2023年药物分析考试表格版.docx

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1、药物分析总结绪论1.【药物】（drug）是指用于预防、治疗、诊断人的疾病，有目的地调节人的生理机能并规定有适应症或者功能主治、用法用量的物质。【药品】(medicinalproducts)指由药物经一定的处方和制剂工艺制备而成的制剂产品，是可供临床使用的产品。2.药物分析的任务：（1.制定药品质量标准、药品质量监督：研究、生产、供应、临床药学研发的工具、“眼睛”：运用物理、化学、物理化学等有关方法和技术研究。（3.直接参与解决要学发展中的重大问题（广义）3.GLP药物非临床研究质量管理规范GCP药物临床实验质量管理规范GMP药品生产质量管理规范GSP药品经营质量管理规范GAP中药材生产质量管理

2、规范（试行）4,人用药品注册技术要求国际协调会（ICH）有关的技术要求（Q）有11种第一章药品质量研究的内容与药典概况1.【药品标准】系根据药物自身的理化和生物学特性，按照批准的来源、处方、生产工艺、贮藏运输条件等所指定的，用来检测药品质量是否达到用药要求并衡量其质量是否均以稳定的技术规定。2.溶解度极易溶解Ig（ml）能在溶剂不到IInI中溶解易溶Ig（ml）能在溶剂hnl10ml中溶解溶解Ig（ml）能在溶剂IOnIr30Inl中溶解略溶Ig（ml）能在溶剂30InrlOomI中溶解微溶Ig(ml)能在溶剂100nll1000ml中溶解极微溶解Ig(ml)能在溶剂IOoOlnrlooool

3、nl中溶解几乎不溶或不溶Ig（ml）能在溶剂100OOnll中不能完全溶解3.检查方法和限度：原料药的含量（）如未规定上限时，系指不超过101.0%。制剂的含量限度一般范围是95.0%105.0%4.【药品标准物质】指供药品标准中物理和化学测试和生物方法实验用，具有确定特性量值，用于校准设备、评价检验方法和给供试药物赋值的物质。其包括对照品、标准品、对照药材、参考品等。【标准品】指用于生物检定、抗生素和生化药品含量或效价测定的标准物质，用国际单位（Ug）计，以国际标准品进行标定。【对照品】用于鉴别、检查、含量测定和矫正检定仪器性能的标准物质，除另有规定，均按干燥品（或无水物质）进行计算后使用的

4、化学药品标准物质。【对照药材、对照提取物】主要为中药检验中使用的标准物质。5.精密称定称取重量应准确至所取重量的千分之一称定称取重量应准确至所取重量的百分之一精密量取量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求量取用量筒或按照量取体积的有效数位选用量具6 .【恒重】除另有规定，指供试品连续两次干燥或炽灼后重量差异在0.3mg一下的重量；干燥至恒重的第二次及以后各次称重均应在规定条件下继续干燥IH后进行；炽灼至恒重的第二次称重应在继续炽灼30min后进行。7 .【空白实验】指在不加供试品或以等量溶剂替代供试液的情况下，按同法操作所得的结果。8 .酸碱度检查所用的水，均系指新沸放冷至室

5、温的水。9 .药品质量研究内容：原料药质量研究在确证化学结构或组分的基础上进行，更注重于自身的理化与生物学特性、稳定性、杂质与纯度控制。制剂的质量研究在原料药研究的基础上进行，结合制剂处方工艺，更注重其安全性、有效性、均一性和稳定性。10 .中华人民共和国药典(ChP)指国家对药品质量及检验方法所做的技术规定，是药品研制、生产、经营、使用和监督管理等均应遵循的法定依据。11 .中国药典内容：【凡例(generalnotice)指对药典内容的说明、注解。【正文(monographs)指药典所收载的药物及其制剂的质量标准。【附录(appendices)主要收载制剂通则、通用检验方法和指导原则。【引

6、索(index)中文、英文都有12 .ChP进展：2010版第一部中药、中药饮片、植物油脂、成方单方制剂第二部一一化学药品、抗生素、生化药品、放射性药品。药用辅料第三部生物制品13 .国外主要药典USP一一美国药典。现和国家处方集合并出版，简称USP-NFBP英国药典EP一一欧洲药典。又简写为Ph.EurJP日本药局方Ph.Int国际药典第二章药物鉴别实验一、药物鉴别实验的定义与目的1.【药物的鉴别实验】是根据药物的分子结构、理化性质，采用物理、化学或生物学的方法来判断药物的真伪。2 .意义：药物检验工作中的首要任务，只有药物在鉴别无误的情况下，进行药物的杂质检查、含量测定等分析才有意义3 .

