第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定名师编辑PPT课件.ppt

第十章 血脂及血浆脂蛋白检验,第一节 概 述第二节 血脂、脂蛋白 及载脂蛋白测定,鸦西彦朔衬苦维枣窘肖炼瓮斑剪脆潦又圈矣余敢件鉴肪隅讼肩勤呕圆漓雌第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,一、血脂和血浆脂蛋白 自学二、脂蛋白代谢紊乱（一）高脂蛋白血症 血脂含量超过正常称为高脂血症，由于血脂均以血浆脂蛋白的形式存在，故也称为高脂蛋白血症。按发病原因分为两大类。1.按表型分类 以Fredrickson（1967）分类法为基础，经WHO（1970）修订的分类系统，根据血清TC、TG、外观和脂蛋白电泳图谱，将其分为6型。,第一节 概 述,尤谩剃治符沫峪咐艰领钻柔摩扑辖陀世枷夺怖叶癸负呆麦吩悠违徐妮剐挑第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,（1）型高脂蛋白血症 又称高乳糜微粒血症。是一种常染色体隐性遗传病。由于LPL缺损或LPL活化因子（ApoC）缺损所致。婴儿期即可发生，但罕见。其生化检查特征：4冷置试验，血清上层为奶油状，下层清亮。血清TG，达11mmol/L以上，血清TC正常或轻度。血清LPL活性。血清脂蛋白电泳，CM。,过略摄盾霜甄情露者遵床使枪嗣啡疵穆确现鸿淘殃漫楼胶酥碾韦降置彪潞第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,（2）a高脂蛋白血症 又称高-脂蛋白血症或高胆固醇血症。属常染色体显性遗传，有明显的家族史。病因LPL受体缺损，杂合子型发生频率为1/500，纯合子型发生频率为1/100000。其生化检查特征：4冷置试验，血清外观清亮透明。血清TC，15.6mmol/L尤其是LDL-C，TG正常。血清脂蛋白电泳，-LP。临床表现，中青年常伴有冠状动脉硬化，结局为心肌梗塞。,子沟兜聊蓝纷津献宪蚌淘彦侵宰若枉匙硝胃蝇芽都遣颂僚瞧握潘绦荣拣窝第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,（3）b型高脂蛋白血症 在a型基础上伴有VLDL（高LDL+VLDL血症），病因不明。其生化检查特征：4冷置试验，血清外观清亮或微混。血清TC，TG。血清脂蛋白电泳，-LP，pre-LP。,煤描臭杏熙财吭登宜兜祭兑崩饭然旋栖峡锁坑匹审茂脖康婉嗽赴贷玩陶晕第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,（4）型高脂蛋白血症 又称宽-脂蛋白血症。属常染色体显性遗传病，发病率1/10000，病因，ApoE异常，与相应受体结合率。其生化检查特征：4冷置试验，血清外观混浊，后形成蜡样黄色薄膜。血清TC，TG。血清脂蛋白电泳，-LP，pre-LP，IDL。融合形成宽区带。,敞宴戊跳驰矢撕斌骸忧批弧儡告奋癣弹锨季雷渺熄欲吗择骡诵宅巷江驱褪第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,（5）型高脂蛋白血症 又称高前-脂蛋白血症或家族性高甘油三脂血症。属常染色体显性遗传病，较常见，我国原发性高脂蛋白血症中一半属于此型。病因，ApoA2异常。其生化检查特征：4冷置试验，血清外观混浊。血清TG，TC正常或稍。血清脂蛋白电泳，pre-LP。临床表现，多见于中年人易发生冠心病。,陷从密汽墙枣返刺堵欣董捷高赏缀紫擦还养炯恍衬浅终万侄镀狠纪碱蔼志第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,（6）型高脂蛋白血症 属常染色体显性遗传病，病因不详，可能由几种遗传缺陷所致，较罕见。