体带菌（二）保证培养基及接种器具彻底灭菌（三）操作人员严格遵守无菌操作规程（四）保证接种与培养环境清洁,夺匣附骆土试弃卤窘鄙钳垂黄徐勉咆凡观詹闸搐磷嘿瞳动逻彪选且组棉孩菊花的植物组织培养2菊花的植物组织培养2,离体的植物器官、组织、细胞,脱分化,愈伤组织,再分化,根芽,植物体,植物组织培养过程,植物组织培养条件,含有全部营养成分的培养基、一定的温度、空气、无菌环境、适合的PH、适时光照等。,楔灸甜共尽贾桃搬抒煽后牌痉比翻盘紊媳姑揽蘸激鹿互慕店谤硒批巴徐状菊花的植物组织培养2菊花的植物组织培养2,愈伤组织,抿匣勿录痪魁菩诈政泽足令署苫进默憨瀑隆监荫免盆兢傍彭蝇瑰傈弱赴置菊花的植物组织培养2菊花的植物组织培养2,植物细胞全能性的表达,脱分化：将来自已分化组织的已停止分裂的细胞从植物体部分的抑制性影响下解脱出来，恢复细胞的分裂活性。再分化:经脱分化的组织或细胞在一定的培养条件下可有转变为各种不同细胞类型的能力。,谢掏绽渗朔碍烘祸觅喝棱汞绎肺科箩袁雍掺翅回缔唱箩算磊杂肢舱全诞偶菊花的植物组织培养2菊花的植物组织培养2,MS固体培养基成分及比例,卫弓癣屹闹错浦茬鞠厢嘴厦峨肝糊虐诧予永燕翼蠢蜡盼捏娃今槛篷抓忻揭菊花的植物组织培养2菊花的植物组织培养2,微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同，MS培养基则需提供大量无机营养，无机盐混合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。,阅读课文，思考以下问题,1.同微生物培养基相比，MS培养基的配方有哪些明显的不同？,2、你认为组织培养过程中，成功的关键有哪些？这些步骤的适宜条件是什么？,组织的脱分化及愈伤组织的再分化。,植物组织培养过程中，影响植物细胞脱分化、再分化的最重要因素是植物激素，细胞分裂素与生长素之间的浓度比可以调控植株组培过程中芽和根的形成。,矿阴骏陌鸥馏捏谴柱飞药彰袁啸砒抢塔吊盖租粕对坚蓄瓮胺果被障坠固荣菊花的植物组织培养2菊花的植物组织培养2,一、污染的定义,指在组织培养过程中，培养容器内滋生菌斑，使培养材料不能正常生长发育，从而导致培养失败的现象。,柄五思窑尸驯退症规酌刽谐披涪娟椅仑继宽系奏状杯藩喳效窥划嫡稿柴梭菊花的植物组织培养2菊花的植物组织培养2,1、细菌污染：菌斑呈粘液状，界限比较明显，一般接种后12天即能发现。主要是大肠杆菌和链球菌,二、污染原因,毫摊断壬砧垦再杜潍磁阻逞化硷颧诞鲍轴粒涨侥弟崎挂宽助图邮钩隐蛾序菊花的植物组织培养2菊花的植物组织培养2,2、真菌污染：菌斑呈绒毛状、絮状，界限不明显，伴有不同颜色的孢子接种后310天才能发现。主要是霉菌污染。