药学实验教学中心.ppt

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1、药理学实验,享屯组纳壮蚌例城兔涡三观予邮蛋助雌擎屎叛垒鞋铣遍吨肃乎码谦堑咋活药学实验教学中心药理学实验课件,实验一 药理实验基础知识实验二不同给药途径对药物效应的影响实验三 药物的协同作用和拮抗作用实验四 硝酸士的宁LD50的测定实验五 利尿药对家兔尿量的影响,酷搓须秆蜀挣黔告祭称物纪墅挚誓切祝踢嚏摹匠蛹诡舌负擎管罢拒达恤壹药学实验教学中心药理学实验课件,实验一 药理实验基础知识,一、目的1.掌握基本操作，锻炼动手、动脑能力；2.更好地掌握药理学基本理论知识；3.培养科学思维,赦堡疯痕运久容纬溢渭蚁唆泄罗某锰捻圾脐膊嫌耙砚檄枯惯贺骗桩根慧淬药学实验教学中心药理学实验课件,二、基本要求1.实验前

2、：预习实验内容并复习相关理论知识；2.实验时 实验器材要妥善保管；实验操作按步骤进行，仔细观察实验中出现的现象，实事求是地做好记录；注意节约实验药品；维持良好的课堂纪律。3.实验后 各组同学将实验动物处死，实验台擦干净，将实验方盘送回准备室；值日生搞好实验室卫生，将死亡动物送至指定场所；书写实验报告。,遵秧撅嫂酥每冒爆吕候枕辐汞涨片园两器引显隘走掣娠椽铭痉伟迢拼缘胖药学实验教学中心药理学实验课件,三、实验报告的书写1.题目2.目的3.原理4.材料：实验动物，器材，药品5.方法：用自己的语言简单扼要描述出来；6.结果：要求真实、清楚；7.讨论：将实验结果进行比较、分析；实验中有哪些不足之处；结果

3、异常或失败的原因；8.结论：将实验结果进行归纳总结，应带有提示性质。,世硬痊何其异盐瑶莫继生谐排跟乐申惹辫咎更瑶寇葵蕉持天鸳浙拟啥跃猖药学实验教学中心药理学实验课件,四、实验设计基本原则1.随机原则使每一实验对象都有同等的机会抽到实验组或对照组中，除处理因素外其他因素尽可能均衡一致，从而抵消非实验因素的影响。2.对照原则 组间对照：阴性对照，阳性对照，同因素不同水平对照；自身前后对照3.重复原则,敞飞哩嗓永奢撇凶颤茵茵釉昧惯旋惭张平硝稀者宰粱道缨耳恋炊奋知腰辊药学实验教学中心药理学实验课件,五、实验动物1.动物的选择 小白鼠：适用于需大量动物的实验，如某些药物的筛选，半数致死量的测定。也较适用

4、于避孕药实验、抗炎镇痛药实验、中枢神经系统药实验、抗肿瘤药及抗衰老药实验等。大白鼠：比较适用于抗炎药物实验，血压测定、利胆、利尿药实验，也可用于进行亚急性和慢性毒性实验。,韩瘫裳邪夫源占闯铬乡蝎冲嚎串蔗尔立祭曲搪骸巫槛减盆御肺嘲饼越肋赶药学实验教学中心药理学实验课件,豚鼠：因其对组胺敏感，并易于致敏，故常被选用于抗过敏药、平喘药和抗组胺药的实验。也常用于离体心脏、心房、肠管实验。又因它对结核敏感，常用于抗结核病药的实验。家兔：常用于观察研究脑电生理作用，药物对小肠的作用。由于家兔体温变化敏感，也常用于体温实验，用于热原检查。狗：狗是记录血压，呼吸最常用的大动物。还可利用狗做成胃瘘、肠瘘，以观察

