艾滋病实验室标本管理制度.docx

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1、艾滋病实验室标本管理制度（一）、样品的采集和处理1 .血液样本的采集和处理Ll抗凝全血：消毒局部皮肤，用加有抗凝剂（EDTA钠盐或钾盐、枸檬酸钠、肝素）的真空采血管抽取适量静脉血，或用一次性注射器抽取静脉血，转移至加有抗凝剂的试管中，轻轻颠倒混匀10-15次，备用。L2末梢全血：消毒局部皮肤（成人和1岁以上儿童可选择耳垂、中指、无名指或食指，1岁以下儿童采用足跟部）。用采血针刺破皮肤，用无菌纱布擦掉第一滴血。收集滴出的血液，备用。血浆：根据检测需要，选择含适宜抗凝剂的采血管，按照采L3血管说明采集：（1）静脉血，分离血浆；或将采集的抗凝全血15003000rmin离心15分钟，上层即为血浆，吸

2、出置于合适的容器中，备用。（2）血清：根据检测需要，按照采血管说明采集静脉血，分离血清；或用不含抗凝剂的真空采血管抽取适量静脉血,或用一次性注射器抽取静脉血，转移至无抗凝剂或含促凝剂的试管中放置12小时，待血液凝固、血块收缩后再用15003000rmin离心15分钟，吸出血清，置于合适的容器中，备用。(3)淋巴细胞富集液：将采集的抗凝全血15003000rmin离心15分钟，吸取血浆层下的淋巴细胞富集液,置于合适的容器中，备用。(4)外周血单个核细胞(PBMC)：使用淋巴细胞分离液，进行密度梯度离心，吸出PBMC层，置于合适的容器中，备用。1.4抗凝剂的选择：根据检测要求选用适当的抗凝剂，如C

3、D4+和CD8+T淋巴细胞数测定可选用EDTA钾盐或钠盐、枸椽酸钠、肝素(如果血液不用于核酸检测)；艾滋病-1分离、核酸定性/定量检测可选用EDTA钾盐或钠盐或枸檬酸钠。2、样本采集后处理、保存、运输的时限和条件，因不同的检测项目而异，应参见相应检测项目要求。采血完成后的穿刺针头必须丢弃于尖锐危险品容器内，妥善处理，防止发生职业暴露。3、采集样品注意事项(1)采集样品原则上应按临床采血技术规范操作。(2)采集样品时应注意安全，建议采用真空采血管及蝶形针具，以避免直接接触血液；直接接触艾滋病感染者/艾滋病(AIDS)病人血液/体液的操作，应戴双层手套。(3)所有的血液、血清、未固定的组织和组织液

4、样品，均应视为有潜在传染性，都应以安全的方式进行操作。(4)应像操作未知传染风险样品一样，小心存放、拿取和使用所有可能有传染性的质量控制和参考物质。用后的包裹应进行消毒。(5)采血时一定要注意安全，采血用一次性注射器，谨慎操作，防止发生刺伤皮肤和造成外界污染。(6)离心机要使用密闭的罐和密封头，以防液体溢出或在超/高速离心时形成气溶胶。(二)样品的保存(1)用于抗体和抗原检测的血清或血浆样本，短期(1周)内进行检测的可存放于28t,一周以上应存放于-20。C以下。(2)用于核酸检测的血浆和血细胞样本，4天内进行检测的可存放于2-8：3个月以内应存放于-20。C以下；3个月以上应置于-70。C以

5、下保存。(3)用于CD4+T淋巴细胞检测的全血样本，室温保存，时间不超过48小时。如果用CD45设门，样本保存不超过72小时。(4)筛查结果为阳性的样本应及时进行补充试验；筛查结果为阴性的样本，可根据具体需要决定保存时间，建议至少保存1个月。艾滋病检测确证实验室收到的筛查阳性样本，无论补充试验结果如何，均应保存剩余样本，保存时间根据需要确定，建议至少保存3年，特殊用途或专项项目的样本根据具体要求确定保存时间。补充试验结果为阳性的样本按照国家生物样本管理的有关规定执行。(三)样品的运送1、全血、血浆的运送应符合生物安全要求，参照可感染人类的高致病性病原微生物菌(毒)种或样本运输管理规定(卫健委第

6、45号令，2006年2月1日执行)。2、血液样本运送时应采用三层容器对样本进行包装，随样本应附有与样本唯一性编码相对应的送检单。送检单应标明受检者姓名、样本种类等信息，并应放置在第二层和第三层容器之间。(1)第一层容器：直接装样本，应防渗漏。样本应置于带盖的试管内，试管上应有明显的标记，标明样本的唯一性编码或受检者姓名、种类和采集时间。在试管的周围应垫有缓冲吸水材料，以免碰碎。(2)第二层容器：容纳并保护第一层容器，可以装若干个第一层容器。要求不易破碎、带盖、防渗漏、容器的材料要易于消毒处理。(3)第三层容器：容纳并保护第二层容器的运输用外层包装箱。外面要贴上醒目的标签，注明数量、收样和发件人

7、及联系方式，同时要注明“小心轻放、防止日晒、小心水浸、防止重压、禁止倒立”等字样，还应易于消毒。3、用于抗体检测的血清和血浆样本应在冻存条件下运送。用于CD4+和CD8+T淋巴细胞测定的样本应在室温下（1825。C）运送。用于病毒载量检测的样本应在-20。C以下运输。干血斑和尿液样本应在室温下（1825。C）运送,可通过邮寄方式运送。血液制品样本的运送按照血液制品有关使用说明执行。4、运送样本必须有记录。（四）样本接收和拒收标准1、含有感染性样品的包裹必须在具有处理感染源设备的实验室内由经过培训的、穿戴防护衣的工作人员打开，用后的包裹应进行消毒。2、核对样品与送检单，认真核对标本上病人姓名、年

8、龄、性别、病区、床号、住院号是否与申请单符合。检查样品管有无破损和溢漏，如发现溢漏应立即将尚存留的样品移出，对样品管和盛器消毒，同时报告有关领导和专家。3、检查样品的状况，观察标本的量、标本类型、是否抗凝或有小凝块样品，记录有无严重溶血、微生物污染、血脂过多以及黄疸等情况，判断标本是否符合检验要求。如果污染过重或者认为样品不能被接受，则应将样品安全废弃。并要将样品情况立即通知送样人。4、打开标本容器时要小心，以防内容物泼溅。样品处理时若内容物有可能溅出，则应在生物安全柜中戴手套进行。同时应戴口罩、防护眼镜，以防皮肤或黏膜污染。5、因特殊临床治疗导致自发荧光的样品不可用于荧光方法测试。6、接收样

9、品时应规范填写样品接收单。7、不符要求的标本，必须及时填写退回理由单，及时通知送样人，说明情况，重新留取。不符合要求的标本与可疑含有感染性样品用后的包裹同检验后的标本一样进行消毒或无害化处理后废弃。（五）标本检测1、离心机要使用密闭的罐和密封头，以防液体溢出或在超/高速离心时形成气溶胶。复核标本接收过程中的每一步骤，在检测过程中，应严格按照标准化操作规程。2、在标本足够的情况下，不能浪费、随意丢弃或损坏标本。应像操作未知传染风险样品一样，小心存放、拿取和使用所有可能有传染性的质量控制和参考物质。用后的包裹应进行消毒（六）标本处理检验标本先用含23gL有效氯消毒剂浸泡半小时，再用高压锅高压消毒。然后用双层专用黄色医用垃圾袋专人收集所有废弃医用垃圾。送专门存放医用垃圾处统一焚化处理。