7、目地：证实贮藏在有标签的容器中的药物是否为其所标识的药物，而不是对未知物进行定性分析二、鉴别实验的项目(一)、性状(discription)1 .【外观】：指药品的外表感官和色泽，包括药品的聚集状态、晶型、色泽及臭、味等2 .溶解度：分为极易溶解、易溶、溶解、略溶、微溶、极微溶解、几乎不容或不溶3 .物理常数(1.)【熔点(meltingpoint)：一种物质按规定方法测定，由固体融化成液体的温度、熔融同时分解的温度或在融化时自初熔至全熔的一段温度。三种测定方法：第一法易粉碎固体药品；第二法一一不易碎的固体和脂肪酸；第三法一一凡士林(2.)【比旋度(SPeCifiCrotation):在一定波

8、长和温度下，偏振光透过长Idln且每Iml中含有旋光性物质Ig的溶液时测得的旋光度。它是反映手性药物特性及纯度的主要指标。(3.)【吸收系数】：在给定波长、溶剂和温度等条件下，吸光物质在单位浓度】单位液层厚度时的吸收度。用途:考察原料的质量应用紫外分光光度法的定量依据百分吸收系数：E；寒=合(单位是g100ml)(二)【一般鉴别实验(generalidentificationtest)：依据某一类药物的化学结构或理化性质的特征，通过化学反应来鉴别药物真伪。只能证实是某一类药物，而不能证实是哪一种。只适用于纯品，混合物或有干扰时不适用。有机氟化物1 .氧瓶燃烧法进行有机破坏2 .用茜素氟蓝试液和

9、硝酸亚锦试液进行滴定，呈蓝紫色有机酸盐水杨酸盐方法一：滴加三氯化铁试液一滴呈紫色方法二：加稀盐酸，沉淀在醋酸镂试液中溶解酒石酸盐加氨制硝酸银试液数滴，置水浴中加热，生成银镜芳香伯胺类加稀盐酸、亚硝酸钠、碱性B-蔡酚试液，生成橙黄到猩红色沉淀托烷生物碱类ViIaIi反应：加固体氢氧化钠，显深紫色无机金属盐钠、钾、钙、银盐的焰色反应钠离子一一鲜黄色；钾离子一一紫色；钙离子一一砖红色；钢离子一一黄绿色，绿色玻璃透视显蓝色镂盐加过量NaOH后加热，发生氨臭。使水湿的红色石蕊试纸变蓝、被硝酸亚汞湿润的滤纸变黑无机酸根氯化物方法一：滴加硝酸银试液，生成乳白色沉淀。沉淀滴加氨试液即溶解，再滴加硝酸酸化后沉淀

10、复生成。方法二：加等量二氧化锌，加硫酸湿润，缓缓加热产生氯气，能使水湿润的碘化钾淀粉试纸变蓝硫酸盐方法一：滴加氯化钢试液生成白色沉淀，在盐酸、硝酸中均不溶解方法二：滴加硫酸铅试液，生成白色沉淀方法三:加盐酸不产生沉淀（与硫代硫酸盐区别）硝酸盐方法一：加等量硫酸后沿管壁加硫酸亚铁试液，分层，界面呈棕色方法二：加硫酸与铜丝加热，产生红棕色蒸汽方法三：滴加高镒酸钾试液，紫色不退去。（与亚硝酸区别）（三）专属鉴别实验三、鉴别方法L化学鉴别方法TLC法比移值:二基线至展开中心的距离厂基线至展开前沿的距离呈色反应鉴别法如前三酮反应、VataIi反应、重氮化-偶合反应沉淀生成反应鉴别法如氯化银、银镜反应荧光

11、反应鉴别法1.药物本身可以发射荧光2.药物与适当试剂反应后发射荧光气体生成反应鉴别法可生成氨气、碘蒸气或硫化氢的药物使试剂褪色的鉴别法如维生素c的二氯靛酚反应测定生成物的熔点应用较少2.光谱鉴别法紫外光谱鉴别法有共趣双键，在紫外-可见光区有特征吸收光谱红外光谱鉴别法（用滨化钾、氯化钾制备）试样制备方法：压片法、糊法、膜法、溶液法3.色谱鉴别法：薄层色谱法和高效液相色谱法第三章药物的杂质检查一.药物的杂质与限量1 .【药物的纯度PuritiesA药物的纯净程度.要求：不断提高评价：药物的纯度需综合考虑药物的外观性状、理化常数、杂质检查和含量测定,综合评定。药物纯度与试机纯度共同点均规定所含杂质的

