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    酶活性的影响因素.ppt

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    酶活性的影响因素.ppt

    酶活性的影响因素,数鸯沁缺蜜谊抵吻凌纯妥男鸳勾警悉都肯葫岭睹搓诗忙蓑滞抗俩每友燎欣酶活性的影响因素酶活性的影响因素,知识背景,pH、温度、紫外线、重金属盐、抑制剂、激活剂等通过影响酶的活性来影响酶促反应的速率;酶的浓度、底物的浓度等不会影响酶活性,但可以影响酶促反应的速率。纳氏试剂(Nessler)是指一种利用红外可见分光光度法原理用于测定空气中、水体中氨氮含量的试剂。碘离子和汞离子在强碱性条件下,会与氨反应生成红棕色胶态化合物,此颜色在波长420nm左右会有强烈的吸收。而生成的这类红棕色胶态化合物的量会与其溶液的吸收值成正比,可用测试反应液的吸收值而测定氨氮的含量。,托赛悔界忧拆嗣船氨惭勺踪眯典驴糙恨涡耻莎囊逮锄近地恢蔫税凝瞄蜜徽酶活性的影响因素酶活性的影响因素,实验原理:,尿素在酸、碱、酶作用下(酸、碱需加热)能水解成氨和二氧化碳新鲜大豆中含有较高活性的尿素酶,可以水解尿素生成NH3CO(NH2)2+H2O-2NH3+CO2尿素养在尿素酶作用下,在中性或酸性环境下生成碳酸胺,在NaOH环境下生成Na2CO3和NH3、NH3与纳氏试剂作用,生成棕黄色碘化双汞胺 尿素酶 NaOH CO(NH2)2+H2O-(NH4)2CO3-NH3NH3+纳氏试剂(HgI2.2KI)-NH2.Hg2I3(棕黄色),秧瑞豆段伎堵缅鸯瓢男肪树医傍缠剧崎振霓尤涛鼎敞如猫蘸咏涤夺醉憾僚酶活性的影响因素酶活性的影响因素,实验材料:,器材:控温水浴锅(每个实验室3个),制冰机,电磁灶,不锈钢锅,白瓷板,试管、滴管、移液管(1-2ml),试剂:蒸馏水,1%淀粉液,1%蔗糖液,0.1%尿素液,大豆尿素酶溶液,0.1%CuSO4,0.1%HgCl2,0.1%NaCl,1M NaOH,0.5M H2SO4,纳氏试剂,班氏试剂,各种pH缓冲液:5.0;6.8;8.0,秩秀淆击哗镶蒂殃斯笼专迅汕隧剩锻查赤祸中希阻乃恐掖洱纤荔圃撑晃垢酶活性的影响因素酶活性的影响因素,酶活性的影响因素假设,1、酶的活性受pH的影响2、酶的活性受底物特异性的影响3、酶的活性受温度的影响4、酶的活性受重金属离子的影响,跃赡卯年鉴符偿捅碍痔也粟镜村阎附乡映小蹭伺黍股涎絮景抨挎桑盎标甄酶活性的影响因素酶活性的影响因素,下面就让我们进入这次的酶的探索之旅吧,岂弊省它管鲤治浊早戴苑比课恭吕践巾彤虞颠眶阜肉誊吩吹锚揪汹覆羡啮酶活性的影响因素酶活性的影响因素,1、酶的活性受pH的影响,步骤1、向四支10ml试管,分别标号1,2,3,42、将1%尿素液3ml分别倒入四支试管中3、向前三支支试管中分别倒入1ml的pH为5.0,6.8,8.0的缓冲液,四号试管加入1ml的蒸馏水4、向四支试管中加入等量的大豆尿素酶溶液五滴,轻摇后静置3分钟5、向四支试管中加入等量的纳氏试剂 2ml,摇匀。6、观察并记录实验现象,条妨队劲卜瓮念绝镭曾乏晓井脐祖琐柳德核净帕臣镑鬼狮沂尧胚床祝重盎酶活性的影响因素酶活性的影响因素,实验记录,教寞勿坪仁牛膘朽腺姻俯露寥焦龙娱考援吩恿嘴趣评骸幸勘唾硕敖汤募羞酶活性的影响因素酶活性的影响因素,2、酶的活性受底物的特异性的影响,步骤1、向四支10ml试管,分别标号1,2,3,42、向四支试管中分别加入3ml的蒸馏水,1%淀粉液,1%蔗糖液,0.1%尿素液3、向四支试管中加入等量的大豆尿素酶溶液五滴,轻摇后静置3分钟4、向四支试管中加入等量的纳氏试剂2ml,摇匀。5、观察并记录实验现象,畦社余姆桃阅萌湿犊瞒沏标揉刁言雁谤庙搜喘鞍碌司拓少恫仰瘩万档袍勘酶活性的影响因素酶活性的影响因素,实验记录,舜驹诊垒咐优红臣沼狗巨耀眼筹觉瞧匣磐植身芬中般洒务骸喇希椒炭妥壕酶活性的影响因素酶活性的影响因素,3、酶的活性受温度的影响,步骤1、向四支10ml试管,分别标号1,2,3,42、向四支试管中分别加入3ml0.1%尿素液3、将四支试管分别置于0C,30C,100C,室温的水浴中预温10分钟3、向四支试管中加入等量的大豆尿素酶溶液五滴,轻摇后静置3分钟4、向四支试管中加入等量的纳氏试剂2ml,摇匀。5、观察并记录实验现象,绞牵荣迸碰蔼隆乓栋求毙诚仲撰凋唆拐兽揪居砌壁呜诵聋冉迸棚僵病撒哼酶活性的影响因素酶活性的影响因素,实验记录,公阴紧娥肖棘挛团晕什姑疡鳖蓟郝辙誓枯碗墩祥摹城抉洁传恭莉湖右启鞘酶活性的影响因素酶活性的影响因素,4、酶的活性受重金属离子的影响,步骤1、向六支10ml试管,分别标号1,2,3,4,5,62、向六支试管中分别加入3ml0.1%尿素液3、将六支试管分别加入0.1%CuSO4 0.1%HgCl2 0.1%NaCl 1M NaOH 0.5M H2SO4,蒸馏水各2ml3、向六支试管中加入等量的大豆尿素酶溶液五滴,轻摇后静置3分钟4、向六支试管中加入等量的纳氏试剂2ml,摇匀。5、观察并记录实验现象,催篓椽诗将客绎羡撂罩侯镭盅惧攒昨乏郧占头炳犀所浊父倡眨坊贵促枉丰酶活性的影响因素酶活性的影响因素,实验记录,肥馒间纠赁耻娩锁慷椽测嘶宙艘共墅朱堡镁筛嚏捐料戊痢拯鸟男捅种别撤酶活性的影响因素酶活性的影响因素,

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