溶血性链球菌检验培训PPT讲义.ppt

溶血性链球菌检验,分布,溶血性链球菌在自然界中分布较广，存在于水、空气、尘埃、粪便及健康人和动物的口腔、鼻腔、咽喉中，可通过直接接触、空气飞沫传播或通过皮肤、粘膜伤口感染，被污染的食品如奶、肉、蛋及其制品也会对人类进行感染。上呼吸道感染患者、人畜化脓性感染部位常成为食品污染的污染源。引起化脓性感染、中毒性感染、超敏反应性疾病,生物学性状,1形态结构 2培养特性 3分类 4生化反应 5.抵抗力,形态与染色,球形或卵圆形，直径0.5 1 m，链状排列，链长短不一，短者48个细胞组成，长者2030个无芽胞，无鞭毛，培养早期（24h）形成透明质酸的荚膜,培养特性,需氧或兼性厌氧营养要求较高，需补充血液、血清、葡萄糖等在血清肉汤中易形成长链，管底呈絮状沉淀在血琼脂平板上，不同菌株溶血不一最适生长温度为37，最适pH为7.4-7.6,培养特性-血平板,血平板上菌落为灰白色，半透明或不透明，表面光滑，有乳光，直径约0.50.75 mm，为圆形突起的细小菌落，乙型溶血链球菌周围有24 mm界限分明、无色透明的溶血圈,生化反应,分解葡萄糖，产酸不产气。对乳糖、甘露醇、水杨苷、山梨醇、棉子糖、蕈糖、七叶苷的分解能力因不同菌株而异一般不分解菊糖，不被胆汁溶解触酶阴性(与葡萄球菌相区别),毒素及侵袭性酶,链球菌溶血素 致热外毒素：曾称红疹毒素或猩红热毒素 透明质酸酶：又称扩散因子，溶解细胞间质 链激酶：又称链球菌纤维蛋白溶酶，能使血液中纤维蛋白酶原变成纤维蛋白酶，具有增强细菌在组织中的扩散作用，该酶耐热，10050分钟仍可保持活性。链道酶：又称链球菌DNA酶杀白细胞素：能使白细胞失去动力,抵抗力,该菌抵抗力一般不强，6030min即被杀死对常用消毒剂敏感在干燥尘埃中生存数月 乙型链球菌很少有耐药性,微生物学检查,溶血性链球菌检测流程（GB/T4789.11）,25g(ml)样品+225ml无菌生理盐水,葡萄糖肉浸液肉汤或匹克氏肉汤,血平板,血平板(分纯培养),杆菌肽敏感试验,链激酶试验,观察溶血,革兰氏染色,报告,36+1 24h,36+1 24h,36+1 24h,鉴定步骤,溶血及菌落形态的观察革兰氏染色链激酶试验杆菌肽敏感试验,链激酶试验-原理,致病性乙型溶血性链球菌能产生链激酶(即溶纤维蛋白酶)，此酶能激活正常人体血液中的血浆蛋白酶原，使成血浆蛋白酶，而后溶解纤维蛋白,链激酶试验-方法,吸取草酸钾血浆0.2mL，加0.8mL灭菌生理盐水，混匀，加入链球菌18-24h36肉浸液肉汤培养物0.5mL及0.25%氯化钙0.25mL，混匀，置于36水浴10min,血浆混合物自行凝固，观察凝块重新完全溶解的时间，完全溶解为阳性，如24h后不溶解即为阴性。同时用肉浸液肉汤做阴性对照，用已知的链激酶阳性的菌株做阳性对照。,杆菌肽敏感试验,取乙型溶血性菌落的浓菌液涂布于血平板上，用灭菌镊子夹取每片含有0.04单位的杆菌肽纸片置于上述平板上，36培养18-24h，如有抑菌圈出现即为阳性。用已知的阳性菌株做对照,结果报告,在 25g(ml）样品中检出或未检出溶血性链球菌,谢 谢,