12、种类和限量不同点药物纯度从用药安全、有效和对药物稳定性等方面考虑,只有合格品和不合格品试剂纯度是从杂质可能引起的化学变化对使用的影响以及试剂的使用范围和使用目的加以规定,它不考虑杂质对生物体的生理作用及毒副作用2 .【杂质（InIPUriIies）】药物中存在的无治疗作用或影响药物的稳定性和疗效，甚至对人体健康有害的物质。1）来源：生产过程、贮藏过程2）杂质种类杂质的种类一舱杂质而精殊杂质校采用分类工艺杂质、除解杂质、反应物和试剂温人的杂质线套性分类毒性杂质和信号杂质按理化性质有如杂质.无机杂质、戌被分类泡剂a.一般杂质：自然界分布广泛，在多种药物的生产和贮藏过程中容易引入杂质，它们含量的高低

13、与生产工艺水平密切相关。所以也常称为信号杂质。收藏于附录。b.特殊杂质：是指在特定的药物生产和贮藏过程中引入的杂质，也称有关物质。这类杂质随药物不同则不同。3.1杂质的限量（/加，）】药物中所含杂质的最大允许量。通常用百分之几或百万分之几partspermillion,ppm）表示。药物的杂质与限量对照法杂质限量控制限量检查灵敏度法I平行原则比较法定量测定杂质含量杂质限量乙（%） =标准溶液浓度C 标准溶液体积V供试品量S对照法取一定量的被检测杂质标准液和一定量供试品溶液，在相同条件下处理，比较反应结果，以确定杂质含量是否超过限量。注意平行原则灵敏度法在供试品溶液中加入一定量试剂，在一定条件下

14、反应，不得有正反应出现。比较法取供试品一定量依法检查，测定特定的杂质参数，与规定的限量相比，不得更大。与对照法相比，无需对照品。（2.）计算注意：单位统一二、杂质的检查方法1.药物杂质检查的主要依据：药物与杂质在物理性质或化学性质上的差异。3 .杂质的命名：化学名，有关物质，检测方法。4 .杂质限度报告限度(reportingthreshold)超出此限度的杂质均应在检测报告中报告，并应报告具体的检测数据。鉴定限度(identificationthreshold)超出此限度的杂质均应进行定性分析，确定其化学结构质控限度(qualificationthreshold)质量标准中一般允许的杂质限度

15、，如制定的限度高于此限度。应有充分的依据。4.杂质的检查方法杂质检查方法化学方法色谱方法TLC1HPLC1Gc光谱方法5IR,原子唳收杂质的检查方法显色当杂质与试剂产生颜色时，采用比色法控制杂志限量。沉淀当杂质与试剂产生沉淀时，采用比浊法控制杂志限量产气当杂质与试剂产生气体时，采用相应的气体检查方法来控制杂质的限量。滴定滴定剂只与杂质反应，以一定浓度的滴定液滴定药物中的杂质，可以定量检测杂质的含量。（1.）化学方法TGA1DTA.DSC热分析法（2.）色谱法一一杂志检查的首选方法A薄层色谱法（TLC）：名称方法结果判断适用条件杂质对照品法方法：根据杂质限量，取供试品溶液和一定浓度的杂质对照品溶

16、液，分别点样于同一薄层板上，展开、斑点定位。供试品溶液除主斑点外的其他斑点与相应杂质对照品溶液相应主斑点比较，进行判断。已知杂质并能制备杂质对照品供试品溶液自身稀释对照法配制一定浓度的供试品溶液，并按限度要求稀释至一定浓度做为对照溶液，将供试品溶液和对照溶液分别点样同一薄层板，展开并斑点定位。供试品所显杂质斑点与自身稀释对照液相应主斑点比较，不得更深。适用于杂质的结构不确定；或虽杂质结构确定，但无杂质对照品的情况。杂质的结构不确定；或虽杂质结构确定，但无杂质对照品。杂质对照品与供试品溶液自身稀释对照并用法已知杂质有对照品，采用杂质对照品法检查；共存未知杂质或没有对照品的杂质，采用供试品溶液自身

17、稀释对照法检查。药物中存在多个杂质对照药物法适用条件：无合适杂质对照品或供试品杂质斑点与主成分斑点颜色差异，难以用与供试品相同的药物做为对照。、判断限量时，采B.HPLC法名称方法结果判断适用条件杂质对照品法（外标法）配制杂质对照品溶液和供试品溶液，分别取一定量注入色谱仪，测定杂质对照品溶液和供试品溶液中杂质峰的相应。按外标法计算杂质浓度。有杂质对照品，且进样量能精确控制。加校正因子的主成分自身对照法As/CSAXARlCRCXAs/Cs测量杂质的峰面积，分别乘以相应的校正因子后，与对照溶液主成份峰面积比较。已知杂质的控制。优点：省去杂质对照品，又考虑到杂质与主成分响应因子的不同而引起的测量误

