TGXAS-家蚕抗血液型脓病性能跟踪测试技术规程.docx

ICS65.020.30CCSB47团T/GXAS体标准T/GXASXXXXXXXX家蚕抗血液型脓病性能跟踪测试技术规程TechinicalcodeofpracticeforperformancetestingofsiIkwormresistancetoBmNPV（征求意见稿）在提交反馈意见时，请将您知道的相关专利连同支持性文件一并附上.2023 -XX-XX 发布2023-XX-XX实施广西标准化协会发布前言本文件参照GB/T1.1-2020标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由广西壮族自治区蚕业技术推广站提出、归口并宜贯。本文件起草单位：广西壮族自治区蚕业技术推广站、河池市蚕业技术推广站，广西农业工程职业技术学院。本文件主要起草人：黄文功、闭立辉、苏红梅、安春梅、李标、黄红燕、刘艳伟、黄凌、黄扬玉、黄康东、覃龙伟、莫嘉凌、廖万波、杨小妹。家蚕抗血液型脓病性能跟踪测试技术规程1范围本文件确立了家蚕抗血液型脓病性能跟踪测试技术的程序，界定了涉及的术语和定义，规定了设施设备，以及饲育、取样、攻毒、发病调查、发病率计算及数据记录等操作指示。本文件适用于广西行政区域内家蚕抗血液型脓病性能跟踪测试。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。DB45/T83种茧育养蚕技术规程DB45/T84桑蚕种保护、冷藏、浸酸技术规程3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。家蚕核型多角体病毒多角体bombyxmorinuclearpolyhedrosisvirusandinclusionbody家蚕核型多角体病毒在家蚕体内繁殖后,形成包埋了大量病毒的多角体,在生物显微镜下呈六角形,并具有较强的折光性。攻毒Challengetest以人工添毒的方法，用家蚕核型病毒多角体悬浮液浸泡桑叶后晾干，喂家蚕使之感染4设施设备抗性测试蚕房为专用，独立于生产养蚕区域：配置养蚕设备、控温控湿设备及消毒机具；配备光学显微镜、纯水机、冰箱、血球计数板、移液枪等。5测试技术流程见图L图1家蚕抗血液型脓病性能跟踪测试技术流程6家蚕抗血液型脓病性能跟踪测试要求A1家蚕饲养饲育方法及技术要求按照DB45/T83的规定执行，包括蚕室温湿度环境、桑叶质量、饲养管理和眠起处理。常规饲养至2龄起蚕。A）抗血液型脓病性能跟踪测试6.2.1核型多角体病毒桑叶准备将病毒配制成目的浓度悬液。将新鲜桑叶浸入病毒悬液中，充分浸渍均匀，取出，待桑叶表面水分晾干后备用。6.2.2取样及要求受试蚕品种及对照品种均在2龄起蚕饷食前取样。每区取样30头，3个重复。取样的蚕放至样品饲喂盒，并随样本传递-份含有样本信息（包括蚕品种名或代号、区号、抽样数量等信息）的小区片。6,2.3攻毒将备好的病毒叶切成3CnIX3cm大小给蚕喂食，每区喂3片。6.2.4攻毒后饲养蚕室温湿度按照DB45/T83的规定执行。第2餐饲喂叶前去除病毒叶残叶、蚕沙，更换垫纸，蚕体、蚕座撒新鲜石灰粉进行消毒，并换为普通桑叶饲喂。6.2.5发病调查6.2.5.1调查时间添食后64h-92h开始至3龄起蚕。6.2.5.2病症及确定方法以家蚕血液型脓病的典型症状结合光学显微镜镜检为依据逐区调查发病蚕、健康蚕。有血液型脓病典型病症的蚕，计为发病蚕：没有典型病症的3龄起蚕记为健康蚕。对不能确定的蚕，取血液用光学显微镜检查，观察到有家蚕核型多角体，则计入发病蚕。6.2.5.3发病率计算公式发病率计算见公式（D：=XIOo（1）式中:a发病率,单位为百分比（%）；b一发病蚕头数，单位为头（头）；C-健康蚕头数,单位为头（头）；6.3结果记录如实准确及时记录测试结果并传递测试结果。根据测试结果，选留发病率低的蚕区。选留蚕区的后续饲养、上族制种按DB45/T83执行.蚕种的保护、冷藏、浸酸按DB45/T84执行。6.4清洗消毒按DB45/T83种茧育养蚕技术规程规定执行。