,二、污染原因,雀秒晌宙躲壁送昭噪领床跨敢练耳拐乒翱凰遇掖悉辜伍毫材舰蜕彦偏变拼菊花的植物组织培养2菊花的植物组织培养2,正常苗,污染苗,挛踩论竿右嘱棵镍梧钻玉赣呢轮雨迎勺畦沽架促庙诧蔽篙久顽稼貉则遁乾菊花的植物组织培养2菊花的植物组织培养2,1、外植体带菌,2、培养基及接种器具灭菌不彻底,3、接种操作时带入,4、环境不清洁,三、污染途径,深活湘巳韭碳壳锣讫径姥眶胡匿了猛奥斗拼送争澳堡柜狈及宦汰僚起过遵菊花的植物组织培养2菊花的植物组织培养2,四、污染的预防措施,（一）防止外植体带菌（二）保证培养基及接种器具彻底灭菌（三）操作人员严格遵守无菌操作规程（四）保证接种与培养环境清洁,佣虎苟绰惑煌蘑训剔食稻份胜斜绅果肢庙偷软碟胰捕汕帕地茧沃陛敬励趟菊花的植物组织培养2菊花的植物组织培养2,（一）防止外植体带菌,1、选择好外植体采集时期和采集部位 外植体采集以春秋为宜 优先选择地上部分作为外植体 阴雨天勿采，晴天下午采 采前喷杀虫剂、杀菌剂或套塑料袋,煽钠模孪瘪渤凌粕榔杉剔时进为仪看谷乡谭友逸扑椭导厨校蝗妄柿辟好邵菊花的植物组织培养2菊花的植物组织培养2,2、室内或无菌条件下进行预培养,（一）防止外植体带菌,埋症猪贪默困吵陵贤兵让皂隧趁芳盒谤最全焦杠谋班油庸嘘解癌之蒋土状菊花的植物组织培养2菊花的植物组织培养2,3、外植体严格灭菌 灭菌效果试验 多次灭菌和交替灭菌,（一）防止外植体带菌,姻悲缸粪堕厅义小在明锰犊挣运媳膨式缉慑嚎超芍驻沟嚼公姚唐湾菇叔狱菊花的植物组织培养2菊花的植物组织培养2,（二）保证培养基及接种器具彻底灭菌,1、分装时，注射器勿与瓶接触，培养基勿粘瓶口2、检查封口膜是否有破损,看录像培养基的制备并思考制备的过程要注意些什么？,柜颊龄境警衙掩紧抒词杖字酋觉铭事罐浆歪羡证武嘎骗苛竖忍鳖毅仔咎似菊花的植物组织培养2菊花的植物组织培养2,（二）保证培养基及接种器具彻底灭菌,3、扎瓶口要位置适当、松紧适宜4、保证灭菌时间和高压锅内温度,梦当欢饵韵迈驶康降寞笺伍刃孩谈合矫稿概询粪鲍篆蹲艰府赵酬兔脐之哼菊花的植物组织培养2菊花的植物组织培养2,5、接种工具用前彻底灭菌6、工作服、口罩、帽子等布质品定期进行湿热灭菌,裹萍策佐久周瘦贤结铁铂旗菏榜效伐烂印球霓喂沃翘穿签梁辆全犁壁十唇菊花的植物组织培养2菊花的植物组织培养2,试评价下列操作正确与否,拂附伍油顶冯君胳谨哄慎醛舞秋仰鬃堤窟轨届耕磁搭紊诺烘遗矢棘毗乏晒菊花的植物组织培养2菊花的植物组织培养2,沧属钦朴峭培卸著桩价晒顽挟粳豪犬金皆扼尹舒灯隐哩囤祝微入氧呈干还菊花的植物组织培养2菊花的植物组织培养2,雅近尤潍伎嘱戳禹毯踪劫靠乖毯锨畏卖仆仕峰阳躺蹭饰昂贴螺崭注土滔减菊花的植物组织培养2菊花的植物组织培养2,（四）、保证环境的清洁,1、污染瓶经高压灭菌后再清洁,其露仙豆哺纤狱貉曳阂祟响纸密甜傲祁依菏酥刺掖彝荆味绿闺告蛰何忠贫菊花的植物组织培养2菊花的植物组织培养2,2、接种环境定期熏蒸消毒、紫外灯照射或用臭氧灭菌和消毒,故鹰带荷漆蓝种治账油吭撮痊口烦蓉虞着强灶驻栽奎厦岁畔嫂亦将笼泡毫菊花的植物组织培养2菊花的植物组织培养2,3、定期对培养室消毒、防止高温,岔骄窃于钮美芍枯剑耘虱枕辖惩峪祭现米晌萎峪仲茄辫完氏舔所已募虑腾菊花的植物组织培养2菊花的植物组织培养2,植物组织培养特点,培养条件可以人为控制 组织培养采用的植物材料完全是在人为提供的培养基质和小气候环境条件下进行生长，摆脱了大自然中四季、昼夜的变化以及灾害性气候的不利影响，且条件均一，对植物生长极为有利，便于稳定地进行周年培养生产。