18、差。不加校正因子的主成分自身对照法没有杂质对照品面积归一化法供试品中结构相似、相对含量较高且限度范围较宽的杂质含量的粗略考察没有杂质对照品。（3.）气相色谱（GC）法：适用于挥发性杂质的检测（4.）【热分析法（ThermalanaIySiS）：测定物质的物理化学性质与温度关系的仪器分析方法。热重分析法(ThermogravimetricAnaIysiszTGA)利用热天平在程序控温的条件下测量物质的质量随温度变化的热分析技术，可计算出样品在相应温度范围内减失质量的百分率。本法可区分药物中所含水分是吸附水还是结晶水差热分析法(DifferentialThermalAnaIysisjDTA)在程序

19、控制温度下，测量供试品和惰性参比物（常用石英砂、煨制Mgo）之间的温度差与温度（或时间）关系的热分析技术。定性和纯度检定一一根据峰的数目、形状、位置对供试品进行纯度判别差示扫描量热法(DifferentialScanningCalorimetry,DSC)测量保持供试品和惰性参比物的温度相同，系统所需输给供试品或参比物的能量差随温度（或时间）变化的热分析技术。用于待测物质的鉴别、晶型鉴别、纯度检查以及熔点和水分等的测定，更适合于测量物质在物理变化或化学变化中焰的变化。三、药物中一般杂质的检查1.氯化物检查法原理利用氯化物在硝酸酸性条件下与硝酸银反应，生成氯化银胶体微粒而显白色浑浊液，与一定量标

20、准氯化钠溶液在相同条件下产生的氯化银浑浊程度比较，判定氯化物是否符合限量操作样品水至25。/、稀HNo310ml、水）40MAgN3口一i-U比较浑浊程度暗处放置5min标准液L定量）也结果暗处放置5min（避免AgCl分解）；自上而下的观察；黑色的背景上注意加稀硝酸的目的：a.避免产生碳酸银、氧化银、磷酸银沉淀。b.加速氯化银混浊的生成，产生较好的乳浊，50ml供试液含稀硝酸IOmI为宜.供试品溶液不澄清处理方法：供试品溶解后溶液不澄清，应过滤，过滤时的滤纸要先用含硝酸的水溶液（1一100）洗涤，除去滤纸中含有的氯化物.试品溶液有色时的处理方法：内消色法。2.硫酸盐检测方法原理硫酸盐与氯化钢

21、在稀盐酸酸性条件下反应，生成硫酸钢的白色浑浊液,与一定量标准硫酸钾溶液与氯化钢在相同条件下生成的浑浊比较.操作嬖产4。向等至叫350ml标准溶液12ml5ml注意a.加稀盐酸的目的：防止碳酸钢或磷酸钢形成钢盐沉淀对比浊的影响。但酸度过大可使硫酸钢溶解，降低检查灵敏度。b.供试品溶液不易溶解时：加入有机溶剂溶解C.供试品溶液有色时：内消色法3.铁盐检查原理硫IK酸盐法：ChP.USP铁盐在盐酸酸性溶液中与硫鼠酸钱生成红色可溶性硫银酸铁配离子,与一定量标准铁溶液用同法处理后所呈的颜色进行比色.疏基醋酸法：BPo筑基醋酸还原三价铁离子为二价铁离子，在氨碱性溶液中作用生成红色配位离子，比色测定操作样品

22、1H2。4HC（30%硫露酸钱H2。UC/U法卜上25W5加/标准浴液J4ml过硫酸钱50Mq灵敏度高，但试剂贵。结果比色管观察注意a.标准硫酸铁铁溶液含硫酸的原因：防止三价铁离子水解。b.过硫酸筱的作用：氧化供试品中二价铁变三价铁，防止硫原酸铁降解C.某些药物（如葡萄糖）需要用硝酸作氧化剂处理，但须加热煮沸除去过量硝酸。因为亚硝酸与硫鼠酸根反应生成红色的亚硝酰硫辄化物d.过量的硫鼠酸筱，增加硫氟酸铁配离子稳定性，消除其他酸根离子的干扰e.色调不一致或颜色较浅时，须加正丁静或异戊静提取比较。f.某些有机药物特别是环状有机物需经炽灼破坏4.重金属检查法方法使用范围第一决矣代乙乱胺生漆于水、转酸.

