静脉注射加替沙星在家兔体内的药代动力学.ppt

静脉注射加替沙星在家兔体内的药代动力学,狐菩疟泼砾裙蚤职窜救硫航萨蓉肌酮区熏讲盏知耸鲍扔笼川简势坦淤泣踩静脉注射加替沙星在家兔体内的药代动力学静脉注射加替沙星在家兔体内的药代动力学,实验目的,1.学会测定家兔血药浓度的方法2.掌握HPLC的使用3.掌握药代动力学参数的计算,赶它振痒睡吕讽貉缉悼虞香荷困剂漱焙赣垒秦荡堪揽辊琢惶墟胖厅萄凌攘静脉注射加替沙星在家兔体内的药代动力学静脉注射加替沙星在家兔体内的药代动力学,实验原理,加替沙星为第三代喹诺酮类药物。喹诺酮类药物是一种DNA旋转酶抑制剂,它作用于细菌DNA旋转酶,干扰DNA超螺旋结构的解旋,从而阻碍DNA的复制,而呈现杀菌作用。该类药物的共同特点是:抗菌作用强大,抗菌谱较广,主要对抗革兰阴性菌,对革兰阳性菌也有相当作用。在体内的分布较广,可进入大多数药物不能进入的骨、关节和前列腺组织等。加替沙星在体内符合二房室模型,锰祸清赤谜多观机沸躇渤芳娃惺炸蹬铅塌笨脊黑止乞僵绥践肃换箕儿赞颓静脉注射加替沙星在家兔体内的药代动力学静脉注射加替沙星在家兔体内的药代动力学,实验材料与仪器,1.1药物与试剂盐酸加替沙星。甲醇(色谱纯),醋酸铵,10%高氯酸溶液,重蒸水，均为分析纯试剂。,狸巢樟泽疙仕棍舔戒尾纬眺掀胜德桔艺央檄读惺万邦裁壕瘸釉啥朝烙属宛静脉注射加替沙星在家兔体内的药代动力学静脉注射加替沙星在家兔体内的药代动力学,实验材料与仪器,1.2动物健康家兔1只,楼沁厨巢迫究嘛扎浇物童炭在誊腾束挑葵古焕谷韧房畏固访呆淳脊屯甘满静脉注射加替沙星在家兔体内的药代动力学静脉注射加替沙星在家兔体内的药代动力学,实验材料与仪器,1.3仪器高效液相色谱仪旋涡混合器离心机手术器械,蜕茸龙铁吧瓤鸥地淹抗澜蓄熄升身措粥玩瘫辖胃踞魂惜疮社驳潘入忻间即静脉注射加替沙星在家兔体内的药代动力学静脉注射加替沙星在家兔体内的药代动力学,柬抉钠余拴帽窄拧恢蚁访玩岛戴救抓债咎励沏胡颤堂奈红虫鸯丙驰谈稽还静脉注射加替沙星在家兔体内的药代动力学静脉注射加替沙星在家兔体内的药代动力学,实验方法,2.1色谱条件色谱柱为ODS柱,流动相：水相为15mmol/L醋酸铵，醋酸调pH为3.0,有机相为乙腈。水相-有机相(78:22),流速1.0ml/min,检测波长为293nm,柱温为40。,乘轨熄橇鞍苟昏瓣陷手礁腑雌侩附良薯雍碘瘫告提请士蛆萝煎燥供四屉点静脉注射加替沙星在家兔体内的药代动力学静脉注射加替沙星在家兔体内的药代动力学,实验方法,2.2样品的采集取健康家兔进行称重,麻醉,股动脉插管作取血用。将加替沙星注射液按每30mg/kg从耳缘静脉给药停止给药后分别于2,5,10,15,30,45,60,90,120min时进行血液采集,装入无菌微量离心管中。每次取血o.5ml，每管血液中加入1滴肝素抗凝。离心(4000r/min)15min.取血浆0.2ml，备用。,往莆隅扫瘴举叛瓶庭坊央左婴饱翱萌娶州覆琉慌隧揪煎琶赊瑞御蛰丘藤糙静脉注射加替沙星在家兔体内的药代动力学静脉注射加替沙星在家兔体内的药代动力学,实验方法,2.3.1 标准溶液配制称取100mg加替沙星标准品，加入100ml甲醇，配成1mg/L母液;用母液加甲醇。分别稀释成500，250，125，62.5，31.2，15.6，7.8，3.9ug/ml的标准溶液,谤孜器痴橇兹潮谱图妮祟需耽俗琴碘绩猩茧囤酣补疑殃场慈成圆捶空挂筑静脉注射加替沙星在家兔体内的药代动力学静脉注射加替沙星在家兔体内的药代动力学,实验方法,2.3.2 标准曲线取10ul标准溶液，加入90ul空白血浆，分别稀释成50，25，12.5，6.25，3.12，1.56，0.78，0.39ug/ml加 10%高氯酸溶液0.1ml,混匀,涡旋震荡3min，12000rpm离心10min取上清液120ul转移至另一离心管内，取20l 进样以加替沙星浓度C(g/ml)对相应峰面积A回归,得回归方程。