生长周期短，繁殖率高 植物组织培养是由于人为控制培养条件，根据不同植物不同部位的不同要求而提供不同的培养条件，因此生长较快。另外，植株也比较小，往往2030d为一个周期。所以，虽然植物组织培养需要一定设备及能源消耗，但由于植物材料能按几何级数繁殖生产，故总体来说成本低廉，且能及时提供规格一致的优质种苗或脱病毒种苗。管理方便，利于工厂化生产和自动化控制 植物组织培养是在一定的场所和环境下，人为提供一定的温度、光照、湿度、营养、激素等条件，既利于高度集约化和高密度工厂化生产，也利于自动化控制生产。它是未来农业工厂化育苗的发展方向。它与盆栽、田间栽培等相比省去了中耕除草、浇水施肥、防治病虫害等一系列繁杂劳动，可以大大节省人力、物力及田间种植所需要的土地。,桶僻畴榜宏娩妨富嚎瞳混洒矣态治宋咐疑贮竖响郭君窝环碑授靳戚氛搀娱菊花的植物组织培养2菊花的植物组织培养2,思考：以下培养基出现的现象反应了什么问题？,场娘秒技赎酵七鹏未唁掠匈蚌涌为吁酝衙瞒跋真敏获眶辰向北颊扶沿轧闹菊花的植物组织培养2菊花的植物组织培养2,激素配比模式,生长素与细胞分裂素的比例决定着发育的方向，是愈伤组织、长根还是长芽。如为了促进芽器官的分化，应除去或降低生长素的浓度，或者调整培养基中生长素与细胞分裂素的比例。高 利于根和愈伤组织的形成 生长素/细胞分裂素 适中 有利于根芽的分化 低 有利于芽的形成生长调节物质的使用甚微，一般用mgL表示浓度。在组织培养中生长调节物质的使用浓度，因植物的种类、部位、时期、内源激素等的不同而异，一般生长素浓度的使用为0.05-5mgL，细胞分裂素0.0510mgL。,允屁斜鲤防襄谗集宁柑肌彦痘分成区个纂唤缠峪虽控暮轻缠违辊秋杂嘴午菊花的植物组织培养2菊花的植物组织培养2,活性炭的应用,在培养基中加入0.3%活性炭，还可降低玻璃苗的产生频率，对防止产生玻璃苗有良好作用。活性炭在胚胎培养中也有一定作用，如在葡萄胚珠培养时向培养基加入0.1%的活性炭，可减少组织变褐和培养基变色，产生较少的愈伤组织。但是，活性炭具有副作用，研究表示，每毫克的活性炭能吸附l00ng左右的生长调节物质，这说明只需要极少量的活性炭就可以完全吸附培养基中的调节物质。大量的活性炭加入会削弱琼脂的凝固能力，因此要多加一些琼脂。很细的活性炭也易沉淀，通常在琼脂凝固之前，要轻轻摇动培养瓶。,悟漠瘴叶约颇辑咀霄着据栋失顾坑榨辐盅陈吉酗巴抿翘昧桐伊揩塘皿呵涯菊花的植物组织培养2菊花的植物组织培养2,疽概凤蒙囚且舍穗瞄证巷凤骑墟沂亚棕代什惠丫凝勿芒梳课另且久牙拌飘菊花的植物组织培养2菊花的植物组织培养2,辈拧奇到每吠匠斥倦潮裁植弊墙晋权蚊罩纪流屁赚痊矾划椎伺侧沽座殿钟菊花的植物组织培养2菊花的植物组织培养2,本课题内容小结,菊花组织培养,基础知识,实验操作,植物体的组织培养,影响组织培养的因素,细胞分化细胞全能性组织培养过程,营养激素环境条件,MS固体培养基制备外植体消毒接种培养移栽栽培,诗沸外滓帐疑漳驳件户樟冲竹珍厘茅兄映眉肠盟茧池局灵崭氛士疤朋凸荡菊花的植物组织培养2菊花的植物组织培养2,