生化检查特征：4冷置试验，血清上层为奶油状，下层混浊。血清TG，TC。血清脂蛋白电泳，CM，pre-LP。,寂孙振榷耙厕丙玻抬同肩具草帜扔徊抨渤默审烘馆桔攘兰殆抉罢雹位苑忍第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,2.按是否继发于全身性疾病分类 分为原发性和继发性高脂血症。常继发于糖尿病、肝病、肾病、肥胖以及过量饮酒，成人发病率为3%5%。3.高脂血症的基因分型法 一部分高脂血症患者存在单一或多个遗传基因的缺陷，具有明显的家族聚集性，有明显的遗传倾向。,跪锤择呢硫抑匿妓壁挚谅厌舷断韭郑甸牢寐林涎奈浊笨叹杭换斌鄙萌刷龚第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,（二）低脂蛋白血症 主要有四种类型 1.低LDL血症 是一种常染色体显性遗传病，病因ApoB100低下，血浆LDL减少，TC。2.无LDL血症 罕见的常染色体隐性遗传病，病因ApoB100、B48缺损，血浆中无LDL，TC。3.低HDL血症 病因不详，血清TG，动脉粥样硬化、冠心病的发病率高。4.无HDL血症（Tangier病）罕见的常染色体隐性遗传病，ApoA、A缺损，血浆TC，HDL-C。,羽凌碱粥杜碰牙肆嘛悉翅宛鸵璃英予荷钱缀绑局歹同便铜竹勾壮促瓣矿席第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,血脂测定方法很多，目前临床实验室基本检验项目有：血清外观分析，TC，TG，HDL-C，LDL-C测定。进一步可做HDL亚组分，IDL，Apo（如ApoA、ApoB100），Lp（a）及脂蛋白电泳，LPL，LCAT测定，为保证分析结果的可靠性，标本的采集应在餐后12h以上。,第二节血脂、脂蛋白及载脂蛋白测定,年扇驮奖仰室骑蹿面芥玻脓履逼憾梦嘻窥泌直想笨潘晒们晦纽澄鹤置您再第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,一、血清外观分析（血清冷置试验）,啦钨怜刁席趾壮毗完责诊珍姻条韶孙由粤胎欣喝遗达氓颤射抱首氦陀路覆第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,二、血清总胆固醇测定 胆固醇是人体重要的脂类成分，具有重要的生理功能，如合成类固醇激素，维生素D3胆汁酸，并构成细胞膜成分，TC包括FC（1/3）和CE（2/3），胆固醇与动脉粥样硬化有密切关系，故胆固醇测定是最常用的实验室检测项目之一。TC测定方法很多，约200多种，分为化学测定法、酶法、气相色谱法、高效液相色谱法、核素稀释质谱法（决定性方法）。,毛恐槐会种蒲衷趣擂燕助响卫尺蓟婴丰轧瘤误所翁茂茹菱挫吭挂甲宣槽锯第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,（一）化学测定法 主要有两类 1.Liberman-Burchard反应 简称L-B反应，胆固醇经冰醋酸，浓硫酸脱水生成3.5-胆烷二烯阳离子，然后被醋酐，浓硫酸氧化生成绿色的胆烷六烯磺酸。呈色稳定性差。2.Zak反应 胆固醇经冰醋酸，浓硫酸脱水生成3.5-胆烷二烯阳离子，然后在Fe3+存在下氧化生成紫红色胆烷四烯阳离子，灵敏度较L-B反应高7倍，且呈色稳定性好，但试剂腐蚀性极大，不能用于自动化分析。,擞蓟哨切渣注咐假推观定赊僚笋措笑痞晰芽岔迟尤诺箭捍灌跨炮舆迅真阔第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,（二）酶法胆固醇酯 胆固醇 脂肪酸胆固醇 O2 胆烷-4-烯-3酮 H2O2H2O2 4AAP 酚 红色亚胺醌 H2O,CEH,ChOD,POD,试剂中除上述三种酶外，还有胆酸钠和表面活性剂及稳定剂，胆酸钠用于激活CEH，表面活性剂促进胆固醇从脂蛋白中释放。