TCNHFA 111.181-2023 保健食品用原料 蜂蜜团体标准.docx
ICS01.040.67CCSX83中国营养保健食品协会团体标准T/CNHFA111.181-2023保健食品用原料蜂蜜RawMaterialsforHealthFoodMel发布实施中国营养保健食品协会发布目次前言21范围32规范性引用文件33技术要求34其他5附录A错误!未定义书签。lZ1刖S本文件按照GB/T1.1-2020标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。本文件由中国营养保健食品协会提出并归口。本文件起草单位：中国食品药品检定研究院中药民族药检定所、北京中医药大学、中国中药协会中药质量与安全专业委员会、深圳市药品检验研究院、中国营养保健食品协会保健食品研发专业委员会。本文件主要起草人：石佳、刘越、马双成、魏锋、金红宇、王淑红、刘芫汐、康帅、聂黎行、王莹、程显隆、汪祺、刘静、杨洋、左甜甜、杨建波、陈佳、王亚丹、荆文光、康荣、关潇潼、谢耀轩、李君瑶、曾利娜、邓少伟。本文件为首次发布。保健食品用原料蜂蜜1范围本文件适用于保健食品用原料蜂蜜。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。下列文件中所包含的部分条款通过相关标准的引用而成为本标准的部分内容。凡是注明日期的引用文件,仅注H期的版本适用于本文件。凡是不注明日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改版本）适用于本文件。GB2761食品安全国家标准食品中真菌毒素限量GB2762食品安全国家标准食品中污染物限量GB2763食品安全国家标准食品中农药最大残留限量GB5009.11食品安全国家标准食品中总碑及无机碑的测定GB5009.12食品安全国家标准食品中铅的测定GB5009.17食品安全国家标准食品中总汞及有机汞的测定GB16740食品安全国家标准保健食品中华人民共和国药典一部中华人民共和国药典四部3技术要求3.1来源蜂蜜为蜜蜂科昆虫中华蜜蜂APiSceranaFabricius或意大利蜂APiS海闻Linnaeus所酿的蜜。春至秋季采收，漉过。3.2感官要求应符合表1的规定。表1感官要求项目要求检验方法色泽白色至淡黄色或橘黄色至黄褐色在日光下观察颜色：如断面不易观察，可削平后观察滋味、气味气芳香，味极甜滋味可取少量直接Il尝，或加热水浸泡后尝浸出液：气味可直接嗅闻，或在折断、破碎或搓揉时进行形态本品为半透明、带光泽、浓稠的液体，放久或遇冷渐有白色颗粒状结晶析出在日光下观察：长度、宽度及厚度测量时应用亳米刻度尺；质地是指用手折断时的感官感觉3.3理化指标应符合表2的规定。表2理化指标项目指标检验方法水分，%24.0中华人民共和国药典2020年版四部通则0622“折光率测定法”方法相对密度，>1.349中华人民共和国药典2020年版四部通则0601“相对密度测定法”方法其糖应符合规定附录A5-羟甲基糠醛，%（以干燥品计）<0.004附录B就糖、麦芽糖，%（以干燥品计）<5.0附录C铅（以Pb计），mg/kg0.5GB5009.12总碑（以AS计），mg/kg1.0GB5009.11总汞（以Hg计），mg/kg0.3GB5009.17注：其他未列污染物限量应符合GB2762相应食品类别（名称）的规定或有关规定：未列农药最大残留限量应符合GB2763相应食品类别/名称的规定或国家有关规定。3.5真菌毒素限量真菌毒素限量应符合GB2761中相应食品类别（名称）的规定或有关规定。4其他保健食品所用原料为本品的炮制加工品，其炮制加工前的原料应符合本标准。炮制方法为净制、切制的，除另有规定外，炮制加工品应符合本标准。炮制方法为其他炮制工艺的，炮制加工品应符合相应标准的规定。附录A（规范性附录）寡糖薄层鉴别检验方法A.1一般规定本标准所用试剂在没有注明其他要求时，均指分析纯试剂和GB"6682规定的三级水。实验中所用的溶液在未注明用何种溶剂配制时，均指水溶液。A.2方法提要本品经活性炭固相萃取柱在真空泵的吸引下，用7%乙醇洗脱，弃去洗脱液。再用50%乙醇洗脱，收集洗脱液，置水浴中减压浓缩至干，残渣加30%乙醇溶解提取后，采用薄层色谱法，以麦芽五糖为对照对样品进行鉴别分析。A.3仪器A.3.1分析天平：感量为0.0Img和0.0001g。A.3.2真空泵。A.3.3水浴型旋转蒸发器。A.3.4鼓风干燥箱。A.3.5点样器：玻璃毛细管（直径为0.5mm,长度为100mm）或微量注射器。A.3.6色谱展开缸：密闭玻璃槽（长度、宽度及高度可根据实际使用进行选择）。