23、乙等的药物奴灼后的磕代办畲芬环、杂环以及难遂于米、稀酸为一添机胺生.乙尊的药物第三决破,化的出诚于或楼米总波而地于这于种酸或在样酸中生成洗送的药捐第。陵故孔德膜去重金属分步低的的物（25g）原理硫代乙酰胺法：硫代乙酰胺在弱酸性（pH3.5醋酸盐缓冲液）条件下水解，产生H2S。与重金属离子（以Pb2+为代表）生成黄色到棕黑色的硫化物混悬液，与一定量标准铅溶液经同法处理后所呈颜色比较，判定限量是否符合规定。适用于溶于水、稀酸、乙醇的药物,是最常用的方法炽灼后的硫代乙酰胺法:供试品先炽灼破坏后,使有机结合的重金属游离，再按第一法检查。适用于含芳环、杂环以及不溶于水、稀酸及乙醇的有机药物硫化钠法：在碱

24、性介质中，以Na2S为显色剂，使Pb2+与S2-作用生成PbS的混悬液，与一定量标准铅溶液经同法处理所呈颜色比较，不得更深。适用于溶于碱性水溶液而难溶于稀酸或在稀酸中即生成沉淀的药物.操作三支比色管：甲管标准铅溶液，乙丙管供试品。取供试品适量,加NaOH试液5ml和水20ml使溶解后,置纳氏比色管中,加Na2S试液5滴，摇匀，与一定量标准铅溶液经同法处理所呈颜色比较.结果当丙管中显出颜色不浅于甲管时，乙管中显出的颜色与甲管比较，不得更深；当丙管中显出得颜色浅于甲管，按第二法重新检查注意a.用硫代乙酰胺为显色剂。硫代乙酰胺在实验条件下水解产生H2S,与重金属离子反应。b.溶液的PH对于金属离子与

25、硫化氢呈色影响较大,pH在3.03.5时，呈色较完全。c.供试品溶液有颜色时的处理：1）外消色法I稀焦糖溶液调节II指示剂调节2）内消色法d.供试品中微量高价Fe3+存在:弱酸性溶液中Fe3+氧化H2S析出S,产生混浊影响检查.加入抗坏血酸或盐酸羟胺使Fe3+还原为Fe2+oe.供试品为铁盐（大量的Fe3+）:Fe3+在HCl溶液中能形成配位化合物用乙醛提取.水层加氨试液调至碱性，残存的Fe3+可用KCN掩蔽，按第三法检查.a.HNO3处理后,必须蒸干除尽NO.b炽灼温度严格控制：500-600.c.控制酸中重金属的影响，对照品同法处理d.含钠盐或氟的有机药物在炽灼时改用钳卅期或硬质玻璃（玛瑙

26、）蒸发皿.Na2S对玻璃有腐蚀性,久置产生絮状物,应临用新配.5.神盐检查法原理古蔡（GUtZeit）氏法：金属锌与酸作用产生新生态的氢与药物中微量神盐反应生成具挥发性的碎化氢,遇澳化汞试纸产生黄色至棕色的种斑,与同条件下一定量标准种溶液所生成的碎斑比较,判断碎盐的量.二乙基二硫代氨基甲酸银法（Ag-DDC法）白田道夫法：SnCI2SHCl中能将种盐还原为棕褐色的胶态碑次磷酸法：在盐酸酸性溶液中，次磷酸还原种盐为棕色的游离神操作供试品）KITS小&AsH3过Pb（A今棉花A标准液/酸性SlICl2TS.HCl1遇HgB,试纸红色胶态银：目视比色7去或SlOnm测定A值用于硫化物、亚硫酸盐以及含

27、睇药物等碑盐检查；不受S2-zSO32-zSb干扰；灵敏度较古蔡氏法低结果比较碎斑颜色深浅注意a.Kl的作用还原剂：As5+As3+o五价碑生成AsH3的反应速度比三价础速度慢，加入Kl使五价碑还原为三价种后再与活泼氢反应，以增大AsH3的生成速度.b.酸性SnCI2的作用：还原剂（表现在2方面）I.将五价碑还原为三价碑11.将Kl被氧化生成的12再还原为I-与Kl还可抑制睇化氢生成。C.PbAc2棉花的作用：排除硫化物的干扰。d.供试品是硫化物,亚硫酸盐,硫代硫酸盐：加入浓硝酸处理e.供试品是铁盐：先加酸性SnCI2试液使Fe3+-Fe2+f.共价键结合的碎化物：进行有机破坏一一酸破坏法或碱

28、破坏法本法不仅用于础盐的限量检查，而且可用作微量碎盐的含量测定.含睇药物不干扰测定灵敏度高对含睇药物中碎盐的检查不能用古蔡氏法,需用白田道夫法.优点:不受Sb干扰缺点：灵敏度低6.【干燥失重（IoSSondrying）指药品在规定的条件下，经干燥后所减失的量,以百分率表示。主要检查药物中的水分及其他挥发性物质。恒重：试品连续两次干燥或炽灼后重量差异在0.3mg一下的重量；干燥至恒重的第二次及以后各次称重均应在规定条件下继续干燥IH后进行；炽灼至恒重的第二次称重应在继续炽灼30min后进行。常用方法分类适用范围温度常压恒温干燥法受热稳定的药物105oC减压干燥法与恒熔点低或受热分解60oC温减压

