人民医院呼吸科临床技术操作规范2023版.docx
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1、呼吸科临床技术操作规范2023版人民医院医院资料仅供参考第1章痰和呼吸道分泌物标本检查.第一节微生物学第二节痰液细胞学检查第2章诱导痰的方法第3章胸膜腔穿剌术第4章胸腔抽气术第5章胸腔闭式引流术第6章经胸壁针剌胸膜活体检查术第7章胸腔镜检查术第8章纤维支气管镜检查术第一节常规纤维支气管镜检查第二节经支气管镜肺活检术第三节经支气管针吸活检第9章支气管肺泡灌洗技术第10章肺功能测定第一节肺容积第二节通气功能第三节最大呼气流量-容积曲线第四节呼气高峰流量第五节气道阻力第六节肺弥散功能测定.第七节心肺功能运动冢验第八节呼吸肌功能测定第11章支气管激发试验第一节乙酰甲胆碱、组胺吸入激发试验第二节运动激发
2、试验第12章支气管舒张试验第13章睡眠呼吸监测第14章动脉血气分析第15章经胸壁针刺肺活检第16章过敏原皮肤试验第17章呼吸骤停复苏技术第18章人工气道的建立第19章常规机械通气第2O章无创性正压机械通气第21章痰液体位引流第22章气溶胶疗法第1章痰和呼吸道分泌物标本检查第一节微生物学【概述】痰括本采集方便,无创伤性,临床应用广泛,对病原学诊断具有重要价值。痰标本的正确采集、处理是临床细菌检验成功的关键,标本采集与处理的规范化是准确、及时向临床提供重要的感染信息的基础。目前咳痰标本仍是最常用、最简单的采样方法,必须指导或辅助患者深咳痰,及时送检,并通过镜检筛选合格标本。损伤性莱样技木仅在选择病
3、例(抗生素治疗反应不佳;可疑特殊病原体感染,如寄生虫、痰菌阴性肺结核、混合感染或二重感染等)使用。【操作方法】1.咳痰标本采集要求患者在清晨用药前留取,因为晨痰量多,且含菌量也多。留取前刷牙,用清水漱口3次,以除去口腔内大部分杂菌,之后用力咳痰。咳痰较困难者可用3%5%氯化钠溶液雾化蒸气吸入进行导痰;对咳嗽乏力或昏迷患者,可用普通吸痰管经鼻腔或口腔吸引下呼吸道分泌物;对不能咳痰的婴幼儿或病重患者,如须采集痰标本做结核杆菌培养,可插胃管抽吸胃液标本送检,也可留取1224h痰液,经漂浮浓集后检查,以提高结核杆菌检出率。若做细菌或真菌培养,痰液必须盛于无菌容器内送检。观察痰量应留取24h痰液,必要时
4、在容器内加人央许防腐剂。2 .咽拭子采样上呼吸道感染,可通过咽拭子获取标本。标本采集前数小时内不得用消毒药物漱口或涂抹病灶局部。用咽拭子采集标本时应小心、认真、准确,避免触及舌、口腔黏膜和唾液,以防污染。如咽拭子标本发现致病菌,如肺炎链球菌、流感杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌等,且数量较多时、提示有该菌所致感染存在,3 .纤维支气管镜抽吸采样以利多卡因做咽喉部局部麻醉后,插入纤维支气管镜(纤支镜),达到肺炎病灶引流支气管内,纤支镜吸引口依次连接标本采集瓶或试管及负压吸引装置,用负压将下呼吸道分泌物经纤支镜吸入标本采集瓶内送检。气管切开或气管插管患者也可用普通无菌吸痰管直接经人工气道插至大约