A.3.7玻璃喷雾瓶。A.4试剂和耗材A.4.1活性炭固相萃取柱。A.4.2硅藻土。A.4.3活性炭。A.4.4乙醇。A.4.5正丙醇。A.4.6水。A.4.7三乙胺。A.4.8苯胺-二苯胺-磷酸的混合溶液:取二苯胺1g,苯胺1mL,磷酸5mL,加丙酮至50mL,混匀。A.4.9高效硅胶G薄层板。A.4.10对照提取物麦芽五糖对照品英文名称、CAS号、分子式和相对分子量见表A.1。表A.1化学对照品（标准品）信息中文名称英文名称CAS号分子式相对分子量麦芽五糖Maltopentaose34620-76-3C30H52O26828.72A.5色谱条件点样量：3L;展开剂：正丙醇-水-三乙胺（60：30：0.7,v/v/v）；观测条件：日光下检视。A.6操作方法A. 6.1对照提取物溶液的制备：取麦芽五糖对照品，加30%乙醇制成每ImL含Img的溶液，备用。A.6.2供试品溶液的制备：取蜂蜜2g,置烧杯中，加入IOmL水溶解后，缓缓加至活性炭固相萃取柱（在固相萃取空柱管底部塞入一个筛板，压紧，置固相萃取装置上。称取硅藻±0.2g,加水适量混匀，用吸管加至固相萃取柱管中，自然沉降形成3mm厚的硅藻土层，打开真空泵吸引，称取活性炭0.5g力口IOmL水搅拌，混匀，用吸管加入，在真空泵的吸引下使活性炭沉降，当水面接近活性炭层面时，再次注入0.2g用水混匀的硅藻土，在真空泵的吸引下，以1秒/滴的速度用25mL的水预洗，当液面到达柱面上2mm时关掉活塞，再压入上筛板，备用）中，打开活塞，在真空泵的吸引下，使溶液通过柱子，待液面下降到柱面以上2mm时，用7%乙醇25mL洗脱，弃去洗脱液。再用50%乙醇IOmL洗脱，收集洗脱液，置65C水浴中减压浓缩至干，残渣加30%乙醇ImL使溶解，备用。A.6.3鉴别分析方法：照薄层色谱法（中华人民共和国药典2020年版四部0511）试验，分别吸取供试品溶液与对照品溶液各3L,分别点于同一高效硅胶G薄层板上，放入薄层板，展开，取出，晾干，喷以苯胺-二苯胺-磷酸的混合溶液，加热至斑点显色清晰，置日光下检视。A.7结果判别供试品溶液色谱中，在与对照品溶液麦芽五糖相应的位置上，不应显示相同颜色的荧光斑点。附录B（规范性附录）5-羟甲基糠醛检验方法B.1一般规定本标准所用试剂和水，在没有注明其他要求时，均指分析纯试剂和GB"6682规定的三级水。实验中所用的溶液在未注明用何种溶剂配制时，均指水溶液。8. 2方法提要本品经10%甲醇溶解后，采用反相高效液相色谱法测定，以内标法计算其中5-羟甲基糠醛的含量。8. 3仪器8. 3.1分析天平：感量为0.01mg和0.0001go8. 3.2紫外-可见分光光度计。8. 3.3高效液相色谱仪：配有紫外检测器。8. 4试剂和耗材8. 4.1乙月青8. 4.2甲酸。8. 4.3甲醇。8. 4.40.45m微孔滤膜（有机相）。8. 4.5对照品鸟昔、5-羟甲基糠醛对照品英文名称、CAS号、分子式和相对分子量见表B.1。表B.1化学对照品（标准品）信息中文名称英文名称CAS号分子式相对分子量鸟背Guanosine118-3C10H3N5O5283.245-羟甲基糠醛5-Hydroxymethyl-2-fur67-47-0CbHeOj126.11aldehydeB. 5色谱条件及系统适用性C. 5.1色谱条件色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂：流动相:乙月青-0.1%甲酸溶液（5：95,vv）,等度洗脱；检测波长：5-羟甲基糠醛检测波长为284nm,鸟昔检测波长为254nm。进样量：10L;流速：1mLminoD. 5.2系统适用性理论板数按鸟昔峰计算应不低于3000oE. 6操作方法F. 6.1对照品溶液的制备取鸟昔对照品适量，精密称定，加10%甲醇制成每ImL含鸟音0.2mg的溶液，摇匀，即得。另取5-羟甲基棣醛对照品适量，加10%甲醇制成每ImL含4g的溶液，作为定位用。G. 6.2供试品溶液的制备取蜂蜜1g,置烧杯中，精密称定，加10%甲醇适量溶解，并分次转移至50mL量瓶中，精密加入鸟背对照品溶液ImL,加10%甲醇至刻度，摇匀，备用。H. 6.3供试品溶液的测定照高效液相色谱法（中华人民共和国药典2020年版四部0512）试验，精密吸取供试品溶液10L注入液相色谱仪，测定；另取鸟背对照品溶液，5-羟甲基糠醛对照品溶液各10l,注入液相色谱仪，测定，用以确定供试品色谱中5-羟甲基糠醛及鸟昔的色谱峰；以鸟背对照品计算含量并乘以校正因子0.340进行校正，即得。