尿液化学检验.ppt
《尿液化学检验.ppt》由会员分享,可在线阅读,更多相关《尿液化学检验.ppt(102页珍藏版)》请在课桌文档上搜索。
1、尿液化学检验,Chemical examination of urine,2.pH试纸法:,1.试带法:,模块有甲基红(pH4.6-6.2),溴麝香草酚蓝(pH6.0-7.6).变色范围:黄5.0-绿7.0-蓝9.0,仪器或肉眼判读,多种混合指示剂(棕红色-深黑色),与标准色板比较。,(一)测定原理,一、尿酸碱度测定(urine acidity),3.指示剂法:,5.pH计法:,4.滴定法:,0.4g/L溴麝香草酚蓝滴于尿液黄-酸性,绿-中性,蓝-碱性.受黄疸尿及血尿的影响.,pH电极.精确度较高,需仪器,烦琐,少用.,标准NaOH滴定,测总酸度.复杂,少用,(一)测定原理,一、尿酸碱度测定(
2、urine acidity),(二)尿酸度测定的方法学评价,标本新鲜;操作规范;试带保存;试剂配制标准;pH计校准.,(三)质量保证,一、尿酸碱度测定(urine acidity),正常饮食晨尿pH:5.56.5,平均6.0;随机尿pH:4.68.0;可滴定酸度:2040mmol/24h尿,(四)参考值,一、尿酸碱度测定(urine acidity),(1)生理变化:食物影响:蛋白类酸性;果蔬类碱性.碱潮:餐后胃酸,肾泌H+,Cl-重吸收 尿pH一过性.生理活动:运动,饥饿,出汗,应急,夜间入睡呼吸 变慢体内酸性代谢产物pH.,(五)临床意义,一、尿酸碱度测定(urine acidity),(
3、2)病理变化:酸性尿:酸中毒,高热,慢性肾炎,白血病,糖尿病酮症酸中毒,低钾血症,痛风碱性尿:碱中毒,呕吐,尿路感染,型肾 小管性酸中毒,原发性醛固酮增多症,一、尿酸碱度测定(urine acidity),(五)临床意义,(3)药物影响:NaHCO3,K2CO3,枸橼酸钠碱化尿液防止酸性结晶(尿酸及胱氨酸)形成;促进酸性药物排泄.氯化钙(铵、钾)、稀盐酸酸化尿液防止碱性结晶(磷/碳/草酸钙)形成;促进碱性药物排泄;预防细菌生长.溶血时口服NaHCO3碱化尿液促进溶解及排泄Hb.,一、尿酸碱度测定(urine acidity),(五)临床意义,表5-6 常见影响尿液pH的因素,表5-6 常见影响
4、尿液pH的因素,二、尿液蛋白质检查,健康人尿液中蛋白含量很少,定性为阴性。,尿液中蛋白质含量150mg/24h或尿中蛋白质浓度100mg/L蛋白定性为阳性,即 proteinuria.,1.蛋白尿(proteinuria,PRO),(一)概述,二、尿液蛋白质检查,2.蛋白尿形成的原因,(1)肾小球滤过膜破坏或电荷屏障改变,(2)肾小管重吸收障碍,(3)溢出性,(4)肾组织性,(一)概述,【原理】指示剂的蛋白质误差原理 溴酚蓝阴离子,(1)干化学试带法,【评价】,肉眼和仪器;对清蛋白灵敏(70-100mg/L),与Hb/Mb/BJP基本不反应;简便快速,易标准化,应用普遍。健康普查、肾病筛查。,
5、pH3.2,pro+复合物(淡黄绿色兰色),(二)尿蛋白定性检查,1.测定原理与评价,表5-7 试带法检测的干扰因素及评价,(二)尿蛋白定性检查,【评价】,(2)磺基水杨酸法,【原理】pro+磺基水杨酸根-不溶性蛋白沉淀,简便快速,灵敏度高0.05-0.1g/L;与清/球/本周蛋白反应;假阳性。干化学法的参考方法,NCCLS推荐的 确证实验。,H+,(二)尿蛋白定性检查,1.测定原理与评价,1,尿2-3ml+试剂0.1ml,立即混匀,1min内观察结果.,(2)磺基水杨酸法,【干扰因素】,(二)尿蛋白定性检查,1.测定原理与评价,阴性():不浑浊微量():轻微浑浊,PRO约0.1-0.15g/