5、叶支气管水平,接负BE装置将痰液经吸痰管吸入标本采集瓶内。纤支镜直视下可准确采集病灶部位的分泌物,但插入时纤支镜顶端和内孔常受咽喉部正常菌群污染,所以纤支镜吸引物常规培养结果不能完全代表肺部感染的病原体、但检查过程中如注意规范化操作,插入纤支镜时尽量不做上呼吸道分泌物吸引,纤支镜吸痰遭口咽部细菌污染机会较咳痰明显减少。一般认为纤支镜吸引物定盘培养可更有效地区分污染菌与感染菌。人工气道是肺部感染的常见易感因素。经人工气道吸引下呼吸道分泌物是目前临床较常用的标本采集方法。但由于这些患者的气管纤毛黏液防御机制受到损害,大气道常有致病菌或条件致病菌定植而不再保持无菌状态,故建立人工气道患者肺部感染病原
6、学诊断有时更为困难。通常认为吸引物定量培养可能区分污染菌抑或感染菌。根据国内诊断标准,经人工气道吸痰细菌浓度1X105cfum1.可认为是感染病原菌,而浓度V1.XIOCfU/m1.则认为是污染菌。4 .防污染标本毛刷采样防污染标本毛刷(protectedspecimenbrush,PSB)一般经纤支镜采样,咽喉部由利多卡因局部麻醉,纤支镜插入至肺炎病灶引流支气管腔内,插入过程尽量不做吸引或向腔内注射黏膜麻醉药。PSB经纤支镜插入并超越前端1.2cm,伸出内套管顶去聚乙二醇塞,越过外套管约2cm,随后将毛刷仲出内套管23cm刷取分泌物。毛刷、内套管顺序依次退回外套管内,然后拔出整个PSB。PS
7、B亦可经人工气道其至直接经鼻腔插入采样,PSB插入前先在体外测量校度,估计PSB插至总支气管或叶支气管水时采样为宜。PSB经人工气道采集过程,.基本与经纤支镜采样相同。采样后的PSB用乙醇(酒精)消毒外套管,以无菌剪刀剪去内、外套管顶端部分,然后,前伸毛刷并将其剪下至装有无菌等渗氯化钠液或乳酸林格液的试管内,彻底振荡使毛刷上的病菌洗涤混匀于液体中,送检做定量细菌和真菌培养。此操作相对简单,创伤轻微。有报道其特异性和敏感性分别达86%和89%.有学者认为防污染标本刷取样应深人,且多方向旋转及上下移动,可提高培养的敏感性。5 .支气管肺泡灌洗术(bronchoa1.veo1.ar1.avageBA
8、1.)采样采用塑料导管,在近顶端处设置气囊,纤支镜插入病灶引流支气管后,引人导管并楔人段支气管然后用等渗氯化钠液2050m1.分次注人,并立即用低负压吸引回收,弃去首次灌洗液,以减少污染,收集以后回收的支气管肺泡灌洗液(broneboa1.ve。IarIaVagef1.u-ide.BA1.F)送检。如果采用这种带气囊导管,在嵌人段支气管后,注气使气囊膨胀填塞气道。在局麻下施行BA1.时,麻醉药不能直接滴人灌洗的肺段,否则会抑制培养基中的细菌生长。BA1.应在胸片显示的浸润K或支气管镜检见宥脓性分泌物的肺段进行。获取标本后,应尽快处理,以免被污染或使厌氧菌死亡。对于建人工气道患者,可采用不经纤支
9、镜的保护性支气管肺泡灌洗(PreVentbronchoa1.ve-o1.ar1.avage,PBA1.)BA1.是一种诊断下呼吸道机会性感染的敏感方法,尤其适用于伴有免疫缺陷和免疫损伤者,其最理想的适应证是疑有肺部感染而用其他非创伤性检查方法不能明确病原学诊断者。BA1.是诊断肺部寄生虫感染的最有效的方法,若BA1.F中有阳性发现则可诊断为寄生虫感染。BA1.诊断获得性免疫缺陷综合征(艾滋病)患者中卡氏肺抱子虫肺炎的敏感性为85%90%o如从患者的BA1.F中分离出较高浓度真菌,则应高度怀疑肺部真菌感染。一些研究表明,若BA1.F中发现有病毒生长,也可诊断为肺部病毒感染。BA1.也可用于诊断细