29、干燥法的供试品干燥剂干燥法受热分解或易升华的供试品常温热分析法7 .水分测定法：水分包括结合水和吸附水。药典收载费休氏法和甲苯法。费休氏法可准确测定药物中的结晶水、吸附水和游离水。费休氏试法a.原理：利用碘将二氧化硫氧化为三氧化硫时，需要一定量的水分参与反应，根据消耗碘的量来测定水分的含量。8 .水与费休氏试液摩尔比：水：碘：二氯化硫：甲醇：毗咤=1：1：1：1：3供试品中水分的含量（）=（A*f100%C.W（A供试品消耗的FiSher试液的体积；B空白消耗的FiSher试液的体积；F每ImIFiSher试剂相当于水的重量（mg）；W供试品的重量）d.指示终点方法：FiSher试液颜色（淡黄

30、色一一红棕色）永停法8 .【炽灼残渣（residueonignition）：有机药物经炭化或挥发性无机药物加热分解后，再经高温炽灼，所产生的非挥发性无机杂质的硫酸盐。用于控制有机药物经炭化或挥发性无机药物中非挥发性无机杂质。原理：供试品置已炽灼至恒重的用烟，精密称定，缓缓炽灼至完全炭化，放冷至室温，除另有规定外，加入硫酸使湿润，低温加热除尽硫酸蒸气后，于高温(700-800Oe)炽灼至完全灰化，在干燥器内冷却至室温，精密称定后，再(700-800Oe)炽灼至恒重。炽灼残渣()=残渣及空怒亶空生锅重飞。沈供试品重药典要求：ChP和BP均要求恒重；USP和JP残渣在限度外时才要求恒重。ChP和US

31、P均先炭化后再加硫酸；BP和JP则加硫酸消化两次；温度:ChP700-800oC;USP为80025oC;BP为800oC;JP为450-550OC注意事项：1)供试品取用量由限量和称量误差决定。一般应使炽灼残渣量为l-2mg,限量一般为0.102%；2)放入高温炉内之前，务必蒸发除尽硫酸，以免腐蚀炉膛；3)除尽硫酸蒸气，应低温加热，以防由于温度过高，影响测定结果；4)含氟样品采用钳珀烟；5)炽灼残渣留作重金属检查是，温度控制在500-600oC;6)恒重的第二次称重在继续炽灼30min后进行。9 .【易炭化物(readilycarbonizablesubstances)：指药物中存在遇硫酸易

32、炭化或氧化而呈色的微量有机物质。多为未知结构的化合物，用硫酸呈色的方法控制他们的含量。采用目视比色法。检查：甲管：加入各品种项下规定的对照溶液5ml；乙管：加硫酸(94.5%-95.5%,gg)5ml,分次缓缓加入规定量的供试品，振摇使溶解。均静置15min,甲乙管比较，乙管不得比甲管更深。对照液种类：1)同“溶液颜色检查项下“标准比色液；2)由比色用氯化钻、比色用重铝酸钾、比色用硫酸铜按规定配制的对照液；3)高锌酸钾液10.1 残留溶剂(residualsolvents)：合成原料药、辅料或制剂生产过程中使用的，但在工艺中未能完全除去的有机溶剂。分类毒性使用举例一类溶剂毒性较大，致癌，对环境

33、有害避免使用苯、四氯化碳二类溶剂有一定毒性限量使用乙膻、三氯甲烷、二氯甲烷、Itt咤、四氢吠喃、甲苯三类溶剂危险性较小推荐使用乙酸、乙醛、乙酸乙酯、乙醇、甲酸药典规定：残留溶剂检查方法为气相色谱法(GC)。可采用填充柱，也可采用毛细管柱。检测器常为氢火焰离子化检测器(FID),对含卤素的残留溶剂采用电子俘获检测器(ECD)oFID使用时，需加尾吹气，作用：提高灵敏度，消除检测器死体积的柱外效应。*色谱系统与系统适用性试验(SyStemSUitabilityTests;SSTs):用待测物的色谱峰计算的N应大于IoO0；内标物与待测物的两个色谱峰的R2L5；每个标准溶液进样5次，所得待测物与内标

