复原乳的检测及含量测定.docx

复原乳检测及含量测定实验原理在弱碱性环境下，乳酸脱氢酶催化乳酸形成丙酮酸，同时使氧化型辅酶I(NAD÷)受氢形成还原型辅酶I(NADH)0还原型辅酶I在340nm波长处吸光度的增加与乳酸脱氢酶的活性呈正比。用乳酸脱氢酶测定试剂盒分别测定已知的不同含量复原乳中还原型辅酶I吸光度的变化率，做标准曲线，再测定需检测的样品中还原型辅酶I的吸光度的变化率，即可反映出复原乳中乳酸脱氢酶的不同活性，从而鉴别液态奶中复原乳的含量。实验材料纯的液态奶、复原乳、乳酸脱氢酶测定试剂盒、紫外可见分光光度计实验步骤1、用液态奶和复原乳配制五组标准液，其中复原乳的含量分别为0、10%、20%、40%、80%o2、用乳酸脱氢酶测定试剂盒分别测定标准液中的吸光率的变化率。具体的测定方法：分别取标准奶样40L和乳酸脱氢酶试剂l(Rl)1600L充分混合在37保温5min,再加入乳酸脱氢酶试剂2(R2)400L充分混合37保温5min,以蒸储水取代乳样作为参照在340nm处开始测定7min内吸光度的变化值，每分钟记录一次。分别计算各标准液的吸光度变化率(AA/min)。3、用乳酸脱氢酶测定试剂盒测定待测样品的吸光率的变化率。具体操作同2实验结果用标准液所测得的值做标准曲线，并得到线性关系，将样品所测得值带入其中，求的样品中所含的复原乳的含量。