10、菌性肺炎,如在患者的BA1.F中分离出结核杆菌和军团雷,具有确诊价值。BA1.F的半定量培养对细菌性肺炎的诊断意义较大,但BA1.F也可被口咽部分泌物污染,检查及评价结果时均应予以注意。BA1.并发症罕见,偶可致呼吸衰竭、肺炎、气胸、咯血等。与肺活检相比,相对安全。【注意事项】1.标本的运送与保存痰标本采集后应立即送检,争取在20min内送到细菌实验室。痰液室温下延搁25h会降低肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、卡他莫拉菌和葡萄球菌的检出率,而定植于上呼吸道的非致病菌和革兰阴性杆菌会过度生长。另外,细菌室收到标本后应立即进行标本的质量检查、处理及培养接种,如不能立即进行检查,则应暂时放于冰箱中,冰箱中
11、存放的标本应在24h以内进行检查。2.标本的质量检查虽然部分痰标本通过肉眼观察其外观如黏液和脓性成分,可大致了解受检标本的质量,但仅凭此点尚嫌不足,研究发现,痰涂片革兰染色做细胞学检查判断痰标本受污染程度是一种较为可靠的方法。一般认为,来自下呼吸道的合格的痰标本应是含白细胞和支气管柱状上皮细胞较多;而受唾液污染严重的不合格标本则来自颊黏膜的扁平鳞状上皮细胞较多。痰标本在培养之前首先必须对其质量进行估评,其方法是做涂片,用革兰染色镜检。在显微镜(IOX1.O)下观察白细胞和扁平上皮细胞存在的情况,每低倍光镜视野痰鳞状上皮细胞25个时,不管白细胞数量如何,均可视为不合格标本6目前,一般主张痰直接涂
12、片光镜检查每低倍视野鳞状上皮细胞V10个、白细胞25个,或鳞状上皮细胞:内细胞V1.:2.5,可做污染相对较少的“合格”标本接种培养。在粒细胞缺乏者不宜用单纯白细胞数作为评价指标,而应以涂片中见到柱状上皮细胞或锥状上皮细胞与白细胞并存为合格标本指标。3.标本接种前处理(1)标本的洗净:由于痰中含有正常菌群影响病原菌的检出,采用以下方法可以减少正常菌群。将痰液加入含有1520m1.灭菌的生理盐水的试管中,剧烈振荡5-10s,然后用接种环将沉淀于管底的脓痰小片沾出,再放人一个试管内,以同样的方法反复2次,最后将剩余的脓痰接种于培养基上。(2)标本均质化:痰均质化以胰酶均质化为多见。其方法为向痰液内
13、加人等量的PH为7.6的10%胰酶溶液,放置37摄氏度40分钟,即能使痰均质化,而对细菌培养无较大影响。标本消化-去污染处理法:此方法的标本用于结核杆菌培养。方法是将二硫苏糖醇与痰液等量置离心管内,搅拌后剧烈振荡,再静止15min,加人无菌、浓度0.067mo1./1.pH为6.8的磷酸盐缓冲液至离心管口12Cm处,关紧盖,颠倒至少3次,3OOOrmin离心ISmin,保留沉淀物,用火焰通过管口,加人1.2m1.的20g1.牛血清清蛋白(白蛋白)溶液,以手摇混合,用此沉淀物制涂片并接种培养基。第二节痰液细胞学检查【概述】痰脱落细胞学检查是诊断某些呼吸系统疾病的重要方法。方法简便,旦不给病人带来
14、任何痛苦,可反复检查。尤其诊断肺癌阳性率可达80%以上,其中诊断小细胞肺癌阳性率90%、鳞癌阳性率82.2%、腺癌阳性率69.4%.未分化癌阳性率71.4%,诊断假阳性率1.8%。中心型肺癌阳性率高于周边型肺癌,分别为82.9%和62.8%O痰细胞学检查也可作为判断治疗疗效或早期复发的指标之一。但传统的痰细胞学检查易受取材、保存、制片、染色及检查人员素质等因素的影响,灵敏度仅为20%30%,因此,改进痰细胞学的检查方法是非常重要和必须的。【操作方法】1.痰标本采集。要求患者清晨收集肺深部咳出的痰。医务人员必须认真指导患者如何从肺深部咳痰,咳痰前不能吃任何东西,最好先用清水漱口3次,以去除口腔杂