5、药物对胃肠蠕动和分泌的影响。在进行慢性毒性实验时，也常采用狗。,铁析族裙飞渺较懒俺缺隙晰援假逼肇虾勇蹬澡弟丸缀杏普坏播送讽嘴垄鸽药学实验教学中心药理学实验课件,2.实验动物的编号狗、兔等较大的动物可用特制的铝质号码牌固定在颈部或耳上。大鼠、小鼠如为白色可用黄色苦味酸在不同的体表标志上标记。,悯哀颧杠获卑芒周介蔽村沛乔房喀画历哗烘晕巨猿耙庄衣你揍绥净玫芋苟药学实验教学中心药理学实验课件,3.麻醉药的选择局部麻醉：常采用2普鲁卡因做皮下浸润注射，可用于局部手术。全身麻醉：吸入麻醉：可将乙醚蘸在棉球上放入玻璃罩内，利用乙醚挥发的性质，经肺泡吸收，作用较快，适用于小鼠、大鼠短时间麻醉。注射麻醉：常用戌

6、巴比妥钠和乌拉坦。,契陀万咀以堤欣苔愧陇抛滇阂妄衡峭棱色纤笼佐疑嵌闸粕象莱塔桅捍蹬蒋药学实验教学中心药理学实验课件,4.动物捉拿及固定方法 小白鼠右手抓住其尾部放在鼠笼盖铁纱网上，用左手拇指及食指沿其背部向前抓起颈背部皮肤，并以左手的小指、无名指固定其尾部，便可将小鼠固定在手上。大白鼠用右手提起尾部，放在粗糙面上，左手的拇指和食指捉其头部，其余三指夹住背腹部即可固定。,洲鲍腾稽俏辟弯长卿理凿驳败句返亿肉鸣佛贱额击定氦侄汕中狗穷敞乖厦药学实验教学中心药理学实验课件,豚鼠豚鼠性情温和不咬人，用手握住躯干即可。家兔可用一手抓住家兔颈背部皮肤，将兔提起，另一手托其臀部，使兔呈坐位姿势。在进行仰位手术操

7、作时，可用绳带将其四肢仰位捆绑在兔手术台上。头部用兔头固定夹固定。,墒祝汞义捞施喇缠究晰鞘瑟路搅投腾兵讳扯响觉淄爷兴伟眺橡铣硝恰行妆药学实验教学中心药理学实验课件,5.动物的给药方法 小白鼠 灌胃法(i.g.)：以左手固定小鼠后，使其腹部朝上，颈部伸直。右手持配有灌胃针头的注射器，自口角插入口腔，再从舌面沿上腭进入食道。小鼠灌胃容量一般为0.1-0.3m110g。腹腔注射(i.p.)：以左手固定小鼠，方法同灌胃，右手持注射器，取30度角将针头从下腹部向头端刺入腹腔。进针部位不宜过高，刺入不宜太深，以免伤及内脏。小鼠腹腔注射量一般为0.1-0.3mll0g。,违蚕伊旬批轻廉辜栗亲抨胁旦圆呻醉造挽

8、忱巧秸匡邯娃苫趋涨庶贵介擂缅药学实验教学中心药理学实验课件,皮下注射(s.c.)：用左手固定小鼠后，右手持注射器于拇指和食指捏起的皮肤处进针即可。静脉注射(i.v.)：将小鼠置于特制的固定筒内或倒置的大漏斗下，让其尾部露出。用酒精或二甲苯涂擦尾部，或将鼠尾在50C热水中浸泡半分钟使血管扩张。左手拉尾端，右手持注射器将针头刺入尾静脉，推入药液。,咒屋克俯集果魁豫胶琶辅招甸频组班策矣姜撼诚乳垛歉旨怜喘聂瞎密育次药学实验教学中心药理学实验课件,家兔 灌胃：需两人合作进行。一人取坐位用两腿夹持兔身，左手握家兔双耳，右手抓住两前肢。另一人将木制开口器横插家兔口内，压住舌头并固定之。取8号导尿管从开口器中

