水质 五日生化需氧量（BOD5）的测定 非稀释法和稀释接种法.docx

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1、中华人民共和I3家标准GB/TXXXX-XXXX代替GB/T7488-1987水质五日生化需氧量(BOD5)的测定非稀释法和稀释接种法Waterqua1.ityDeterminationOfBiochemicaIoxygendemandafter5days(BODs)Methodforundi1.utedsamp1.esanddi1.utionandseedingMethod(征求意见稿)200-X-XX实施发布200-X发布国家质量监督检验检疫总局环境保护部前言I1.1适用范围12规范性引用文件13方法原理14试剂和材料25仪器和设备36样品47分析步骤48结果计算59精密度和准确度8前言为

2、更何M中华人民共和国环境保护法B和中华人民共和国水污染防治法,保护环境，保障人体健康,规范水中五日生化需氧盘(IWDs)的监测方法，制定本标准.本标准规定了地表水、工业废水和生活污水中五日生化需乳尿B()的非稀择测定法和稀择接种测定法。本标准的技术内容叁照了水侦生化需氧量非稀择法(ISO5815-2.2003年和水质生化需乳房稀糅接种法(【SO5815-1,2003年)的相关内容.本标准首次发布于1989年，本次为第一次修订，他订的主要内容：一一增加了样品的保存方法：一一修改了试样的制备方法：一一增加了接种液的选择：一一增加了稀郭接种法稀择倍数的确定方法：一一增加了溶解班的测定方法：-补充了检

3、出充的测定和计算方法.自本标准实施之日起,E水原五日生化箭氧t(BoDe的测定稀林与接种法(GBT7488-1987)废止。本标准住I环境保护部科技标准司组织制订.本标准主要起草单位：沈阳市环境监测中心站.本标准自R,。年。月。口起实施，本标准由环境保护部耨择.水质五日生化需氧量(BOD5)的测定三瞄释法和稀释接种法警告：丙培基硫眠属于有毒化合物，操作时应按规定要求保带防护器具，避免接触皮肤和衣服;标准溶液的配制应在通风柜内进行操作；检测后的残渣残液应做妥善的安全处理.I适用范圉本标准班定了地表水、工业庶水和生活污水中近日生化需氧后(BOD5)的非福修和桶铎接种测定方法.本标准适用于地式水、工

4、业废水和生活污水中五日生化需氧Ift(BOD5)的测定，非稀释法可用于测定BOD5的浓度范围为0.5-6mg1.,稀料接种法可用干测定BOd浓度范阚为1.5600Omg也的样品，BoD$浓度大干6000mg/1.的样品,可适当稀样后.川稀择法和稀择接种法测定.2规范性引用文件本标准内容引用了卜列文件中的条款，凡是不注日期的引用文件，其有效版本玷用于本标准,GBT6682-1992分析实验室用水规格和试史方法GB.T7489-1987水质溶解权的测定确依法GB.T11913-1989水质溶解氧的测定电化学探头法3方法原理生化需氧量是指在规定的条件下，微生物分蚱水中存在的某些可氧化的物质，特别是有

5、机物所进行的生物化学过程中消耗的溶解氧.通常脩况下是指水样充满完全密闭的溶料乳瓶中.在2Of1C的暗处培养5天,分别测定培养前后水样中的溶解氧浓度,计算每升样品消耗的溶解领fit.以BoDS形式表示“对不含或少含微生物的_1.业度水，如酸性废水、跋性废水、高温废水、羟过筑化处理的废水或般冷冻保存的废水，在测定BoD,时应进行接种，以引进能分解废水中有机物的微生物.当废水中存在难于被一般生活污水中的微生物以正常的速度降解的有机物或含有剧毒物质时，应将驷化后的微生物引入水样中进行接种.4试剂和材料本标准所用试剂除非另有说明,分析时均使用符合国家标准的分析纯化学试剂.实验用水为符合GB6682-92

6、规定的3级然憎水，且水中钢离子的浓度小于等于0.01ng.1.,不含有氮或S1.胺等物质.4.1 踊酸盐援冲溶液：将8.5g磷酸二氢钾(KH2PO4).21.75g磷酸氢二悌(K2HPO4).33.4g碑酸乳二钠(NsHPO,)利1.7g氯化核(NC1)溶于水中，稀糅至100Oni1.此溶液的pH值为7.2.4.2 硫酸镁溶液：将22.5g七水合硫酸(MgSQ1.-TH2O)落于水中,稀样至100OtnI,此溶液可稳定保存6个月,若发现任何沉淀或微生物生长应弃去.4.3 氟化钙溶液：将27.55g无水氯化眄(Caeh)溶于水中,稀释至10m此溶液可稳定保存6个月，若发现任何沉淀或微生初生长应弃