6、L弱阳性():明显白雾状,PRO约0.2-0.5g/L阳性(2):浑浊,明显颗粒,PRO约0.6-2.0g/L强阳性(3):大量絮片沉淀,浑浊,PRO约2-5g/L最强阳性(4):凝块,大量絮片沉淀,PRO5g/L,(3)加热乙酸法,【原理】加热PRO变性凝固,加酸pH接近PRO等电点;溶解碱性盐类结晶.,【评价】,(二)尿蛋白定性检查,特异性高,干扰少,灵敏度0.15g/L;与所有蛋白发生沉淀反应。经典准确的、定性的确证实验.,1.测定原理与评价,(3)加热乙酸法,【干扰因素】,(二)尿蛋白定性检查,1.测定原理与评价,定性:阴性,2.参考值,干化学测定尿蛋白原理,R-CH,NH2,COOH
7、,H+,R-CH,NH3+,COOH,+,指示剂,显色,指示剂蛋白误差原理,pH 3.6,(二)尿蛋白定性检查,(1)检测前:患者正常饮食;,(2)检测中:室内质控;阳性及阴性对照。试带法:按规程操作,浸渍时间适宜;阴凉 干燥;有效期。加热乙酸法:盐类浑浊假阳性;遵循加热-加酸-再加热;5%乙酸为尿液的1/10.加热乙酸法和磺基水杨酸法:调尿液pH为5-6,3.质量保证,(二)尿蛋白定性检查,(3)检测后:报告审核;结果与临床不符,分析原因,(1)加热乙酸法:加酸要合适;无盐或低盐饮食,先加12滴饱和NaCL;PRO极少时,加酸后出现沉淀。,(2)磺基水杨酸法:尿液浑浊,应先离心或过滤;强碱性
8、尿加5%乙酸数滴;碘造影剂、青霉素及尿酸或尿酸盐假阳性。,(3)干化学法:尿液新鲜 超大剂量青霉素假阴性。,3.质量控制,(二)尿蛋白定性检查,(1)沉淀法,【原理】pro+生物碱沉淀物,【评价】,(三)尿蛋白定量检查,费时、准确性差,已淘汰,H+,1.测定方法与评价,【评价】,(2)双缩脲比色法,【原理】钨酸沉淀蛋白质,双缩脲法定量。,蛋白质定量的经典方法。,(三)尿蛋白定量检查,1.测定方法与评价,【原理】,(3)染料结合法,【评价】,后两种灵敏高,简便快速,呈色稳定,干扰少,但易污染。第一种烦琐,沉淀不完全-影响结果。,(三)尿蛋白定量检查,1.测定方法与评价,蓝色(600nm比色),【
9、原理】单克隆抗体技术,(4)免疫法,【评价】,定量:0.15g/24h 0.1g/L,灵敏度和特异性更高,临床普遍应用,【原理】SDS-PAGE、琼脂糖电泳,(5)电泳法,【评价】,灵敏度和特异性更高,(三)尿蛋白定量检查,1.测定方法与评价,2.参考值,(三)尿蛋白定量检查,定量:0.15g/24h 0.1g/L,2.参考值,(1)结合灵敏度和线性范围选择方法;,(2)离心取上清,(3)冷藏保存,(4)更换试剂重做标准曲线,3.质量控制,(三)尿蛋白定量检查,(1)生理性 蛋白尿,功能性,(2)病理性 蛋白尿,肾后性,肾 性,肾小球性:肾小管性:混合性:,溢出性:,肾前性,体位性,偶然性:血
10、、脓、粘液,Alb,2、1-M,Alb、2-M,Hb,Mb,BJP,TH糖蛋白,+;0.5g/24h;青少年,+,卧床后(-);青少年,(三)尿蛋白定量检查,4.临床意义,组织性:,蛋白尿的选择性,肾小球滤过膜损伤程度及尿中蛋白组分不同:,选择性蛋白尿:,非选择性蛋白尿:,MW49万,Alb,Tf;AT,前Alb.3+4+;3.5g/24h;肾病综合症.,MW9万,Ig(G,A,M),C3;Alb,T-H.1+4+;0.53.0g/24h.持续肾衰;原/继发肾小球疾病.,(三)尿蛋白定量检查,肾小球性:肾小球肾炎+,很少+;肾小管性:+,很少+.混合性性:肾病综合征+.组织性:+,很少+.,(