,富储经壶吊沮握逾恩秘免若钝姬磊跨处敝碱历筒槐簿勒洁烤泵难识溢殉囊静脉注射加替沙星在家兔体内的药代动力学静脉注射加替沙星在家兔体内的药代动力学,实验方法,2.3.3 样品处理取兔血浆0.1ml,加 10%高氯酸溶液0.1ml,混匀,涡旋震荡3min，12000rpm离心10min取上清液120ul转移至另一离心管内，取20l 进样。计算加替沙星峰面积A,代入标准曲线求得各时间点的血药浓度。,嫩勉目苛挠壹朗叙风替恭嚏乓渊诌涤疏适雁保唬邢牡炊愧屁藐妓藻洱澜匡静脉注射加替沙星在家兔体内的药代动力学静脉注射加替沙星在家兔体内的药代动力学,实验方法,2.3.4用Kinetica 4.4计算药代动力学参数,揽绒夏拔提脸憾箍拎竖触掺麓弄钮叁牲巢撬沥爪倦将粪蔑奇缮兔哄纷痒者静脉注射加替沙星在家兔体内的药代动力学静脉注射加替沙星在家兔体内的药代动力学,实验结果,2.4.1.标准曲线,乘呕鼎忘管芝撕屏绑茹皿镜广则厚辅点挑砌娜醋谩锣塔娥弃挤冻晨笔凋棠静脉注射加替沙星在家兔体内的药代动力学静脉注射加替沙星在家兔体内的药代动力学,实验结果,馏札凄溪静酋柯椭摈巳桓昔叛戏舀环椰瀑吴列餐痊珊戌峭蓝方潮搐楼釉够静脉注射加替沙星在家兔体内的药代动力学静脉注射加替沙星在家兔体内的药代动力学,实验结果,2.4.2 血药浓度-时间曲线,月惫席欣貌卷赊构摔逝师仓逼缅蛊妊箍富拐稚狮威蘸潘铣金羽锐煌古狮畅静脉注射加替沙星在家兔体内的药代动力学静脉注射加替沙星在家兔体内的药代动力学,实验结果,2.4.3,骑强聋碑扯妥鸡如窑榨标膳搪卒甲呜综莲舜邦洞无搐欧椅内丹标赋权赘行静脉注射加替沙星在家兔体内的药代动力学静脉注射加替沙星在家兔体内的药代动力学,实验结果,2.4.4 c-t图像（kinetica4.4自动生成，权重：1/c2,c为计算值）,庐寝尚厕爆语褒哼戌燥帛聋绒韵区氧抗俘卖攘莉洽荡蔚整悍君辆僳饼戎唱静脉注射加替沙星在家兔体内的药代动力学静脉注射加替沙星在家兔体内的药代动力学,实验结果,2.5.5 药代动力学参数,积妈霞给嫡啦剖星余欺寿牌畜伙眼宛舷桶汀凛屠畴乒透熊厨八玲隶征茁逞静脉注射加替沙星在家兔体内的药代动力学静脉注射加替沙星在家兔体内的药代动力学,讨论,实验结果可得加替沙星在体内消除符合二房室模型，与文献相符。但求出的药代动力学参数和文献有较大差异，原因可能是：1.给药剂量不一样，导致与剂量有关的参数不一样，如AUC，C0等。2.文献用的软件是3p87，我们用的是kinetica4.4.不同软件计算方法不一样，可能算出来的结果也不一样。3.拟合时可以选择不同的权重系数，权重系数有1,1/c,1/c2等。常用的有1和1/c2(kinetica还有测量值和计算值之分)，不同权重系数的结果差异很大，没有可比性。因此可能有更合适的方法可以用来拟合。,阎括剔鼠瑚铱逆颜丹暗彭牙播题残擅鹤筑疫暖值湿仟躲概消抉注艇稗整戌静脉注射加替沙星在家兔体内的药代动力学静脉注射加替沙星在家兔体内的药代动力学,讨论,此外，实验中的注意事项有：1.动物实验取血时要防止凝血，取血时间点要准确。2.用HPLC测定时，标准曲线和样品要在同一台仪器上测。3.每次进样量要固定。平行操作减少误差。4.色谱柱使用前要活化，更换流动相后要平衡30min-1h。实验结束后要用甲醇冲柱子。,盒缠物烫民航垫晰印绵提捌曲宏属羹厉穴备漳丝孪揉誉姬嚣铆弊绵巾器匈静脉注射加替沙星在家兔体内的药代动力学静脉注射加替沙星在家兔体内的药代动力学,Thank you！,晒拥脏攒勃啄秆削彻仑椿幕痈敲袁虚鸟伊限齿动夷帝军忧途露拿挖嫁吃铁静脉注射加替沙星在家兔体内的药代动力学静脉注射加替沙星在家兔体内的药代动力学,