猴B病毒酶联免疫分析试剂盒使用说明书.docx

猴B病毒酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。96T药品名称：通用名：猴B病毒酶联免疫分析试剂盒使用目的：本试剂盒定性测定猴血液、或其它相关组织中B病毒的表达实验原理：本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫法（ELISA）测定标本中猴B病毒。用纯化的B病毒抗体包被微孔板，制成固相抗体，可与样品中B病毒相结合，经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后再与HRP标记的B病毒抗体结合，形成抗体.抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），与CUToFF值相比较，从而判定标本中猴B病毒的存在与否。试剂盒组成：130倍浓缩洗涤液20mlXl瓶7终止液6ml×1瓶2防标试剂6mlXl/瓶8阳性对照0.5ml×1瓶3前标包被板12孔X8条9阴性对照0.5ml×1瓶4样品稀释液6mlXl瓶IO说明书1份5显色剂A液6mlXl瓶11封板膜2张6显色剂B液6mlXl瓶12密封袋1个标本要求:1 .标本处理：血清、血浆标本可直接检测2 .标本按要求制备后尽早进行实验。如不能及时检测，可将标本在-20C保存一个月，但应避免反复冻融。3 .不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤：1 .编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）2 .加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照（标准品）50L然后在待测样品孔先加样品稀释液40l,然后再加待测样品10l。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，3 .温育：用封板膜封板后置37温育30分钟。4 .配液：将30倍浓缩洗涤液加蒸锵水至600ml后备用5 .洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6 .加酶：每孔加入酶标试剂50l,空白孔除外。7 .温育：操作同3。8 .洗涤：操作同5。9 .显色：每孔先加入显色剂A50l,再加入显色剂B5Ol,轻轻震荡混匀，37避光显色15分钟10 .终止：每孔加终止液50l,终止反应（此时蓝色立转黄色）。11 .测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。结果判定：试验有效性：阳性对照孔平均值Nl.00;阴性对照平均值0.15临界值（CUTOFF）计算：临界值=阴性对照孔平均值+0.15阴性判定：样品OD值<临界值（CUToFF）者为猴B病毒阴性阳性判定：样品OD值N临界值（CUTOFF）者为猴B病毒阳性注意事项1 .操作严格按照说明书进行，本试剂不同批号组分不得混用。2 .试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。3 .浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。4 .封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。5 .底物请避光保存。6 .试验结果判定必须以酶标仪读数为准，使用双波长检测时，参考波长为630nm7 .所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为2M的硫酸，使用时必须注意安全。保存条件及有效期1.试剂盒保存：；2-8C<,2.有效期：6个月