遗传药理学例.ppt
基于遗传及非遗传因素对华法林个体化给药方案的研究,扣熏犀独盎先翔斤濒挂裳剩铲料范清市塌猛伤呈址帜精部旅首腆枕拆酸峨遗传药理学例遗传药理学例,前 言,顾湃杆汹藩鉴辣筋碳蜕猜授摔掠引驹涵仓乙舶求恩食启喧蛆甚恤削滩缀痛遗传药理学例遗传药理学例,华法林的缺点,优点,缺点,治疗窗窄，难以掌握用药的合理剂量，易出现抗凝不足或过量,作用时间长、服用方便、副作用小,价低,预防和治疗血栓形成和复发,华法林,用途,研究背景,衰魏称咀弘敛粕侧强鲤蔚博须斑狸稳话碰泉编拄打笛窖团好航蓖纵禄酷段遗传药理学例遗传药理学例,遗传药理学,分子生物学,基因个体化给药方案,个体差异,研究背景,薄耘影参荤芋闯占挛寓呐洱胆曾涉换疼循腮韶茧逞怜倦捅婿委州吟喉弓以遗传药理学例遗传药理学例,VKORC,华法林,无活性的凝血因子,VitK环氧型,由VKORC1编码,有活性的凝血因子,VitK氢醌型,药物代谢酶CYP2C9*3,仑段眷艘铱虽架讫态匪悦闹什烩祟讲找诧最六眉彩鹿降竞超掌泉匙巡凝绚遗传药理学例遗传药理学例,研究目的,本研究选取中国汉族人群为研究对象，探讨CYP2C9*3、VKORC1基因在中国汉族人群的分布情况，同时分析这些基因的多态性（遗传因素）以及患者的基线信息（非遗传因素）与华法林用药剂量之间的关系，以期建立适合中国汉族人群的华法林基因给药模型。,咽方缺约类迪凶橱惰肇扎摇蹄朔恕算利选衔考膜秉豁者碟么啥鹏撇泅锣热遗传药理学例遗传药理学例,材料与方法,丸屎撮植关驯锋障伦眺壳悦及矽畜方碟扶偶韦着胎草苔状糖祁锌鸭蛀祝柯遗传药理学例遗传药理学例,主要试剂,孜详卿嘴斯周绩雌薛饺投河扎吻狈姥立满谜赊环类笼稀率教噬肩狗臆肿兴遗传药理学例遗传药理学例,主要仪器,浊仇桐掂据豺贼条危村盼膊历临油旭鳞最酮豫徐妖夺轴免妒企酉爵领室昔遗传药理学例遗传药理学例,病例选择,年龄大于18周岁，需要华法林治疗并要求维持INR在1.82.5之间；患者需要长期服用抗凝药华法林至少3个月以上，INR值稳定（连续3次复查INR均达到目标INR范围内）；中国汉族人。,心功能级或以上；妊娠期及哺乳期妇女；近30天内参与其他干预试验者；长期合并应用与华法林有相互作用的药物者，如：三周内服用利福平者；因伴有合并症而不能使用标准剂量者（如：肝、肾功能不全等）。,纳入,排除,械良燥掇处藻施板足创侥徽臀酿尸考冰耳灌陷畔窖职压意婿乐剖阵魄季坐遗传药理学例遗传药理学例,实验流程,样本取血（228例）,目标基因片段PCR扩增（CYP2C9、VKORC1）,纳入及排除目标病例,收集病人的基线信息,基因组DNA提取,确定病例基因型,伦理委员会，研究注册,由遗传及非遗传因素建立华法林给药模型,比较不同基因型个体用药剂量的差异,数据统计,售虽乍眉滞曙遍钦晒作嘉犹夸懊疵嫉穆蚜铆诫敢狰渝蜡弧围健瞬投降铂坟遗传药理学例遗传药理学例,实验内容,采集患者信息,基因分型,基线信息,DNA采集,CYP2C9*3VKORC1,确定基因类型,PCR扩增,伏士统甜氏耶请方恨萄莆访至萧躺矫矽匀浴毁骋陈蛾震眺拘逸摄辖九理捣遗传药理学例遗传药理学例,基因的多态性与华法林用药剂量之间的关系,实验内容,比较不同种族间CYP2C9*3、VKORC1基因分布频率 分析CYP2C9*3、VKORC1基因多态性与华法林维持剂量间的关系,段哭予抗精坤鲤覆砾冯筹莫淮哨肾坊匡膏亢助末舵纲践嘲痔衫毒缀距搓仁遗传药理学例遗传药理学例,实验内容,因变量为华法林日剂量（mg/d）,自变量包括年龄、性别、身高、体重、CYP2C9、VKORC1基因型,多元回归统计方法，制定给药模型,坑凝侦桶利船苟滋和烁湃侣篙坡延踢穷耙溯毁召敖芭蘸惹妹褒迭伯霞鼓津遗传药理学例遗传药理学例,统计学分析,实验数据采用SPSS17.0统计软件分析应用基因计数法计算基因型频率和等位基因频率,基因频率 和等位基因频率采用同组中构成比比较的2检验。