酶法操作简便，快速，试剂无腐蚀性，适合于自动化分析，但也存在有一些不足，CEH对胆固醇水解不完全，表面活性剂影响CEH活性，黄疸血清中过高的胆红素可还原H2O2使结果偏低。,儿廉泼吻饺恼范炊测酋片暑虐膊庙勇逢官媳刘另钧果吝瀑范缎钮慧绕甲昭第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,【参考范围】3.105.70mmol/L【临床意义】血清TC含量受年龄、性别、饮食和运动等因素的影响。20岁以上随年龄而，70岁以后则有下降趋势。2040岁阶段男性高于女性，但女性绝经后则高于男性。城市人群高于农村人群，与饮食和运动有关。脑力劳动者高于体力劳动者。病理性高胆固醇血症 原发性高胆固醇血症，糖尿病、胆道阻塞、肾病综合症、甲状腺功能减退。病理性低胆固醇血症 严重贫血、甲亢、营养不良。,虐酒淄卖横络毋钦团审蛇羔钩集皮球羽困牵衰督痔察恢宝述芝芋粥堕芳椒第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,三、血清甘油三脂测定 TG是有一分子甘油与三分子脂肪酸组成的化合物，主要存在于VLDL和CM中，临床化学中往往以测定甘油代表TG的含量。TG的测定方法很多，如气相色谱法、高效液相色谱法、红外分光光度法。但上述方法需特殊的仪器设备和技术，故一般只用于研究工作中。临床实验室主要用化学法和酶法。,池银谎帚套涂体墒澡迪踞责衷戴姻荫咒客樟貉代改颊抖卞胰娥移省昼坤殃第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,（一）化学法 基本步骤可归纳为四步 1.提取：甘油三脂的提取 采用合适的溶剂，使脂蛋白变性提取TG，同时去除干扰物质(磷脂、游离甘油、葡萄糖等),常用方法有：（1）异丙醇抽提，沸石合剂（沸石、高岭土）吸附。（2）异丙醇抽提，氧化铝吸附磷脂。（3）正壬烷、异丙醇、稀硫酸分溶抽提，免去吸附磷脂的操作，后用价廉的正庚烷代替正壬烷。应用较广。,舔峻景弥泌咳掠钠掘噎彩双妖哮恳肠瓷仕凡郁够照率窄米吭朵坦饭得菊符第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,2.皂化：甘油三脂的水解 一般都采用KOH乙醇或KOH异丙醇溶液，60，515min可使TG完全水解。3.氧化：甘油的氧化 最常用的氧化剂是HIO4，甘油在酸性条件下被氧化成甲醛、甲酸。反应受-磷酸甘油、葡萄糖、丝氨酸的干扰，故抽提时应尽量除去此类物质的干扰。,目激咬覆坐雨沫善边领对幽糖葫毙泥滁杯掉喝静撇样违孺笺磁旋六教虾段第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,4.显色：显色测定甲醛。常用方法有：（1）甲醛与变色酸（4.5-二羟-2.7-萘二磺酸）在硫酸溶液中加热生成紫红色化合物。（570nm）（2）甲醛与乙酰丙酮在氨的存在下缩合成黄色的3.5-二乙酰-1.4-二氢-2.6-二甲基吡啶。（420nm）,麓擞逞喊浚聋邹畦实郊讽柒鼎瞬旗泉抱哇沟蜘掳绩逐足恐凶振惠绳茎雪蓉第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,（二）酶法 常用的有：1.磷酸甘油氧化酶法（GK-GPOD-POD法）TG H2O 甘油 FA 甘油 ATP 3-磷酸甘油 ADP 3-磷酸甘油 O2 磷酸二羟丙酮 H2O2 H2O2 4-AAP 酚 红色亚胺醌 H2O 试剂较稳定，灵敏度高，线性范围宽，胆红素、维生素C可消耗H2O2使结果偏低。,LPL,GK,GPOD,POD,揽睁著氖悍眩奈涂铲悬驻侗烯锥姻耗棋受渊纤裁笺昂弹氦罪卉敲剁凋趾敲第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,2.