7、去。4.4 氯化铁溶液：将0.25g六水合氯化铁(FeC1.6kO)溶于水中，林择至KX)Om1.此溶液可梗定保存6个月,若发现任何沉淀或微生物生长应弃去.4.5 丙烯茄崂麻硝化抑SH剂(AT1.D：溶解0.2g丙烯基硫眼(CiHkNjS)于20OmI水中混合，4C保存,此溶液可稔定保存14天.4.6 盐酸溶液(OSmo1.Z1.)1物4Om1.ik1.ft溶液各Im1.混匀，在2OC保存。用曝气装置（5.4）至少曝气1小时,使溶解氧的浓度达到8mg1.以上。在觊气的过程中防止污柒，特别是带入有机物、金尿、负化物和还原物，稀释水中氧的浓度不能过饱和,使用前需井口放置1小时，且应在24小时内使用

8、。余的稀释水血弃去，4.13 接种稀株水根据接种液的来源不同,旬升稀科水（4.12）中加入适量接种液（4.11）：城市生活污水和污水处理厂出水加I-IOmh河水或湖水加IO-100m1.,存放在2O1C的环境中，当天配制当天使用,接种的稀糅水PHtfI为7.2,B（如应小于IJmg11.5仪器和设备本方法使用的玻璃仪器须清洁，无毒性和Ur生化降解的物喷。5.带风扇的恒温培养箱：eoc）.5.2 。4C冷藏箱：样品运输过程中保存样品，53冰箱：有冷冰和冷藏功能.，5.4 曝气装置：多通道空气泵袋置：球气带有有机物、氧化剂和金M导致空气污染,如有污染，空气应过流清洗。55溶解钊能带水封装置的250

9、-3（）Om1.或100-125m1.的玻璃瓶.5.6 52OI.的细门玻嫡瓶.5.7 稀择容器：IO（X）2000m1.的砥筒或带施容M精。5.8 虹吸管：供分取水样或添加稀择水.6样品6.1 采集与保存样品采集并充满溶解就精,在()4C的咯处密封保存,并于24小时内尽快分析.最长可保存48小时：特殊情况下48小时内不能分析,可冷冻保存,可保存13天,冷冻样品分析前需解陈、均质化和接种,尽可能避免冷冻保存样品。6.2 试样的制的6.2.1 样品的中和若样品或稀择后样品PH值不在6-8范的内，应用盐酸(4.6)或氢氧化钠(4.7调节，使其PH值在68的范田内，6.2.2 余翻和结合氯的去除含有

10、少量余氯的水样，一般放置I2个小时，游两氯即可消失.对在短时间内不能消失的余款，可加入亚硫酸钠去除样品中存在的余觌和结合就.取己中和好的水样100m1,加入(1+1)的乙酸IOnII,10%的碘化钾溶液Ini1.混匀。以淀粉为指示剂.用亚硫酸物溶液滴定游离碘.由亚硫酸钠溶液消耗的体积.计W出水样中应加亚硫酸钠溶液的体积.6.2.3 样品均质化含有大量的颗粒勒、需要较大的输择倍数或经冷冰保存的样品测定前需将样品搅拌均质化，6.2.4 样品中有藻类样品中有薇类存在，BOD5的测定结果会偏裔.当分析结果制度要求较高时，测定前应用滤孔为1.6m的灌牌过港,测定报告中注明滤器涉扎的大小“6.2.5 非稀

11、择样品的电导率小于125sm时，需加入适诚的(4.1),(42)、(43)、(4.4)款溶液，使样品的电导率大于125MCm每升样品中至少需加入各种盐的体枳V按公式计算IV=8.7225-0.103(I)式中：V需加入各种盐的体枳，m1.：S样品需要提高的电导率伯，Vcm,.7.1 非稀释法如样M中的有机物含量较少，BOD5的浓僮不大于6mg1.,且样品中有足够的适合微生物.用此法测定.7.1.1 样品的准品浏定前待测样品的沿度达到202C,若样品中溶解氯浓度低,儒要限气15分仲.赶走样M中残用的空气泡和过饱和氧。7.1.2 样品的测定7.1.2.1 碗Ift法测定样品中的溶解氧：按GB748

