HPV检测在宫颈癌.ppt.ppt

HPV检测在宫颈癌诊治中的应用,宫颈癌 是女性最常见的恶性肿瘤,在发展中国家占妇女癌症的24,全世界每年新发病4050万例左右,中国约占1/3。,宫颈癌病理发展过程,正常上皮 上皮内瘤变（CIN/CIS）浸润癌,HPV与宫颈癌,目前已证明：人乳头瘤病毒（HPV）感染是宫颈癌和癌前病变的主要病因,99%的宫颈癌和CIN中都可以检测到HPV-DNA。,HPV是一类特异感染人皮肤和粘膜的双链闭合环状DNA病毒,主要感染人类的外阴、生殖道、肛门及口咽部粘膜和皮肤,大部分为自限性感染根据HPV与宫颈癌的关系将其分为低危型和高危型,HPV分型,高危型包括16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68 型等,其中16 和18型 是宫颈癌中最常见型别,其次是58、52 和56型。低危型尤其是6 型和11型极少出现于宫颈恶性组织中,但常从外生殖器疣和宫颈良性病变中发现。,HPV感染,美国女大学生宫颈HPV感染率为43%,6个月后清除率为31%,8个月后清除率达89%,大部分HPV感染是一过性的。当宿主的防御机制存在缺陷时,可导致HPV持续感染,HPV基因片段可整合到宿主细胞的DNA上,使得相应基因调控失调,病毒癌蛋白E6/E7持续过量表达,从而导致细胞向恶性表型转化。,HPV检测,HPV 不能用常规方法培养,也不能进行血清分型,目前HPV 的分型是基于对其基因组的分子杂交。1、免疫组化法 2、原位核酸杂交法 3、PCR法 4、基因捕获法 5、芯片测定技术,杂交捕获代,基因捕获DNA检测方法（hC2）检测:13种高危HPV（16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68）。通过对病毒DNA解链,杂交捕获,光信号放大获取结果,DNA裂解 RNA-DNA杂交 抗体捕获 化学发光 计算机判读,裂解 加入探针 杂交 加入二抗和发光剂,我院自2004年开展该项工作以来,共检测8167例样品,HPV感染率为34.0。TCT检查提示 正常细胞形态和炎症:阳性率为23.2,细胞结构异常（ASCUS+SIL）阳性率:76.9病理确诊CIN宫颈癌,HPV感染率 99,HPV检测在宫颈癌诊治中的临床意义,1 筛查宫颈癌高发人群：对HPV持续感染者,即使细胞学正常也要定期随访,可及早发现癌前病变,降低宫颈癌发病率；提早药物干预治疗/疫苗治疗2 协助诊断早期宫颈癌和癌前病变：尤其对TCT检查提示ASCUS/LSIL者，HPV检测可协助鉴别诊断3 CIN治疗后的随访：物理治疗、手术治疗、药物治疗后的随访，治疗后HPV持续阳性复发率高4 宫颈癌手术后随访 宫颈癌手术后,随访20个月,高危HPV持续阳性，复发率显著增高,展望,hC2方法，特异性强，准确率高，并能做到定量，但不能分出亚型。芯片技术，可在相同的条件下，分出亚型，但不能定量。因此，HPV亚型分类和定量检测研究将成为今后的重要课题。亚型和量化，可能对疾病的演变和转归提供更有利的证据。,