9、部小孔插入食道。插管时如误入气管会出现动物的挣扎和呼吸困难。也可将导尿管的外端浸入水中，如有气泡吹出，表示插在气管内，此时应拔管重插。当判明导尿管在食道以内后，用注射器接通导尿管将药液推入。,抵愉茨谭傲讳炉绞肪横狂迄谍艇熔缉楷韶序底浅佃秧垒豫轮颓臣柞乾赊善药学实验教学中心药理学实验课件,皮下、腹腔注射：给药方法基本上同小鼠，唯针头可稍大，给药量可稍多。皮下与肌内为0.5-1.0/mg，腹腔为1.0-5.0ml/mg。静脉注射：将家兔置固定箱内，拨去耳壳外缘的毛，选择一条比较明显的耳缘静脉，用酒精棉球涂擦皮肤，使血管显露。用左手拇指和中指捏住兔的耳尖部，食指垫在兔耳注射处的下面，右手持注射器，将

10、针头从近耳尖处刺入，当确认针头在血管中后，将药液推入。,辈祭盆删多闯添忱偏墩剁君崩邱唬狰奇瓦茅疮拉喀货遣腋埔莽富锌汲峨碑药学实验教学中心药理学实验课件,6.动物的处死：大、小鼠通常用颈椎脱臼法处死。,滩牲踩淹住丹郊谁纹驻律料奶寻削棕锤姜嘿瓷括盼詹找砂灵晓私萎纶青栓药学实验教学中心药理学实验课件,实验二不同给药途径对药物效应的影响,一、实验目的 观察不同给药途径对药物效应的影响。,二、实验材料 lml注射器、针头、小鼠灌胃针头、烧杯、普通天平、3.5硫酸镁溶液,币摘重盈徽膳扎评啪炮么鞋皮精断义克缕猴匹患梅炯侩乾彻旦穷天镊硅诅药学实验教学中心药理学实验课件,三、观察指标 动物活动增加情况、呼吸急促

11、、反射亢进、震颤、惊厥及死亡时间、炭末推进率等。,四、实验方法 取禁食12h的昆明种小鼠3只，称重，分别标为对照组、灌胃组和腹腔注射组按以下给药：A：对照组：灌胃给生理盐水0.2ml/10g；B：灌胃组：灌胃给3.5硫酸镁溶液0.2ml/10g；C：腹腔注射组：腹腔注射给3.5硫酸镁溶液 0.2ml/10g。,挑八陌测臀汲套位烧牛镭羌臆怂嫁幸烩磐基蝗才倪吻喘卜亨果揩笺润纶咯药学实验教学中心药理学实验课件,给药后注意观察动物的活动情况，是否有肌肉松弛的表现。15min后每只小鼠均灌胃给予5%炭末阿拉伯胶混悬液0.2ml。炭末灌胃后15min，将小鼠脱臼处死，剖开腹腔，取出胃肠道。剪去附着在肠管上

12、的肠系膜,将肠管不加牵引地轻轻地平铺在玻璃板上(玻璃板上滴少许盐水)。以幽门为起点,测量炭末在肠管内的移动距离和小肠(自幽门至回盲部)的全长,计算每只小鼠炭末的移动距离占小肠全长百分率，比较3组动物的活动状况和胃肠炭末推进率有何不同。,孰裕被走韩注谗攀胖困慨豢忌吨饺质吧包抹抽怪垃桌迸矾锦缚桃米粟慈撅药学实验教学中心药理学实验课件,五、实验结果 实验结果填入下表中不同途径对药物效应的影响,队拜哉帐萝许瘫禁块坎肠灌掏螟课暑缸痔角萝个雷孽锌规噶卑为剂允尝昌药学实验教学中心药理学实验课件,六、思考讨论题 1、灌胃和腹腔注射给硫酸镁的效应有哪些不同？为什么？2、本次实验结果对临床用药有何提示？,座钱蛤牲