I. 7测定结果的计算B.7.1计算公式蜂蜜中5-羟甲基糠醛的含量以质量分数计，数值以表示，按公式（Bl）计算：VV=fxc"lx4s×m×103× IOO %(B.l)式中:W：供试品中5-羟甲基糠醛的质量分数，%；f：为内标法校正因子0.340。c,s:为鸟昔的浓度（IngmL）;V：供试品溶液的稀释体积（mL）；Ax：为供试品的峰面积；Azs：为鸟昔的峰面积；m：供试品的称样量（g）oB. 7.2重复性每个试样取两个平行样进行测定，以算数平均值为测定结果，小数点后保留2位。在重复条件下两次独立测定的结果绝对差值不得超过算数平均值的10%o附录C（规范性附录）蔗糖、麦芽糖、果糖、葡萄糖检验方法C. 1一般规定本标准所用试剂和水，在没有注明其他要求时，均指分析纯试剂和GB/T6682规定的三级水。实验中所用的溶液在未注明用何种溶剂配制时，均指水溶液。D. 2方法提要本品经加入40%乙懵溶解后，最终以反相高效液相色谱法测定，按标准曲线法计算蔗糖、麦芽糖、果糖、葡萄糖含量。果糖与葡萄糖含量比值不得小于1.0C.3仪器C.3.1分析天平：感量为0.01mg和0.0001goC.3.2高效液相色谱仪：配有示差折光检测器.C.4试剂和耗材C.4.1乙晴：色谱纯。C.4.2乙晴。C.4.3C.4.4水。C.4.40.45m微孔滤膜（有机相）。C.4.5对照品蔗糖、麦芽糖、果糖、葡萄糖对照品英文名称、CAS号、分子式和相对分子量见表CJo表C.I化学对照品（标准品）信息中文名称英文名称CAS号分子式相对分子量蔗糖Sucrose57-50-1C2H22O1342.30麦芽糖Maltose6363-53-7C2H22O1H2O360.31果糖Fructose57-48-7CH26180.16葡荷糖D-GlucoseAnhydrous50-99-7CeHizOb180.16C.5色谱条件及系统适用性C.5.1色谱条件色谱柱：以PrevailCarbohyrateES为色谱柱；流动相：乙晴-水（75：25,v/v）,等度洗脱；进样量：15L;流速：1mLmi11oC.5.2系统适用性理论板数按果糖峰计算应不低于2000oC.6操作方法C.6.1对照品溶液的制备分别精密称取果糖对照品1.0g,葡萄糖对照品08g,置同一具塞锥形瓶中，精密加入40%乙懵20mL,溶解，摇匀，作为果糖、葡萄糖对照品储备液。另精密称取蔗糖对照品0.2g,麦芽糖对照品0.2g,置同一具塞锥形瓶中，精密加入40%乙懵IOmL,溶解,摇匀，作为蔗糖、麦芽糖对照品储备液。C.6.2标准曲线的制备分别精密量取果糖、葡萄糖对照品储备液和蔗糖、麦芽糖对照品储备液，加40%乙睛配成不同浓度的果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖混合对照品溶液。每一浓度溶液配制中，储备液的用量和稀释体积见表C.2。精密吸取混合对照品溶液各15L,注入液相色谱仪，分别测定。以对照品浓度为横坐标，以峰面积值为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。表C.2对照品储备液的用量和稀释体积信息序号果糖、葡萄糖蔗糖、麦芽糖稀释体积混合对照品溶液浓度（mgmL）对照品储备液体积（mL）(mL)果糖葡萄糖蔗糖麦芽糖11.00.12551080.50.523.00.51015121.01.032.00.5520162.02.045.02.01025204.04.053.01.5530246.06.0C.6.3供试品溶液的制备取本品约1g,精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入40%乙月青20mL,溶解，摇匀,滤过，经0.45m滤膜（C.4.4）滤过，取续滤液，即得。C.6.3供试品溶液的测定照高效液相色谱法（中华人民共和国药典2020年版四部0512）试验，精密量取供试品溶液15L,注入高效液相色谱仪，测定，按标准曲线法计算蔗糖、麦芽糖、果糖、葡萄糖含量。C.7测定结果的计算C.7.1计算公式蜂蜜中蔗糖、麦芽糖、果糖、葡萄糖含量以质量分数计，数值以表示，按公式（C.1）计算：m1×V1m2×½z×106× IOO %(C.I)式中:W：供试品中各待测成分（蔗糖、麦芽糖、果糖、葡萄糖）的质量分数（）；m1:从标准曲线上查得供试品溶液中各待测成分（蔗糖、麦芽糖、果糖、葡萄糖）的含量（mg）：K1:供试品溶液的稀释体积（mL）；m2:供试品的称样量（g）；V2:供试品进样体积（L）oC.7.2重复性每个试样取两个平行样进行测定，以算数平均值为测定结果，小数点后保留2位。在重复条件下两次独立测定的结果绝对差值不得超过算数平均值的10%o
