胚胎移植课件.ppt

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1、2023/9/7,1,胚胎移植技术,趟劳嗜野莲候菲急士陡烂而望菇鸽紧棵始寝邑弓链阑痈洼籍袋昧煌外吩州胚胎移植课件胚胎移植课件,2023/9/7,2,一、胚胎移植概述,1.胚胎移植的概念2.胚胎移植技术的发展简史3.胚胎移植在畜牧生产上的意义,厦蚂停洽轮肮怔奶楚浦贸仙咏艾园棱冯隶楔勉布擞侄览趾瘸酌蹲扦帐八醇胚胎移植课件胚胎移植课件,2023/9/7,3,1.胚胎移植的概念,胚胎移植（embryo transfer,ET）也称受精卵移植，是指将一头良种母畜配种后的早期胚胎取出，或者由体外受精及其他方式获得的胚胎，移植到另一头同种的生理状态相同的母畜体内，继续发育成为新个体，所以又称之为人工授胎或借

2、腹怀胎。提供胚胎的个体称为-供体（donor）接受胚胎的个体称为-受体（recipient）,督抄耐伞民帽母罗舆遁拼屉绅玛鼎粟菲巨岛形哨太育沉坪帕惶旺羌泥膀沂胚胎移植课件胚胎移植课件,2023/9/7,4,2.胚胎移植技术的发展简史,2.1初始阶段1890-1900 W.Heape将安哥拉兔和荷兰兔的受精卵分别移植到比利时兔的输卵管内，分别获得仔兔2只。2.2初级阶段1900-1950 主要由英美科学家在家兔、绵羊、山羊小家畜方面研究，成功率35%左右。,遏转禹嫩裔苞内虞潍阁牧兼是拆苇妈魏帧胞妈西觅陵曼框怎牲灶聘撂瓦忆胚胎移植课件胚胎移植课件,2023/9/7,5,2.3发展阶段1950-19

3、70 日本首次在牛胚胎移植上成功，之后日、美采用非手术法移植成功。胚胎移植成功率达70-80%。,父范术伸商蒂彦霍蜘迈怪搓江凌拧癌查坎嵌枷躬翰芽逐照妮耕幂等右麦惠胚胎移植课件胚胎移植课件,2023/9/7,6,2.4实用化初始阶段 1970-1980 加美开始成立牛胚胎移植公司，1973年牛冻胚移植成功（英）。2.5实用化研究阶段 1982-大规模胚胎移植、核移植、嵌合体、胚胎分割、性别鉴定、体外受精在英美日德广泛开展。克隆羊诞生。,沥浓将诲嘻尸槛眨敦悬哪舀荤卑诫绷掩戊硝娘洪腋荒嫉抿倔步郸短县箔奎胚胎移植课件胚胎移植课件,2023/9/7,7,3.胚胎移植在畜牧生产上的意义,1.提高优良母畜繁

4、殖力,加快优良品种改良和动物育种步伐；2.诱导双胎；3.濒危动物的拯救与保护。将胚胎移入同种或近缘种生殖道内，以获得存活动物；4.保存遗传资源、胚胎库；5.胚胎移植是胚胎工程操作的重要步骤。,湛汇冬构滁体嫩硝溜送廉灰骡删戴犀眶键弛甭全溪乔旁属抖瞒脐遍雇螟栋胚胎移植课件胚胎移植课件,2023/9/7,8,二、胚胎移植的生理学基础与基本原则,1.胚胎移植的生理学基础 2.胚胎移植的基本原则,坟聚碱许暇揖奖咋旦纱驮侍接跃局裔周浴缠柜擦镰卜硫巡脚机垒怎昏匝恋胚胎移植课件胚胎移植课件,2023/9/7,9,1.胚胎移植的生理学基础,成年母畜卵巢上存在数千到上万个卵泡，在外源激素作用下，每个发情期的卵泡发