12、9-1987测定.将样品7.1.1）充满二个溶解氧瓶（5.5）Mb使祥品少餐滥出,防止样品中的溶解氧浓度改受，使瓶中存在的气泡堀瓶里排除，将样品分为：组，每组包括姆个样品中的瓶。将第一组战上航靛，加上水对，在瓶表外双上一层果料膜，防止培养期间水射水蒸发E然后珞粒放入恒温培养箱（5.1）中，在暗处培养5天4小时，15分钟后，测定第：组版中样品在培养前的溶解氧浓度。培养5天后，测定第一组瓶中样品的溶解氧浓度。7.1.2.2 电化学探头法测定样品中的溶解就：按GBrrU913-1989测定.将样品7.1.1）充满一个溶解氧Bi5.5）中,使样品少溢出,防止样品中的溶解氧浓度改变：使瓶中存在的气泡器瓶

13、壁排除.测定培养的样品中的溶解就浓度.施上瓶装，防止样品中残留气泡,加上水封，在瓶盅外累上一层塑料被,防止培养期间水封水蒸发干.将样品瓶放入恒温培养箱5.1）中.在暗处培养5天4小时.分别刈定培养后样品中的溶解氟浓度。7.2 稀拜接种法稀林接种法可分为以下三种情况：非柿糅接种、桶锌和稀糅接种.若样品中的有机物含量较少，BOD,的浓度不大于6mg1.,但样品中无足钙的适合微生物，如酸性废水、做性废水、高温废水或经氯化处理的废水，采用非稀糅接种测定：若样品中的行机物含凝较多，BODS的浓度大于6mg1.,且样品中有足够的适合微生物,罐稀择测定：若样M中的行机物含盘较多.BOD，的浓度大于6mg1.

14、但样品中无足师的适合微生物,需采用稀择接种方法测定.7.2.1 样M的准备7.2.1.1 特测样品待测样品的温度达到2O2C,若样品中溶解氧浓度低，需要糜“I15分钟,赶走样品中残用的气泡：若样品中氧过饱和,将容器2/3体积充满样品,用力振荡赶出过饱和乳，然后根据样M中有机物和微生物含状情况确定测定方法.稀择接种测定,每升样品中加入适瓜的接种液(41I),待测定：稀糕测定，稀糅倍数按次I和我2方法确定，然后用桶择水(4.12)曾择：稀择接种法测定,在稀释水(412)中加入适琉的接种液配制稀释接种水,用来稀择样品.柿糅倍数确定方法如下：样品稀择的程度应使消耗的溶解乳不小于2mg1.,培养后样品中

15、利余溶解氧浓度不小于2mg1.,且样品中轲余的溶解第浓度为开始浓度的I/3-2/3为最佳.当不能准确地选择稀择倍数,一个样品做23个不同的稀科倍数.稀择倍数可根据样品的总有机碳(TOC)、高钻酸盐指数(CODmn)或化学需斜量(COD)的测定的，按照表I列出的BO1.H与总行机碳(TOC)、高隹酸盐指数(CODmn)或化学需氧JA(COD)的比值R(R与样品的类型有关),估计BoDS的期望值,在根据表2中确定稀择因于.表I典型的比位R水的类型总有机碳RC)岛恬酸盐指数R(BOD5CODmn)化学需乳尿R(BODCOD)未处理的废水1.2-2.81.2-150.35-0.65生化处埋的废水0.3

16、-1.00.5-1.2O.2O-O.35由表i中选择适当的R值，按公式(2计算BODJ的期望值:BOD,=R.Y2)式中：y总有机碳(TOC)、而钵酸盐指数(Dmn)或化学需氧埴(COD)的值.由估算出的BODS的期望值，按及2确定样品的稀糅倍数.表2BoDS测定的稀杼倍数BoDS的期望*img1.稀林倍数水样类里6722河水，生沏净化的城市污水10-305河水，生物净化的城市污水20-60IO生物净化的城市污水40-12020澄清的城市污水或轻度污染的工业废水100-30050轻度污染的I：业度水或原城市污水200-600100轻度污染的工业废水或原城市污水400-12()0200包僮污染的

17、业废水或原城市污水1(XX)-3WX)500重发污染的工业味水2(XX)-6(MK)IOno度污染的工业废水按照确定的稀择倍数.将一定体积的样品或处理后的样品用缸吸法加入已加部分稀株水或接种稀择水的林择容器中（5.7.加稀择水或接种稀择水至刻质,轻轻混合避免残留气泡,待测定.若桃泽倍数超过100倍，可进行两步或多步确修。若样品会硝化反应，则生化处理废水每升稀杼样品需加入2m1.丙烯地硫服硝化抑制剂（45）,若样品中有微生物毒性物质，应配制几个不同稀拜倍数的样品，选择与稀择倍数无关的结果，并取其平均值.样品测定结果与林择倍数的关系确定如下：当分析结果精度要求较高或存在葩生物棒性物质时,一个样品要