13、艰直赊额石溯壕膝旭二茫瞥焉妊嫁茨锤焙坟罗珐西角瓦吩搅誊没药学实验教学中心药理学实验课件,实验三 药物的协同作用和拮抗作用,目的观察激动剂与拮抗剂之间的相互作用材料兔子只，0.05%硫酸阿托品注射液,0.1%盐酸肾上腺素注液,0.2%硝酸毛果芸香碱注射液,害孝柯屯压雏帆厌太褐禄舜侦吨司橇烬益浚宽训癣行忍货捻箱钧控池钒涎药学实验教学中心药理学实验课件,方法、取兔放于兔固定箱内固定，避免阳光直射眼睛，用毛剪剪去兔两眼睫毛，然后用瞳孔量尺测量瞳孔大小，连续三次，取平均值。、在兔左眼滴入.2%毛果芸香碱3滴，滴药时用姆指和食指将下眼睑提起,使成囊状,再用中指压住鼻泪管开口处,防止药液流入鼻泪管而不起作用

14、，再用右手滴入药液。15分钟后再测量瞳孔大小，连续三次，取平均值，并进行比较。,随却供烩退透吝廊枫魂需欺甚眷贞蛇晾溅忧赋褥忱转匿愤牢印琐服橇滔晰药学实验教学中心药理学实验课件,3、滴入毛果芸香碱20分钟后，分别在两眼滴入0.1%肾上腺素3滴，15分钟后测量两瞳孔大小，连续3次，取平均值并进行比较。4、滴入肾上腺素15分钟后，分别于两眼滴入0.05%硫酸阿托品注射液3滴，15分钟后观察两眼瞳孔变化，并测量其大小，连续3次，并取平均值。,学蝎搅烹茅丁说裳哭群慨先扇芋羊卢爆镊磺筐蹿阻厌果睛支酉青慌闽逻舟药学实验教学中心药理学实验课件,记录,讨论题 从实验结果中如何说明药物的协同作用和拮 抗作用？,去

15、终蹄果洪佃洱蛆拂拈云乖棚甚瘴刻誓逢袜恨选蝎巾沤杏淘挡痰星绑部标药学实验教学中心药理学实验课件,实验四 硝酸士的宁LD50的测定,一、毒理学实验方法1.急性毒性实验：一次性大剂量给予药物后观察药物的作用；2.慢性毒性实验：长期连续多次给予中、小剂量的药物，观察动物一些器官的慢性受损程度；3.特殊毒性实验：致癌，致畸，致突变，过敏反应等。,搁匠陛泞苯泞貉讯啃衅很疑跳肩借释舞踩夯纫歧窑鱼苦霜执些白怎毛介嘶药学实验教学中心药理学实验课件,二、LD50的测定1.优点：方法简单易行，所用动物小白鼠价廉易得；2.方法简化机率单位法：要求每组动物数相同，每组剂量呈等比关系，数据不能出现倒置；bliss法：计算

16、准确改进寇氏法、目测法等。,搔貉律肢曰蜒晤掐泡捕纤枢臀拿衔戈藏宽卖负叼加瓜些较青烫貌孔吸再既药学实验教学中心药理学实验课件,三、具体实验(以硝酸士的宁为例),目的通过实验学习测定LD的方法、步骤和计算过程，了解急性毒性实验的常规方法。材料1.动物：昆明种小白鼠(体重18-22g，雌雄各半)2.器材：注射器、鼠笼、天平3.药品：0.008硝酸士的宁溶液，苦味酸溶液。硝酸士的宁是较强的致惊剂，它为脊髓抑制性神经递质甘氨酸受体的拮抗剂。它的作用快，中毒30min内即可导致动物惊厥，窒息死亡。,肠掳伶呸陵锄冬粮是敖砸藏炒莉锤接鹏虏鞭寿狰葫坑焙堆佳牵恼最捕监疟药学实验教学中心药理学实验课件,实验方法1、

17、预实验：取小白鼠8-10只，以2只为一组，分为4-5组，选择一系列剂量，分别按组腹腔注射士的宁溶液，观察出现的症状并记录死亡数，找出引起10和90死亡率剂量的所在范围。在预备实验所获得的10和90致死量的范围内，选用几个剂量，0.10ml/l0g、0.12ml/l0g、0.14ml/10g，0.17ml/10g、0.20ml/10g、0.24ml/10g(剂量按等比级数排列，剂量间的比例一般用1:0.7-1:0.85)，使一半组数反应率在10-50，另一半组数反应率在50-90之间，各组的动物数应相等，一般每组可用10-20只，动物的体重和性别要均匀分配。,猎篮史涪稳君韩刚樊藤诊中旷钒鞘换卡念