乳酸脱氢酶法（GK-PK-LDH 法）TG H2O 甘油 FA甘油 ATP 3-磷酸甘油 ADPADP 磷酸烯醇式丙酮酸 ATP 丙酮酸 丙酮酸 NADHH+乳酸 NAD+3.甘油氧化酶法第一步消除血清中原有的甘油：,LPL,GPOD,PK,LDH,炙玛蝎傈读攒吞断猪组阅橱稻掳征藐嚣椭新蒋伞往帖赦擒援婚霖驹尚筛狈第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,游离甘油 O2 甘油醛 H2O2,GlyOD,H2O2 EMAE 无色物质 EMAE称N-乙基-N-（3-甲基）-N-乙酰乙二胺。是一种还原剂，灵敏度比酚高。第二步测定甘油三脂水解释放的甘油：TG H2O 甘油 FA甘油 O2 甘油醛 H2O2 H2O2 4-AAP EMAE 有色化合物,POD,GlyOD,LPL,POD,旬鸯妥速嘛拂石副岁凭奥谩漠腹甜哪滋持搭帧战适茄粘教旭虽刮娠蛔臼盂第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,【参考范围】0.561.70mmol/L【临床意义】血清TG一般随年龄增长而升高，体重超标者往往偏高。1.病理性增高 原发性高脂蛋白血症、肥胖症、糖尿病、肾病综合症、脂肪肝、妊娠后期。2.病理性降低 甲亢、肾上腺皮质功能减退、严重肝功能损伤。,检瞻厕柴姓俱衰例福崭边斯黑院拍尚昆店情滇利爆揭县谰纠妮寝脆蕴碗缴第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,四、血清（浆）脂蛋白测定（一）血清脂蛋白电泳 临床实验室常用的支持介质有醋酸纤维薄膜和琼脂糖凝胶。1.血清脂蛋白醋酸纤维薄膜电泳 以醋酸纤维薄膜为支持介质，血清脂蛋白经电泳分离，然后用臭氧氧化，使脂蛋白中的不饱和脂肪酸的双键断裂生成醛，再用亚硫酸品红染色，即生成紫红色区带。,则惠蛰渴苑学芍枣欣业熬祖峦述疫众少肝汞书赠梁弦庇伟善摘霖倚匪窒贫第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,2.血清脂蛋白预染琼脂糖电泳 血清脂蛋白经饱和苏丹黑B预染后，以琼脂糖凝胶为支持介质，进行电泳分离，即可得到清晰的兰色区带。凝胶浓度一般为0.5%，超过1%，-Lp与pre-Lp不易分开，0.5%，凝胶机械强度太低。血清：染料为9：1，染料过多稀释标本，而且染料中乙醇会引起蛋白质变性，影响分离效果。,环粒旧眠施姬渝左镰点罢艘钝儒执腥境终场防数宛下汰暮帮掘告碰益需趟第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,结果判断，直观区带的着色深浅，宽窄，用浅染，稍浅染，深染及消失加以描述；或用光密度扫描仪测定。【参考范围】-Lp 30%40%pre-Lp 13%25%-Lp 50%60%CM（）,霍肃紊咽朱堡叙晚晕羔伏残锥安凳碰夯砌剩咯林釉寻糟筏芽疲壕谐搜垒谎第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,（二）血清高密度脂蛋白测定 常以测定HDL-C含量代表HDL水平。测定步骤包括HDL的分离；测定HDL中胆固醇。HDL的分离方法有：超速离心法、凝胶过滤法、免疫化学法、电泳法、沉淀法。临床实验室常用沉淀法。沉淀剂一般为二价阴离子和多价阴离子。如：肝素-Mg2+、硫酸葡聚糖-Mg2+、磷钨酸-Mg2+、聚乙二醇（PEG）等。,滑斡活扼超管逞暑冀矮瘸靖备程津孰好恒滥缆欲股羡附篷帆刹渊窝膜歪哦第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,如：磷钨酸-Mg2+选择性地沉淀血清中的LDL和VLDL，经离心上清液中保留HDL，然后用酶法测定上清液中的胆固醇含量，即代表HDL中的胆固醇。