34、物峰面积之比的RSDW5%；若以外标法测定，所得待测物峰面积的RSDWl0%。分类适用范围第一法毛细管柱顶空进样等被检查的有机溶剂数量少且极温法性差异较小的情况第二法毛细管柱顶空进样程被检查的有机溶剂数量多且极序升温法性差异较大的情况第三法溶液直接进样法11.溶液颜色(COlOrOfSOlUtiOn)检查药物中有色杂质，ChP采取三种检查方法(P134)：标准比色液比色法；分光光度法；色差计法A.标准比色液比色法：将药物溶液与规定的标准比色液的颜色比较。标准比色液是比色用重格酸钾、硫酸铜、氯化钻按规定的比例制备各种色调标准贮备液，然后用色调标准贮备液和水按规定的比例制备各种色调色号标准比色液。

35、B.分光光度法检查有色杂质：配制一定浓度的供试品溶液，在规定波长测定吸收度，吸收度不得过规定值。C.色差计法：色差计直接测定溶液的三刺激值，对溶液颜色进行定量表述和分析。目视法难以判断时使用。12.【澄清度（clarityofsolution）：检查药品溶液的混浊程度，可反应药物溶液中的微量不溶性杂质，主要用于制备注射剂的原料药或注射剂检查。ChP中澄清度的检查法为比浊法方法：暗室内垂直在伞棚灯下，检查供试品溶液和浊度标准液。浊度标准贮备液制备：.o%的硫酸期溶液与10%乌洛托品等容量混合，生成的甲醛腺在水中形成白色浑浊,以不同量的水稀释可得不同浊度的标准液。浊度标准贮备液制备温度：25C澄清

36、的定义：供试品溶液的澄清度相同于所用的溶剂，或不超过0.5号浊度标准液。注意事项：光线，暗处浊度最高；温度251；溶剂多为水，有时用酸、碱、有机溶剂。水为新沸过的冷水四、特殊杂质的检查与鉴定方法（略）第四章药物的含量测定方法与验证一、药物的含量：药物所含主成分的量，用于评价药物的质量。1.原料药：多以表示。（1.）按原料药本身形式计算其含量（2.）由于药物组成不定，需以另一种稳定形式计算含量2.制剂：（L）按标示量计算（2.）直接用含量规定范围（主药含量微）（3.）以重量规定含量范围（多为复方制剂）二、定量分析方法的分类与特点与量分析方法的分类与特点基于化学或物理学原理容量分析滴定（直接、间接

37、）含量测定光谱分析对照为法、吸收系数法、计算分无光发法、比之法色谱分析一HPLC（外力.内林）、GC（外标、力标、标发加入）基于生物学原理1.容量分析（L）容量分析的化学反应必须满足的条件：反应要有一定的化学计量关系，并且要能定量地完成反应速度要快，即反应在瞬间完成必须要有合适的确定滴定终点的方法（2.）滴定分析法：酸碱滴定法;沉淀滴定法；配位滴定法;氧化还原法；非水溶液滴定法等（3.）容量分析的特点：简便易行耐用性高结果准确：相对误差小于0.2%专属性差用于化学原料药的含量测定（4.）滴定度：指每Iml规定浓度的滴定液相当于被测物质的量，以T表示，中国药典以mg表示。T（mg/ml）=m-M

38、b（a、b分别为被测物、滴定液的摩尔数;m一滴定液的摩尔浓度，待测物的亳摩尔质量（分子量）（5.）直接滴定法用滴定液直接滴定被测药物，计量滴定液消耗的量，计算供试品的含量v药物的百分含量=X100%W含量=goo%=上3oo%WW间接滴定法生成物滴定法供试品+试剂Af化合物B化合物B+滴定液Cf化合物D计量滴定液消耗的量，计算供试品的含量计算同直接滴定法回滴定法(剩余滴定法)原理：先在待测样品溶液中加定量、过量的滴定液A,使它和样品反应，等反应结束后，再用另一种滴定液B来回滴剩余的滴定液Ao不做空白的含量计算含量%=(匕以一/。)XTx100%W特点：A、B两种滴定液均需标定做空白的含量计算方

39、法含量%:MM)x03XMX)%W特点：仅需标定滴定液B的浓度2.光谱分析法一一紫外-可见分光光度法(1)朗伯比耳定律(Lambert-Beer定律):A=E*C*L石1%2 2)cm：一定波长下，溶液浓度为1%(W/V),液层厚度为ICm时，物质的吸收度-定量依据对溶剂的要求:截止波长：使用范围不能小于截止使用波长.纯度：在检测波长处是否符合要求,以空气做空白，测定溶剂加吸收池的吸收值.含量测定测定要求:空白对照：配制供试品溶液的同批溶剂吸收池：ICm石英吸收池吸收波长：该品种项下规定波长2nm之内吸收值：0.30.7对照品比较法CX吟G供试品的浓度为：含量=CXXD100%=4xJ0100