15、物。之后做23次深呼吸,再用力唆嗽,将肺深部的痰咳出,遗弃第1口痰,留第2、3、4口痰做标本。如患者咳痰困难,可用3%5%氯化钠溶液雾化吸入,诱导痰液排出。目前多数医院痰留置于干净的玻璃器内,或置于95%乙醇内。留置器皿内的痰应于1.2h内送化验室。如不能及时送检,则必须保存在VC冰箱内。徐片要由有经验的技术员进行,选择带血丝的痰或灰白色痰块涂片,涂片要均匀,并立即置于固定液内,再用巴氏或苏木素和伊红(hematoxy1.inandeosin,、HE)染色。置于乙醇的痰标本可送病理科,进行石蜡包埋后染色。2 .痰液收集方法已有很快进展,1963年SaCCOmanrIO建立了保存痰液的方法,已被
16、广泛应用于临床及肺癌筛查中。2000年协和医院对Saccomanno法进行了相应改良,加人了解黏剂,使细胞学检查阳性率有明显提高。但长期保存有17.7%标本受损。我院痰储存固定常用50%乙醇和2%多聚乙醇的混合液。每个收集管内置固定液20m1.,可留取78口痰,便于进行多项目检查。已留痰的收集管立即保存于4摄氏度冰箱。解黏处理这一步非常重要,否则将收集不到纯脱落细胞,进行细胞形态及痰基因分析,目前解黏处理常用美国PROMEGA公司生产的DTT(D1.-Dithiothreito1.),工作浓度为5%,DTT可打断黏蛋白之间的二硫键连接,而不损伤细胞。20世纪90年代中期发展的液基细胞学与计算机
17、辅助细胞学诊断系统(CCT)的应用,可使痰细胞学检出的阳性率达97.1%。液基细胞学包括薄层细胞学检测系统(TCT)和自动细胞学检测系统(1.CT),均已获美国FDA批准,应用于临床。可将痰标本中的黏液、血液和炎性细胞分离,收集痰脱落细胞制成薄片,用于细胞学检测,使痰的采集、制片、染色等步骤实现标淮化和自动化,并应用计算机技术,对痰涂片给予分析,提高丁精确度。3 .留取痰次数。一般认为送检46次,据报道1、2、3、4次的阳性率分别为47.2%、72.7%、84.5%、91.5%。当晚期中心型肺癌支气管完全阻塞或合并气道感染时,肿物表面有多量坏死物及脓痂,痰细胞学往往呈阴性,待抗炎、化学治疗或放
18、疗后,气道稍通畅,继续不断多次留痰,有可能得到细胞学阳性诊断。4 .痰检肺癌相关基因的分子生物学。目前痰脱落细胞分子生物学检查有广阔的发展前途,北京协和医院已进行免疫标记技木在肺癌筛查中应用研究。不均一核糖蛋白(heterogeneousnuc1.ea1.ribonudeoprotein,hnRNP)A2/B1:是一种RNA结合蛋白,在肺癌组织中表达增高,痰脱落细胞阳性者表达为57%。肺癌高危人群监测中已证实,痰脱落细胞呈鳞状化生和不典型增生时有hnRNP表达。国外报道肺癌病人在临床确诊前2年收集的痰标本中已有hnRNPA:阳性表现。(2)痰P53基因突变测定:应用聚合酶链反应(po1.yme