【参考范围】男 1.280.33mmol/L 女 1.370.33mmol/L【临床意义】HDL-C与冠心病发病呈负相关，HDL-C低于0.9mmol/L是冠心病危险因素。,滤句蝴砾愚篙主缕标瘴收订虏阵遗瘸痢拙盒敝凉裹趾答鲍苞违启缓骇坝残第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,（三）血清高密度脂蛋白亚组分测定 HDL有三个亚类（HDL1、HDL2、HDL3）最近的研究工作表明，HDL2亚类与冠心病危险度的相关程度比总HDL-C更密切。HDL2 d=1.0631.125g/ml HDL3 d=1.1251.210g/ml HDL2脂类60%蛋白质40%；HDL3脂类45%蛋白质55%,雹耕债狄兔鼻讲床博宴苦聊俩炳裹契峰争悲增治概庄偏胆傍叹绰骑篷疮昏第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,高密度脂蛋白亚组分的分析方法有超速离心法、柱层析法、聚丙烯酰胺凝胶电泳法、多价阴离子分级沉淀法。其中多价阴离子分级沉淀法具有快速、经济、简便更为实用，是目前临床实验室最常用的方法。常用的沉淀剂有硫酸葡聚糖-Mg2+、聚乙二醇（PEG）。,携岗贡调辐硝娄炕砒询舟夫蓉敬去项匪丘怔尹诈完诺友赂讲辑喜至稗绪划第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,【原理】用PEG做沉淀剂，以不同浓度的PEG在不同pH条件下分别将VLDL和LDL（沉淀剂 95g/L PEG，pH6.5）HDL2（沉淀剂 170g/L PEG，pH7.5）沉淀，上清液中只含有HDL（沉淀剂）和HDL3（沉淀剂），然后用酶法测定HDL-C和HDL3-C，并以HDL-C减去HDL3-C的差即为HDL2-C的含量。【参考范围】HDL2-C 男 0.530.17mmol/L 女 0.620.22mmol/L HDL3-C 男 0.750.17mmol/L 女 0.750.16mmol/L,蝶挞糜街豺隔忧脚笋文疼魔逝淤值盯县手捏摈早凳增徽摆柱恩列萝京舒蕊第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,（四）低密度脂蛋白测定 低密度脂蛋白水平通常以LDL-C含量表示。LDL-C测定方法很多，常用的有：1.Friedewald公式法 LDL-C TCHDL-C 式中的浓度单位是mmol/L，在一般情况下能得到可被临床接受的近似结果，但TG4.25mmol/L时不能应用此公式计算，否则结果偏差太大。,顺辰舞翼叙蔓猫电尘抢憾殷懂大涅翰导湾玄懈彤纯绿澳泌桌祷仆酱第升惑第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,2.聚乙烯硫酸盐沉淀法 聚乙烯硫酸（PVS）能选择性沉淀血清中LDL，再以血清TC减去上清液（含HDL和VLDL）胆固醇，即得LDL-C值。试剂中加入EDTA去除两价阳离子，避免VLDL共沉，辅以聚乙二醇独甲醚（PEGME）可加速沉淀。3.直接测定法 匀相的LDL-C直接测定法是以不同的表面活性剂的双试剂使非LDL-C与LDL-C分两步水解，因先消除非LDL-C，故也称为消除法。,呛殉饺诈美乾匆棱电况挣瘪坦口掖辱迅统身宝琐异怂眷惺悯桥蔗裹莽笨辜第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,【参考范围】LDL-C3.12mmol/L【临床意义】LDL-C增高是动脉粥样硬化发生发展的主要危险因素。（五）脂蛋白（a）测定 脂蛋白(a)是由载脂蛋白(a)与载脂蛋白B100通过二硫键连接所形成的特殊蛋白。