患者与Hardy-Weinberg（H-W）平衡的符合程度采用2 检验，P0.05 样本具有群体代表性。计量资料数据采用mean SD。不同基因型间华法林剂量比较采用t检验。P0.05，差异有统计学意义。,端坚崭逞詹侮披戚简超裙有蔬雀汐酮搅问楞攻愿诞乎砷殊圆宝尊祁肮娠添遗传药理学例遗传药理学例,结果与讨论,酪倍疲直嗅政腆坚裸肿堕徒雕哺巾丙奥捎俏您河润灶塞赘募察份乡炽帚瑶遗传药理学例遗传药理学例,表1 CYP2C9*3基因分布频率（n=228，%）,实验结果,注：华法林抗凝治疗人群中，CYP2C9*3基因以AA型为主，AC和CC型少见,吝脸翻官嗓嘎寸归梆仟冈不倔迂他括趴素滤且录啤臆享品闺观弱犬丫馆赃遗传药理学例遗传药理学例,表2 患者CYP2C9*3基因多态性与H-W平衡的符合程度检验（n=228）,痊央策颊骇慎抓龄敞八疼氧屉捉群豁眶垮旋析蔗虐纵哉太副伤筑击补她政遗传药理学例遗传药理学例,表4 VKORC1基因分布频率（n=228，%）,注：华法林抗凝治疗人群中，VKORC1基因以AA和AG型为主，GG型少见,又徽魂萤呢贱恨阿妙芋袋墙轻米邵伟英擅闪嫉逗碗谍窿漂先犊迢坐众唤迈遗传药理学例遗传药理学例,表5 患者VKORC1基因多态性与H-W平衡的符合程度检验（n=228）,旬卜稗井霓宛闺囤瓜巴牙爸兼哭裤震酗筑粘昨限韵邱食辛娟箕澄滴怨轰戊遗传药理学例遗传药理学例,表6 不同种族 VKORC1基因频率分布情况对比（%）,涸毛奉澄瞪哎肛尚箱诅插载幼市鉴攻眶沂嚣毕睁但雷迹响剧癣匝甚冠吨洞遗传药理学例遗传药理学例,表7 不同基因型间的患者基本情况比较,注：#CYP2C9*3 AA和AC型华法林平均剂量比较，P0.05；#VKORC1 AA和AG/GG华法林平均剂量比较，P0.05,腆逼寻衰莫吮裂咨脖眩蒋祈瓮沂诲搔荧香泻巨示翰减糙奶藩渔抡嫉陕环侮遗传药理学例遗传药理学例,表8 不同年龄段患者的华法林用药剂量比较,论痪秃呻胁劲幽鸟拦侦旁樊傻抠散救畔歪如佣哑烩渴所屉栅畸滚怜恃窑蛾遗传药理学例遗传药理学例,图1 不同CYP2C9*3/VKORC1基因型患者间的剂量比较,AA and AA AA and AG AA and GG AC and AA AC and AG n=183 n=34 n=2 n=8 n=1,养屡深惯夸汁何未盘语尘底癸顾陈眷剐沂旨减藕首撰墅刻着犊桃恤淀请牵遗传药理学例遗传药理学例,表9 患者基线信息的单因素回归分析,援芍捎挟侄糊髓逾糟奈真丧属霜越焰勉穴宙徽绢们脖傻肋吻涵牟馁隅雁惯遗传药理学例遗传药理学例,表10 多元回归统计方法制定给药模型,颈隅染垢洱豁试乾泛糙岿肾侠扫迪肩塑鬼铬涧逛喊濒夜唬删厅汕琵只睡催遗传药理学例遗传药理学例,结 论,本实验条件下：228例华法林抗凝治疗患者中，CYP2C9*3、VKROC1基因存在多态性，基因频率与其他种族存在一定的差异。CYP2C9*3基因突变的个体所需华法林的日平均剂量低于野生基因型的个体。VKROC1基因的突变导致患者服用华法林的剂量增加。非遗传因素中，患者的年龄、身高与华法林用药剂量存在相关性。,试担缄曰铡窟送遇履犀摇扳钻欢咋咖蓉猛勿昭戳夸驱苔搐薪傀羞派毕倪津遗传药理学例遗传药理学例,本实验条件下：本研究得出的华法林个体化给药模型 Dose(mg/d)=-2.330.306Sex0.027Age0.008Weight0.017Height0.063CYP2C9*31.501 VKORC1可解释 33.4%的剂量差异。本研究只能解释33.4%的华法林剂量差异，这提示我们要就影响华法林发挥抗凝活性的遗传及非遗传因素进行扩大研究。,结 论,染豹着钝凉把冉储吹钓龚僳项站兴八把椿折斥映耀缀倍舰炕派梢壬集嘛旋遗传药理学例遗传药理学例,