18、做2个以上不同的稀择倍数.每个样品每个稀择倍数做二瓶样同时进行培养。测定培养过程中每桶样品氧的消耗量，井面出氧消耗早:对短一输择倍数样品中原样品的体枳曲线.空白实脸样品体积为0。若此曲线呈线性,则此样品中不含有任何抑制微生物的物防,即样品的测定结果与稀择倍数无关；若曲线仅在低浓度范树内早.线性，取线性范困内林择比的样品测定结果计算平均BOD,ffi.7.2.1,2空白样品接种测定，每升稀择水中加入马样品相同啾的接种液（4.11）作为空白样品。梅铎测定，空白样品为稀科水（4.12），需要时好开样品加入2m1.丙烯法破眼玷化抑制剂45）.稀糅接种测定，空白样品为接种稀择水（4.13）,必要时加入2

19、m1.丙优基硫麻硝化抑制剂45）.7.2.1.2.1 全程序空白样品每一批样品（最多20个）至少做两个全程序空白,接种法空白样品的结果不能超过13mg1.作接种法空白样品的结果不能超过05mg.1.,则应检查污染源。7.2.1.2.2 运输空白：每采集一批样品，至少带一个运输空白。运输空白为实验用稀择水，同样品同时测定.7.2.1.2.3 平行样品f批样品（出第20个）至少做一对平行样，计算相对百分偏差RP，RP值应不大于10%,计算公式如下：小%）=生幽1.MR幽式中：BODi-第一个样品的BOD5（mg1.）BOD-第二个样品的BOD5（mg1.）相对百分儡差RP的大小与样品的稀择倍数有关

20、。7.2.1.2.4 加标回收每一批样品（最多20个）做一个空白加标和一个基体加标样品.1）空白加标：加标后样M的浓度在26mg1.,W1.收率在90-110%之间.2）基体加标：标准物在样品处理之前加入，添加量应尽量:与样品浓度接近，目不应超过样品浓度的3倍.基体加标网收率不应低于75%.7.2.1.2.5 保证培养后剩余的溶解氧不小于1.mg1.,消耗的溶解氧大于检出限。1.1 .2样品的冽定测定空白样品和待测样品,冽定方法同7217.1.2.2.1.2 .3接种液、椅择水质电的检查每一批样品（G多20个）要求整一个标准样品，样品的配制方法如卜：取20m1.的留械-谷鞅酸标准溶液4.IO）

21、于稀林容器中，用接种稀杯水（4.13）稀和至100OmI,测定BODs,测定结果BOD5,（2IO4O）mgI.范围内,则应检查接种液、林择水的质fit.8结果计卯8.1 非稀择法按公式4）计算样品BoDS的刈定结果：BODKngfD=Ct-C2式中：C1.水样在培养的的溶解氧浓度，mgI.iC2水样在培养后的溶解氧浓度，mg1.8.2 稀柞接种法按公式（5）计算样品的涮定结果：BODS=1.fizHzJzk式中：C1接种柿择水样在培养前的溶解领浓度,mg/1.：C2接种稀择水样在培养后的溶解氧浓度,mg-1.：B1空白样在培养前的溶解氧浓度,mg.1.；B2空白样在培养后的溶解纨浓度.mg/

22、1.：f1.接种稀糅水（或接种液、稀株水）在培养液中所占的比例：G像样品在培养液中所占的比例.BoDS测定结果以氧的mg/1.报出,结果小于100mgI.,保留一位小数：W01000mg1.取整数位；大于100ong1.以科学”数法报出,结果报告中应注明：样品是否经过过泄、冷冰或均质化处理.9精密度和准确度非稀释法实脸室间的重现性标准偏差为0.10029mg1.,相对标准偏差为2.718%,再现性标准偏差为0.260.94mg1.,稀称法和桶株接种法的对比测定结果垂现性标准偏旌为I1.-Bmg1.,再现性标准偏差为3.724mg1.标准样品和实际样品加标回收率分别为97.5%-101%、90.6%-92.9%.标准偏差为0.08%459mg1.,相对标准偏差为1.51%4.82%。