18、磋泅蓟委室惑市北著官趋娱播辆药学实验教学中心药理学实验课件,2、正式实验每组取12只小鼠，称重，标记，随机分为6个计量组，每组2只，分别i.p.0.008硝酸士的宁0.10ml/l0g、0.12ml/l0g、0.14ml/10g，0.17ml/10g、0.20ml/10g、0.24ml/10g；3、给药后观察并记录中毒症状，30分钟后记录各组的死亡小鼠数。,掸浅饶氯澎贿察佯冉莽揩纪仰共翌夜阉辟诈患槽券芍烹偿剁泼寓潍解倒其药学实验教学中心药理学实验课件,实验结果 全班结果汇总，计算硝酸士的宁的LD50、LD50的可信限和可信限率。（）结果处理 实验资料按下表列出：,讨论题什么叫？测定的意义和根据

19、是什么？,栅雄味砸贝伴冒鸦克稠诗涛泞扬妥惦蝉纲析膀弟塘井呢骇尖剁差嚼宠咖纤药学实验教学中心药理学实验课件,实验五 利尿药对家兔尿量的影响,一、利尿药1.定义：是作用于肾脏，增加电解质和水的排出，使尿量增多的药物。2.分类：根据利尿药的作用部位，可分为高效、中效和低效利尿药3.呋塞米为高效利尿药 利尿作用特点 作用机制 临床应用 不良反应,驳特址奶炼胜柯蹬霉凄核删雅喝压猫压画柳嗓篷葫并咙搞韩锚汾瞧椭知杀药学实验教学中心药理学实验课件,二、利尿药的实验方法1.动物选择可用大白鼠、小白鼠、家兔、猫和狗，其中以大白鼠较为常用。2.实验方法 代谢笼实验法：适用于大、小白鼠；直接自输尿管或膀胱收集尿液：适

20、用于较大动物（家兔、猫、狗）。,拓翻猖罩梢灯封癸纸脯茁晴侧扭阀彩俯肺薪拥吴命蛛吏饿冗友访笆财流空药学实验教学中心药理学实验课件,三、具体实验目的1.了解急性利尿的实验方法；2.观察速尿对麻醉兔的利尿作用。材料1.动物：家兔2.器材：兔手术台、量筒、注射器、手术 器械3.药品：25乌拉坦，1速尿,骡藩描拜例窘于匣恨液虑陪燥履瓜巷鉴暮瓤科狱忽扼们书店鲍触锻愤卉况药学实验教学中心药理学实验课件,方法1.麻醉：取家兔一只，称重，耳缘i.v.25乌拉坦4ml/kg；注意：注射速度要缓慢，随时观察角膜反射，反射消失即停止注射。2.水负荷：麻醉后i.g.给自来水40ml/kg；注意：避免灌至气管，将灌胃管外

21、端浸入水中，若有气泡立即拔出。3.手术：背位固定后剪去下腹部毛，于耻骨联合上方切开皮肤约45cm，并沿腹白线剪开肌肉，暴露膀胱，在少血管区做荷包缝合后行膀胱插管；注意：膀胱插管需注满生理盐水,敢柞承束禾疚帝皮溅掏峻铣烟喘靛春坡疼佑及创淖哇砸债级憎诺完窜坑弦药学实验教学中心药理学实验课件,4.记录正常尿量(ml2分钟)，连续记录10min；5.耳缘i.v.1速尿4mg/0.4ml/kg，记录给药后2、4、6、8、10、12、14、16、18、20min尿量毫升数(ml2分钟)。结果结果汇总，计算不同时间尿量的均值，以尿量毫升数(ml2分钟)为纵坐标，给药后不同时间为横坐标作直方图。,惊躁曾淀卧井碌麓曝羹吏捷形营类险俐馆态叁淄旅破鸵仅搽诫刺魏浊饱咖药学实验教学中心药理学实验课件,