11、三)尿蛋白定量检查,三、尿液葡萄糖检查,正常人尿内含糖量极少,0.565.0mmol/24h,定性试验阴性。,糖尿(glucosuria,GLU),血糖8.88mmol/L,肾糖阈值,或近端肾小管重吸收功能障碍时尿糖,定性试验阳性的尿液.,(1)试带法,【原理】葡萄糖+H2O 葡萄糖氧化酶 葡萄糖酸内酯+H2O2 H2O2+色素原 过氧化物酶 有色物质+H2O,(glucose oxidase-peroxidase method),【评价】,特异性强,灵敏度高(1.672.78mmol/L 弱阳性),简便快速,自动分析.,1.测定方法与评价,(一)尿糖定性检查,(1)干化学试带法,【干扰因素】
12、,葡萄糖氧化酶试带法,1.测定方法与评价,(一)尿糖定性检查,(2)班氏法(Benedict法),【原理】Cu2+-Cu+兰色 黄色至砖红色.,【评价】,缺乏特异性,灵敏度低(8.33mmol/L弱阳性),-CHO,OH,1.测定方法与评价,班氏试剂1ml,煮沸不变色+尿2滴煮沸1-2min 冷却后观察.,(一)尿糖定性检查,(2)班氏法(Benedict法),【干扰因素】,1.测定方法与评价,(一)尿糖定性检查,(3)薄层层析法(thin-layer chromatography,TLC),【评价】,鉴别、确证尿糖种类的特异、灵敏的方法;操作烦琐,很少应用。,(一)尿糖定性检查,1.测定方法
13、与评价,【原理】,吸附剂作固定相;有机溶剂作流动相;两相间作相对移动。各组分流动相固定相反复吸附-解析-亲和作用展开分离。,比移值(Rf)=斑点距离/溶剂距离,假阳性多,(1)检验前:,(2)检测中:,容器清洁,不含氧化性物质;一次性尿杯.消除VitC干扰:尿液煮沸几分钟.,(3)检测后:,报告审核,结果不符查找原因;与临床沟通.,2.质量控制,(一)尿糖定性检查,室内质控.试带法注意反应时间和温度;阴凉干燥,保质期.班式法遵守操作规程,注意判读时间.,定性:阴性,3.参考值,(1)检验前质量控制,(2)试带法:,试带避光干燥保存;VitC,高SG尿,酮尿,左旋多巴假阴性;尿液污染过氧化物或次
14、氯酸盐假阳性.,(3)班氏法:,VitC,青/链霉素,头孢菌素水杨酸盐,氨苄西林假阳性;大量铵盐,预先加碱煮沸去氨后再检验;PRO0.5g/L,加热乙酸法去蛋白取滤液检验;大量尿酸盐绿色浑浊灰蓝色;,2.质量控制,(一)尿糖定性检查,【测定方法】,葡萄糖氧化酶法,己糖激酶法,(二)尿糖定量检查,【评价】,测血糖方法。药物和尿液中的自然物质对己糖激酶法几乎无干扰;对葡萄糖氧化酶法有不同程度的干扰。,2.参考值:,0.565.0 mmol/L,1.测定方法与评价,非葡萄糖尿,葡萄糖尿,血糖增高性糖尿,血糖正常性糖尿-肾性,糖尿病-代谢性内分泌性糖尿饮食性糖尿应激性糖尿饥饿-糖耐量糖尿,糖尿,乳糖尿
15、:,半乳糖尿,果糖尿,肝功障碍,哺乳期,(三)临床意义,暂时性,(胰岛素分泌不足),饥饿-糖耐量糖尿:见于晚期食道肿瘤、低营养状态和妊娠剧吐者 做糖耐量试验。,表5-10 内分泌性糖尿常见原因及检查结果,表5-11 血糖正常性糖尿常见原因及检查结果,后天获得性肾性糖尿:慢性肾盂肾炎、药物中毒、肾病综合症,血糖的来源与去路,单糖,转化,四、尿液酮体定性检查,-羟丁酸78%乙酰乙酸20%丙酮2%,脑,心脏,肌肉,1.酮体(ketone bodies,KET),尿酮体定性为阳性,即ketonuria.,正常血浆含量 24mg/L,正常24h尿含量:乙酰乙酸25mg,-羟丁酸9mg,丙酮3mg,(2)
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 尿液 化学 检验
链接地址:https://www.desk33.com/p-229500.html