慢加急性肝衰竭动物模型研究现状.docx

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1、I:10.12449JCH240131慢加急性肝衰竭动物模型研究现状刘韦，白浪四川大学华西医院感染性疾病中心，成都610041通信作者：白浪,pangbailiang(C)ReID:0000-0001-5042-4336)摘要：慢加急性肝衰竭病情复杂、进展快、病死率高，其发病机制、病因等仍有待进一步研究阐明,而通过慢加急性肝衰竭动物模型的建立，不仅能为慢加急性肝衰竭的发病机制研究提供良好的基础，而且能为临床治疗提供实验依据,通过对相关文献的梳理，总结了目前常用的建立慢加急性肝衰竭动物模型的方法，包括CCL联合脂多糖(LPS)/D-氨基半乳源胺法、硫代乙酰胺联合LPS法、血清白蛋白法、胆管结扎术

2、法等.通过分析各种动物模型的特点，为进一步探索更理想的动物模型提供文献基础和实验依据。关键词：肝疾病；慢加急性肝功能衰竭；模型，动物基金项目：四川大学华西医院学科卓越发展L35工程项目(ZYJC21014)Currentresearchstatusofanimalmodelsforacute-on-chronicliverfailure1.IUWei,BAILang.(CenteroflnfectiousDiseases,WestChinaHospital,SichuanUniversity,Chengdu610041,China)Correspondingauthor:BaiLang,pan

3、gbailiang(ORCID:0000-0001-5042-4336)Abstract:Acute-on-chronicliverfailurehascomplexconditions,rapidprogression,andahighmortalityrate,andfurtherstudiesarestillneededtodarifyitspathogenesisandetiology.Theestablishmentofanimalmodelsforacuteon-chronkliverfailurecannotOnIyprovideagoodbasisforexploringthe

4、pathogenesisofacute-onhronicliverfailure,butalsoprovideanexperimentalbasisfordinicaltreatmentThroughaliteraturereview,thisarticlesummarizesthemethodscommonlyusedtoestablishteanimalmodelsofacute-on三4.5mg,条笛寺次剂量，每周2次，共6周。Wang等1加给予WiStar雄性大鼠皮下多点注射4次含有4mg的HSA乳化液0.5mLHSA致敏后，向大鼠尾静脉注射4mgHSA,每周2次，持续6周，导致大鼠肝

5、脏慢性损伤BSA或者HSA法的主要区别在于致敏后静脉注射白蛋白的剂量，HSA法既可采用2.5mg越,逐次i甑。5mg,至45mg后维持该剂量，也可直接采用缙罚惺4mg,而BSA法则多僻从2mg哪,逐次i勖口。5mg,至4mg后瞬劾J量O采用逐次递增剂量的方式可能使大鼠的死亡率降低，提高建模成功率，但对于更好地模拟人类AeLF而言，两者孰优孰劣需要进一步探索.相对于BSA或者HSA诱导肝脏慢性损伤相对繁琐的步骤，Li等127给予雄性WiStar大鼠腹腔曲0.5mL的PS,每周2次，持续11周，建立肝纤维化模型。PS诱导肝脏慢性损伤则更为简便，利于操作，可重复，同时PS法所选择的给药途径为腹腔注射

6、，相对于皮下注射、静脉注射更为安全，成模率高。在急性攻击阶段，BSA法、HSA法和PS法均采用联合使用D-GalN.LPS的方式，但是由于诱导慢性肝损伤的白蛋白种类不同，D-GalN、LPS的给药剂量、给药途径存在差异。其中，BSA法、HSA法可采用相同的急性攻击方式，在大鼠慢性肝损伤的基础上，于第6周末，联合给予腹腔注100gkg的LPS和400mg/kg的D-GalN以诱导急性肝衰竭12426.而通过PS诱导的大鼠，将于11周后给予其静脉注射剂量为50gkg的LPS,30min后再腹腔注射剂量为600mg/kg的D-GalN以诱导急性肝衰竭。综上，BSA法、HSA法和PS法均可成功建立AC