19、rasechainreaction,PCR)-单链多肽性(Sing1.e-StrandComformationpo1.ymorphism,SSCP)-银染肺癌痰检出率55.5%,诊断灵敏度55.56%,特异性98.25%0并有1例患者于临床诊断肺癌前1年,痰脱落细胞PS3点突变已呈阳性;变性高压液相色谱法(denaturinghighperforman1.e1.iquidchromatography,DHP1.C)可检测痰细胞Rb2P13o及P53突变,两者结合特异性100%,灵敏度51.43%。第2章诱导痰的方法【概述】诱导痰的方法是通过吸入雾化高渗盐水诱导痰液生成,并进一步分析痰液中细胞成
20、分和上清液可溶性介质,以研究哮喘气道炎症性质及程度的非侵袭性方法。S前主要用于哮喘的气道炎症机制的研究,何对气道疾病的诊断和鉴别诊断、药物疗效观察及其机制探讨也有意义。【适应证】1.哮喘与其他呼吸道疾病的鉴别诊断。2 .了解哮喘患者及其他呼吸系疾病气道炎症的特点。3 .研究气道炎症性疾病加重的原因。4 .预期糖皮质激素的疗效。哮喘患者痰中嗜酸性粒细胞增多口寸能是激素治疗效果满意的预示,在临床工作中有应用价值。5 .评价药物文寸气道炎症的作用、通过观察药物治疗前后诱导痰中细胞组分及炎症介质、分子生物学、免疫学改变,可以帮助我们研究药物的作用机制。【禁忌证】6 用力呼气量11.的任何患者。7 .近
21、期大咯血。3.下列病症患者。(1)哮喘中重度急性发作(加重)。(2)急性或慢性呼吸衰竭。气胸或纵隔气肿。各种原因引起的大量胸腔积液或心包积液。(5)严重心功能不全。【相对禁忌证】活动性肺结核。【操作方法】1.雾化吸入的方法自前尚无标准的诱导痰方法,文献中主要有两种不同的方法:(1)在固定的时间间隔内吸入浓度恒定(如3%)或渐增的超声雾化高渗盐水。(2)吸入超声雾化高渗盐水(如4.5%)的时间逐渐延长。目前国内基本均采用吸入3%盐水的固定时间间隔法,但购种痰液诱导方法均应按标准方法进行。2.操作方法测FEV1.(2)吸入沙丁胺醇200go(3)20min后再测FEV,若肋预计值则继续操作。(4)
22、嘱患者平静呼吸时吸入超声雾化3%盐水7m1.,每次吸入后,鼓励患者积极唆嗽,清理鼻咽腔后收集痰液。(5)再测FEK,若FEV:下降不超过10%则继续操作,若FEV;下降10%20%,则再次吸入沙丁胺醇200吟如果再次吸入沙丁胺醇后没有改善则应终止试验,如果有改善则可继续诱导痰。(6)必要口寸可用4%5%的盐水重复以上步骤。(7)结束诱导条件为诱导所得的标本已足够实验需要;总吸入时间达20S30mino(8)有如下情况终止诱导。若患者出现胸闷、咳嗽、喘鸣、呼吸困难等症状或FEV:下降超过基线值的20%及绝对值小于预计值的90%,应停止实验,并吸入沙丁胺醇200-400Mg改良诱导法:先用生理盐水
23、雾化吸入Imin再依次用3%、4%、5%高渗盐水雾化吸入12min,每次操作前测FEV1.,若FEVI下降超过10%或痰迓已够则停止操作。【注意事项】1.高渗盐水的吸入对气道构成非特异的刺激,可引起气道平滑肌的收缩,降低通气功能,对存在气道高反应性的哮喘患者的通气功能的影响尤其显著,因此实施诱导痰方法时必须严格掌握适应证和禁忌证,术前必须进行肺功能检查。没有条件进行肺功能检查者不得随意进行该项操作,肺功能检查次数因不同情况而异。2 .诱导痰过程中,操作者必须注意观察患者的反应,现场应备有意外情况的抢救设施。3 .诱导操作前后均应吸入脚受体激动药。4 .经吸入高渗盐水诱导出来的痰标本应尽早进行处
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