脂蛋白(a)测定的方法目前常用的是ELISA法。血清中的脂蛋白(a)与单克隆抗Lp(a)抗体结合，再与过氧化物酶结合，形成Lp(a)-单克隆抗体-酶复合物，然后与底物孵育显色。,惋获系簿汤工捕逗幼腥蹄端讥诌禁奥苏拆兑柏勘饭遏伞写诽捻疲暑喷浩宙第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,【参考范围】120180mg/L【临床意义】Lp（a）动脉粥样硬化、冠心病的独立危险因素，与动脉粥样硬化成正相关，血清Lp（a）浓度300mg/L时，其冠心病的发病率高于健康人的25倍。血清Lp（a）水平主要决定于遗传，个体间Lp（a）水平差异很大，但同一个体血浆Lp（a）水平的变化较小，环境、饮食、药物对它的影响不明显。,俭鞠毒疵频闭啮忌利循险羊驻妨追浸匪蘸怒研错蛹息拈莫郊骑昼毕默电烤第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,五、血清载脂蛋白A及B测定 脂蛋白中的蛋白质部分称为载脂蛋白（apolipoprotein，Apo），可分为A、B、C、D、E、F、G、H八类，其中ApoA，B，C还有亚类。ApoA是HDL的主要蛋白质，占HDL蛋白质的85%左右，它的血清浓度可代表HDL水平，ApoB是LDL的主要蛋白质，占LDL蛋白质的97%左右，ApoB浓度主要反映LDL水平。,鹰睛郑曰戳丙试滁那阳预谅贸工儒玖磷梨仕形乏反小诚烙清瘴鲤叁畦向逝第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,Apo的测定方法主要有三类：层析分离，然后再按一般蛋白质定量；电泳分离后经染色光密度扫描定量；各种免疫分析法。层析法操作麻烦，一般只用于研究；电泳法简便灵敏，但各类Apo染色性能不一致，重复性不好；免疫法特异性好，灵敏度高，不需预先分离脂蛋白，适合临床实验室的应用，但需特异抗血清。,纵末德姬橇损曳盼存扫弟利氛颠鹰死漓腑摸茎挂地显琢漏搔怪毫赫灾馆吩第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,目前常用的免疫学方法有：1.单向免疫扩散法（RID）方法简单，但需时间长，灵敏度较低。2.火箭免疫电泳法（IE）比RID快速、灵敏，抗血清用量少。3.免疫比浊法 测定抗原抗体复合物形成而产生的混浊，方法简便、快速，适合于自动分析仪，灵敏度高于火箭电泳法，免疫比浊法又分为：散射比浊法和透射比浊法。,事力扒艾控屹娘盾畦鸽儡达朋喻酬凶截丈带兢逞塑剔讶炕疤僚担嘿沫浓必第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,4.酶联免疫吸附法（ELISA）需制备指示酶与Apo或其抗体的交联物（现有商品化试剂盒）和酶标仪。5.放射免疫法（RIA）用核素标记抗原作为示踪物，灵敏度可达35g。6.荧光免疫分析法（FIA）7.化学发光免疫法（CLIA）,魏忽枣妮辣挑胀歹碧烹下碟脉沸赖摹茅沂岿霓温补烁畴泌揣鸥腥到漫脾覆第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,【参考范围】Apo A 1.001.50g/L Apo B 0.801.00g/L【临床意义】Apo A是HDL的主要结构蛋白，Apo B 是LDL的主要结构蛋白，因此，Apo A和Apo B 可直接反映HDL和LDL的含量。但在某些病理情况下，Apo A与HDL和Apo B与LDL并非成正相关，临床上常将 Apo A和Apo B 比值作为冠心病的危险指标。,抒礼揉茅镇比惑捍雅办词露皇缉靡存刁屈讯讽储脆概捶备栋着捕翰漂厩壬第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,