培养基制备规程及使用规程.docx
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1、培养基制备规程及使用规程培养基制备规程1 .目的规范本中心微生物实验室培养基制备工作,保证培养基的质量。2 .适用范围本规程适用于使用商品化干粉培养基制备各种待用培养基。3 .职责3. 1培养基制备人员负责按本规程制备各类培养基,及时填写成品培养基制备记录,编制培养基目录,粘贴标签。4. 2科室负责人:负责指导、监督检验人员按规程制备培养基。4.制备程序4. 1概述4 .1.1制备培养基所用的化学药品,均为化学纯。有些试剂在使用前应先试用。5 .L2使用脱水培养基和其他含有有害物质(如胆盐或其他选择剂)的成分时,应遵循良好实验室规范和生产厂商提供的使用说明。4. 1.3使用商品化脱水合成培养基
2、制备培养基时,应严格按照厂商提供的使用说明配制。如质量/体积、PIK制备条件、灭菌条件和操作步骤等。4. 1.4使用各别成分制备培养基时,应按配方准确配制,并记录所使用成分的特性。5. 1.5制备培养基常用的容器为玻璃、不锈钢铝、锅或搪瓷容器。不宜使用铜或铁锅。培养基中的含铜量过高时(0.3mg1000ml),细菌不易生长;含铁量过高时(0.14mg1000ml),则妨碍细菌毒素的产生。4. 2水4.2 .1制备培养基应使用蒸储水或相同质量的水,以排除测试条件下抑制或影响微生物生长的物质。电阻率在25。C时应2300000。cmo最好每周检测一次。4.3 .2制备培养基时避免采用离子交换器生产
3、的去离子水,其微生物含量可能较高,这种水在过滤灭菌后仍可能带有细菌生长的抑制因子。4. 3称量和复水4.3. 1称量所需量的脱水培养基(注意缓慢操作,必要时佩戴口罩或在通风柜中操作,以防吸入含有有毒物质的培养基粉末),先加入少量的水,充分混合(注意避免培养基结块),然后再加水至所需的量。4. 3.2必须选择合适的天平和量筒,以确保称量和移液的准确性。4. 4溶解和分装脱水培养基加水后应适当加热,并不停搅拌使其快速溶解,必要时,重新溶解。含琼脂的培养基在加热前应先浸泡几分钟。用各别成分制备的培养基应将不同成分分别加入适量的水中,并充分溶解,然后再加水至所需的量。4. 5测定和调整PH5. 5.1
4、用PH计或精密PII纸测p11,必要时进行调整。6. 5.2在实验室用各别成分制备的培养基,除特殊说明外,培养基灭菌后冷却至25。C时,PH的变化不应超过0.2个单位。7. 5.3一般使用浓度约为40gL(约InIOI/L)的氢氧化钠溶液或浓度约为36.5gL(约Imol/L)的盐酸溶液调整培养基的pHo4.6分装将配制好的培养基根据使用要求分装到适当的容器中,并及时密封好。4.7灭菌4.7.1分装好的培养基应当天进行灭菌处理(2小时内灭菌最佳)。4.7.2实验室采用湿热灭菌对培养基进行灭菌处理,按照培养基使用说明采用合适的灭菌温度和时间。4.8保存制就的培养基不宜保存过长,以少量勤做为宜。培
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