40、%WArW吸收系数法按规定方法配制供试品，在规定的波长及吸收厚度下，测定吸收度，计算供试品的百分吸收系数。再按在相同条件下，标准对照品测到的百分吸收系数。含量%=簿%X1OO%注意：此法对仪器要求高，必须注意校正和检定吸收系数100计算分光光度法一般不宜用作含量测定(当测定波长处于吸收曲线陡升或陡降部位时，对测定影响大)比色法供试品本身无吸收或有吸收但干扰大，可加入适当的显色剂后测定。此法影响因素较多，实验平行操作3 .色谱分析法高效液相色谱法对仪器的一般要求：A.固定相种类:反相色谱系统使用非极性填充剂。（极性：流动相固定相）B.流动相组成：甲醇水、乙晴水C.检测器：紫外检测器注意：使用C1

41、8时，流动相中含有的有机溶剂比例应不低于5%药典中规定的固定相种类、流动相组成及检测器类型不能随意改变系统适用性试验试验指标：理论塔板数、分离度、重复性、拖尾因子A.色谱柱的理论塔板数（n）B.分离度（R）注意：峰宽的概念C.重复性：5次连续进样，RSD应不大于2.0%D.拖尾因子（T）测定法（大多数采用峰面积法）外标法按规定精密称取对照品和供试品，配制成溶液，分别精密取一定量，注入仪器，记录色谱图，测量对照品和供试品峰面积。CV=gAAR特点：简单，但要求进样量准确；操作条件稳定。内标法按各品种项下的规定，精密称取（或量取）药物对照品和内标物质，分别配成溶液；精密量取各溶液适量，混合配成校正

42、因子测定用的对照溶液；进样，记录谱图，得峰高（三）或峰面积（八）配制含有内标的供试品溶液，进样，记录谱图，得峰面积（或峰高）校正因子/=彳等Ar/c供试品浓度CX=/$然特点：可避免因样品前处理及进样体积误差对结果的影响。气相色谱法对仪器的一般要求A.色谱柱种类：毛细管柱或填充柱B.载气：氮气C.检测器：氢火焰离子化检测器，检测温度一般高于柱温，不得低于150度注意：药典中规定的固定液品种、检测器类型及特殊指定的色谱柱材料不能随意改变色谱系统适用性试验：照HPLC项下测定方法A.外标法测定供试品中主成分含量B.内标法测定供试品中主成分含量C.标准加入法测定供试品中主成分含量：精密称（量）取待测

43、成分对照品适量，配成对照品溶液，精密量取一定量加入到供试品溶液中，根据外标法或内标法测定含量。CX)T4=G+AC,AxCx注意：自动进样内标法或外标法手动进样内标法定量顶空进样用标准加入法定量，可消除基质效应的影响4.含量分析方法的比较容量分析简便、准确、耐用性好相对误差在0.2%以下适用于对准确度和精密度要求高的供试品测定专属性差化学原料药的测定光谱简便、快速、灵敏药物制剂、溶出度、分析相对误差在2%5%适用于对灵敏度要求高、样本量大的供试品测定专属性稍差含量均匀度色谱分析灵敏度及专属性高适用于复杂的供试品测定定量时需要对照品药物制剂二、样品分析的前处理方法1 .不经有机破坏的分析方法（1

44、.）直接测定法适用：金属原子不直接与碳原子相连的含金属有机药物；某些cM键结合不牢固的有机金属药物水解法：酸水解后测定法:用于水难溶的含金属的有机药物碱水解后测定法：用于含卤素有机药物结构中卤素原子结合不牢固的药物还原法：用于含碘有机药物2 .经有机破坏的分析方法：适用于金属原子与碳原子结合牢固的有机金属药物，使有机结合状态的金属及卤素转变为可测定的无机化合物，再选用适当的方法测定。湿法破坏一一凯氏定氮法原理：将含氮药物与硫酸在凯氏烧瓶中共热，药物分子中有机结构被氧化分解（消解）成二氧化碳和水，有机结合的氮转变为无机氮，与过量硫酸结合成硫酸氢铁，经氢氧化钠碱化后释放氨气，随水蒸气偏出，用硼酸溶液或定量酸滴定液吸收后，滴定。操作：消解完全、蒸储完全、吸收完全、滴定完全干法破坏高温炽灼法A.原理：将有机物灼烧灰化使有机结构分解而待测元素转化为无机元素或可溶性无机盐B.限制：对于含易挥发性金属（如汞、碑等）有机药物不适用氧瓶燃烧法（OXygenFlaskcombustionmethod）：A.原理：将有机药物在充满氧气的密闭的燃烧瓶中进行燃烧，有机结构分解为C02和H20,用适当的吸收液吸收待测元素（己转化为不同价态的氧化物），以供待测元素的检查或定量测定用。B.操作：燃烧完全、吸收完全C.特点：a.适用于分析含卤素、硫、磷等有机药物b.简便