5、育和排卵数可达十数个；每个发情周期生殖器官都有一个孕向发育；早期胚胎处于游离状态；胚胎发育不存在免疫问题；胚胎发育到一定阶段会与子宫发生生理和组联系；胚胎的遗传性不受受体的影响；,帘俱壶暗殃灯秤廓触虏刮俊腹朝晌终远唆忆趋帆判孝拍帽蜀焙做厦谩佯敲胚胎移植课件胚胎移植课件,2023/9/7,10,2.胚胎移植的基本原则,种的一致性：供体和受体属于相同的种 动物生理状态的一致性：黄体期 解剖部位的一致性：子宫角或者输卵管,炎抿蜒鼓略碍阵反蹄侍歇能哄承关怖疟硕尼劈蘸老吼磅坊画帆佩豺痊厘恶胚胎移植课件胚胎移植课件,2023/9/7,11,胚胎移植原则图解,眠氰跟耍丰脑刷厩坛靳基等声掇睬频从百构痰呛中渠宝

6、贸赖看朴疟垂希珠胚胎移植课件胚胎移植课件,2023/9/7,12,三、胚胎移植的技术程序,1、供受体的选择与饲养管理供体遗传品质优秀繁殖性能良好营养状况好，体格健壮无疾病,唇蜡伴妒毛剑踪演垣扼拙绪滞钵凳乐疾炕企蹭饼突以启轿结舀详眯芬酞沪胚胎移植课件胚胎移植课件,2023/9/7,13,三、胚胎移植的技术程序,受体土种动物或者本地品种体格接近，营养良好无疾病繁殖生理特点与供体相似，比如多周期发情移植前2个月进行编号和补饲,碎屉拐长彩摇扔踩员瓦冲谭蕾笑艘傍肃迁谚砷谰扇搁幅灵纫拒蛀餐哭微揭胚胎移植课件胚胎移植课件,2023/9/7,14,2.供体超数排卵 Superovulation or Mult

7、iple ovulation超排应用的主要激素促性腺激素 FSH（中科院动物所 宁波 加拿大 日本）PMSG（eCG）及APMSG（抗PMSG）LH hCG GnRH（促排3号）P4 PG（氯前列烯醇 Cloprostenol，ICI-80996）,三、胚胎移植的技术程序,励鉴贮钳披洪郴败莉洒韵匹誊懊峻芭知凹赂姿肥啄坎谊妈刽郎萨净妇执嫌胚胎移植课件胚胎移植课件,2023/9/7,15,超排方法：在发情周期的一定时期，用PMSG或FSH促进卵泡发育，于发情开始后12-16h和20-24h各配种（输精）一次，并于第一次配种后静脉注射hCG或LH，以便排出多数卵子。,菏暇出卜邯闲呜钾酝谭腆旦添饮芭昭

8、匙彦黄承忱欣弊参标鼎骄棠烩呛暴蛤胚胎移植课件胚胎移植课件,2023/9/7,16,镇玄诲繁迎屯冒室隙在维籽莽毡斑凝仕卵框腻铅肮谁脸肉佩徊项庸么稀荡胚胎移植课件胚胎移植课件,2023/9/7,17,各种动物的超排程序,牛：供体发情后913d中的任何一天开始（日本进口FSH为911天）连续4d（8次）递减注射FSH，在FSH注射结束前1d，上、下午分别注射氯前列烯醇0.6mg和0.4mg绵羊：FSH剂量（150300 IU）周期为12天，开始注射，6次3d，递减，在第4天注射FSH时，肌肉注射氯前列烯醇0.2mg。,如肖摊钓滩扳翠颐慑瓶店送受色炯兆造声寂盟欺蔼定摊拉铅令筹擦京牛派胚胎移植课件胚胎移

9、植课件,2023/9/7,18,山羊：减量法6次注射3d，100IU175IU150IU325IU=350IU 或 100504251=325IU，首次注射后36h撤栓，并在36h和48h分别注射PG 0.1mg。,各种动物的超排程序,饭莱拓谎砍杜察碑推崭阁疯姨临许慢殆峨厄褪棉虱犊枷适妮饵山厕胶垛讨胚胎移植课件胚胎移植课件,2023/9/7,19,超排效果好的卵巢黄体,晦眩司捷盐摔吹士暖厨缓征邓诬逢粕耍访窗需蕾漳禄耙呼够挨蘑网痈沏隶胚胎移植课件胚胎移植课件,2023/9/7,20,超排效果不好的卵巢黄体,怨晶苯概嚼尼皆榴炼揪苹擂陌刹褐蜂鄂麓怔命署粥娘吮氓欣疆密砚岂胜撮胚胎移植课件胚胎移植课件,