7、LF大鼠模型。目前利用免疫诱导法建立ACLF动物模型的常见造模方式，是HSA法建立的ACLF大鼠模型8】,但其建立的模型死亡率相对较高，为23%291。与BSA和HSA法建立的AeLF大鼠模型相比，PS模型的死亡率更低，更容易操作，同时该模型与人类ACLF更加相似2.4状（bileductligation,BDL）法BDLiiiL胆管使胆汁反流造成肝细胞损伤来诱导肝纤维化。BDL诱导后的大鼠对内毒素敏感性增加，通常使用D-GalN或LPS使大鼠发生急性肝损伤。丛伟。）通过此方法成功建立了ACLF大鼠模型，首先将雄性SD大鼠（体质量250280g）,术前禁食12h,结扎胆总管，4周后可建立胆汁淤

8、积性肝硬化模型.然后取胆管结扎4周后存活的大鼠（已建立胆汁淤积性肝硬化模型）,禁食12h,按1.4g/kg给药剂量配置D-GalN（配置浓度0.20.4gmL）,腹腔注射24h后可诱导肝硬化基础上的急性肝损伤。Tripathi等使用BDL建立ACLF动物模型，首先结?灌性大鼠（200225g）胆总管,诱导继发性胆汁性肝硬化（共28天）。在血流动力学研究前4h,给予肝硬化失代偿期的大鼠腹膜内或静脉内注射1mg/kg的LPS,以建立ACLF大鼠模型。BDL模型可用于模拟人类胆管阻塞而造成的肝损伤，但BDL模型手术复杂，模型较不稳定。3建立ACLF动物模型的挑战与展望综上所述，CCL1联合LPS/D

9、-GalN法、TAA联合LPS法、血清白蛋白法、胆管结扎术法是目前建立ACLF动物模型常用的方法，CCL模型、TAA模型均为化学毒物的损伤，操作简单便利，但对于剂量的选择有一定要求，剂量过大易导致动物死亡，过小则达不到诊断要求.血清蛋白法主要模拟免疫性的肝损伤，模型稳定,可重复.BDL法模拟人类胆管阻塞而造成的肝损伤操作复杂，对动物损伤大，较不稳定。可见，建立ACLF动物模型有多种方法，研究者可以根据具体研究目的选择一种合适的方法。但ACLF的病因、病理机制复杂多样，同时实验动物与人类之间存在异质性，而临床情况更加复杂，将同时或依次出现多种诱发因素和并发症，导致多种疾病和器官衰竭，因此无法准确

10、地模拟人类ACLF发生发展过程131】。ACLF发生于慢性肝病的基础上，通常包括病毒性肝病、酒精性肝病、药物性肝病、自身免疫性肝病等，其病因多种多样，不同病因所致的肝损伤机制各有不同HBV的再激活是亚洲地区ACLF的主要原因，其患病率高，HBV相关的急性慢性肝衰竭占ACLF的70%以上【32341。但是目前所建立的ACLF动物模型，包括可模拟化学毒物性损伤、免疫性肝损伤、胆汁淤积性肝损伤，均无法模拟病毒性肝损伤，因此建立HBV相关的急性慢性肝衰竭动物模型是目前的一大难题和挑战。另外，为建立合适的AeLF动物模型，实验动物的选择也很重要，根据不同的研究目的，选择最适合的动物模型，考虑到啮齿类动物

11、的优势，目前通常选择大鼠或者小鼠作为实验动物。理想的ACLF动物模型应尽量模拟人类的肝损伤发病机制，虽然此过程可通过使用不同药物、毒物或其他有创操作而实现，也可调整给药剂量或其他方式尽可能模拟人类ACLF的死亡率、生存率，但目前由于动物本身与人类之间存在异质性以及外界因素的不可控性，暂时无法完整复制人类ACLFe因此选择更符合人类发病机制的动物、更佳的毒物药物、合适的药物剂量等，需要研究者们进一步探索。利益冲突声明：本文不存在任何利益冲突。作者贡献声明：刘韦起草论文；白浪负责拟定写作思路，论文审阅修改。参考文献：1 BIZH1WANGLX.LlANJO.Definition,prognosti

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