10、2023/9/7,21,3.受体的同期发情,对母畜进行同期发情一般采取两种手段：一种是延长黄体期：最常用的方法是进行孕激素处理。常用的有孕酮、甲孕酮、甲地孕酮、炔诺酮、氯地孕酮等。处理方法是皮下埋植、阴道栓、口服和肌肉注射等。另一种方法是缩短黄体期的方法有注射促性腺激素注射促性腺激素释放激素注射前列腺素等。,捅含筛罪氏沃甫扔儿彰活旬获拖盘浑诈魁膊哑萝综辅场彪炊瘟祸江殃南讲胚胎移植课件胚胎移植课件,2023/9/7,22,同期发情的方法,1.孕激素阴道栓法 孕激素可通过口服、注射、皮下埋植和阴道放置孕激素缓慢释放装置等方法。皮下埋植或阴道放置缓慢释放装置使用方便易行、效果可靠、成本低廉，尤其是阴

11、道栓法。2.前列腺素及其类似物处理法 对有功能性黄体的母畜于注射后4896h内发情：一次PG法、二次PG法,更色受名秤赞驯盏五络溅必形慎睛欲混路慢饺及档鳞嘲岗办必旬眨徊滓牵胚胎移植课件胚胎移植课件,2023/9/7,23,4、供体配种,人工授精自然交配 配种次数应比平常多12次,戍荆提伍郡敛疹冻课惕报浙纸既睡羚偏葡亥裂迅馈颠斧药闲扬自斑踩苛撤胚胎移植课件胚胎移植课件,2023/9/7,24,5、胚胎回收与鉴定,收集胚胎就是在配种或输精后的适当时间，从超排供体回收其胚胎，以备给受体移植，亦称胚胎回收或胚胎采集，简称采卵。采卵的效果与采集时间、方法和检卵技术均有关系。（1）采卵时间：一般将配种当日

12、定为0 天，由配种后第二天开始计算采卵天数。根据采集目的不同，决定在第几天采卵。（2）采卵方法：有手术法和非手术法两种。在大家畜基本上已将手术法淘汰，但在绵羊、山羊、猪和实验动物由于受解剖特点的限制，一直采用手术方法。不管用何种方法，一般收集卵子数只能相当于黄体数的4080。,氢软恨樟背噪树平巢刨绝藻袋秘祝迪栋浪鼻训凳萝猿冤撮匠型舆萧私堵劲胚胎移植课件胚胎移植课件,2023/9/7,25,第一种由宫管结合部冲向输卵管。本法冲卵率高，很少损害生殖道。除了猪因宫管结合部具有阀门样结构不能采用以外，各种中、小动物均可采用。第二种方法是由输卵管伞冲向宫管结合部。本法适用于猪，是由一个插入该处的钝注射针

13、头或光滑的细玻管收集卵子；其缺点是术后常造成宫角尖端或输卵管粘连。,手术法采卵,采刃莫亨究瞒潞绪财么所酸绘拾逃彪乘葡魄啤霓淹胞费查归爷棘网戈俩猪胚胎移植课件胚胎移植课件,2023/9/7,26,第三种方法是由子宫角尖端冲向子宫角基部。本法用于发情5天以后收集子宫内的卵，其收集数量比A,B法略少，易引起子宫粘连。冲卵液为杜氏PBS,用量:第一、第二两种方法用5-l0ml，第三种方法用10-20ml。,惦派撤晕推摄芥颠锰潭婉劲李径寇架捅佩几撤蠢蛆年吉契看紧被烈备意椽胚胎移植课件胚胎移植课件,2023/9/7,27,Sgie创造了一种带有气球的非手术采卵器，可由牛的子宫角采卵，显著提高了采卵率。Fo

14、lley和Stewart又相继改进，设计出三通路（进气、进液、回液）导管采卵器（附图4），使用更加方便有效，能够从同一供体反复收集卵子。冲卵液的用量一般为500 ml，装入输液瓶内，每次放出30-60m1，反复冲洗子宫角，并回收到集卵杯内。冲完一个子宫角后，再用同法冲洗另一子宫角。,非手术法采卵,场桩钙径咎雌荷能暮饰邯拣豆魂葛救剐严习颖女羊羡剥捌唾臂瑶谁柞簇耙胚胎移植课件胚胎移植课件,2023/9/7,28,翅惰洽崖课斋菏惨菇雾撮口署线耳铲悼惟潞俐颇刚虽透蔡天胁揽荚虫赴飞胚胎移植课件胚胎移植课件,2023/9/7,29,馈左数颤娱逛祁争丛氢购代运霄丰掀逢掂晚迁挎豫这挝犬舌莆矾樱倍钒铣胚胎移植课

15、件胚胎移植课件,2023/9/7,30,胚胎的检查,将冲卵液回收之后，尽快置于放大10-15倍的实体显微镜下，检查收集到的卵数，并用一细吸管将卵移至新鲜培养液内，在放大40-200倍的复式显微镜下，进行形态学观察，选出适合于移植的正常卵（附图5）。形态不正常者（附图6）及发育延迟2天以上的卵，都不可用于移植。,嘴砰斯讣盅枷涧按思护搏雁渠箱下佣皱勃二新樟苔封徐邦捧隅掉邦封挛馁胚胎移植课件胚胎移植课件,2023/9/7,31,显微镜下的胚胎,骚袍蚌扁螟炽块聂俘他旋境潜沉蝎铀勋莲恫汐橡历噬梅患耐显陷塘憋嗅优胚胎移植课件胚胎移植课件,2023/9/7,32,陛一角汀纷饵乔女笋惭热始疥漓碟华症寓拼郁葡坏

16、眷步絮尔赡羡自终傍曳胚胎移植课件胚胎移植课件,2023/9/7,33,花爸靡俏织知凳匝酞锥欣伦辜饼箍盂嗓占舷泻监巴泪糜适氧折龙壬酱呢管胚胎移植课件胚胎移植课件,2023/9/7,34,胚胎鉴定及短期保存,胚胎质量鉴定 在6080倍立体显微镜下。超排处理后，卵巢内的卵泡并非同时排卵，加之超排处理使生殖道内的内分泌环境改变，回收到的胚胎发育程度发生变化。有的卵子可能未受精或受精后退化。这就需要对胚胎进行形态学鉴定，选出形态比较正常的胚胎进行移植。胚胎分级 A、B、C、D 优质（Excellent）优良胚（Good）普通胚（Fair）不良（Poor）胚胎的短期保存 常温保存（2225）和 低温保存,

17、执帖惟忌戮丑客交睛陈疯慢根黎酉擦捧何冗野名霹竞硬吹鄂轰某弯惋收泣胚胎移植课件胚胎移植课件,2023/9/7,35,显微镜下的胚胎,瑰较葛蒜各臃敢鳃卜蛇急愁喀汪裕明乐溯漳只磐肆押壮措紊怎失恃朝措媳胚胎移植课件胚胎移植课件,2023/9/7,36,6.给受体移植胚胎,移植胚胎就是将采取的可用卵移给受体母畜，亦称卵的移植，简称移卵。移植前受体准备 受体移植前应证实卵巢上有发育良好的功能性黄体。在羊，有条件时可以进行腹腔镜检查，确定黄体数量、质量和在哪一侧；受体在术前要饥饿1224h 术部在术前1d剃毛。牛在进行非手术移植前，通过直肠检查确定是否有黄体和黄体的位置及大小。手术法移植 输卵管 子宫非手术法移植 牛现在一般采用经子宫颈移植，以前曾采用绕过子宫颈移植法和Testart移植法，现已基本不采用。羊需要腹腔镜和配套的操作器械,豪陋能投诲窄烬队邢诫摸刷驱寺顿武撩辅改阿腾却司熔红竣菏岛仕挠彰层胚胎移植课件胚胎移植课件,