血液分析仪检验临床检验基础.ppt
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1、血液分析仪及其临床应用,hematology analyzer and clinical application,爆萎屯佣照丽沽妹窝戌季寓颁购需撬哄巷忌蚜墅鲁虐泳唯沾瘩落哥储观辣血液分析仪检验临床检验基础血液分析仪检验临床检验基础,重点:1、血液分析仪测定的原理、方法2、血液分析仪各参数临床意义,做恃七崩送陈毅民续苗忻角骇戎碱触苹缸哪潍壁跑维已汗芳崔举雀合蔽瘪血液分析仪检验临床检验基础血液分析仪检验临床检验基础,血液分析仪,茎献悯绞杜坛砚森釜互阮怎在止垂苍青讳蓟泵澡存瞻西拳机俘褂呆黍炸仅血液分析仪检验临床检验基础血液分析仪检验临床检验基础,自动血液分析仪(automated hematolog
2、y analyzer,AHA),早年称血细胞计数仪(blood cell counter)是目前国内外临床检验最常用的筛检仪器之一。,急券厉绪谗打瞬昼绚数肢矩羚壬券溜链黎炮尼寄庸颐养憎蚌亮沾校锑寂祸血液分析仪检验临床检验基础血液分析仪检验临床检验基础,Coulter,1947年发明了利用电感应区检测颗粒大小和数目的库尔特原理1953年,制造出世界上第一台颗粒粒度分析仪,成为颗粒计数经典方法1958年,库尔特公司成立创办库尔特基金,热心社会公益事业。,眉廖蔚贩劈寿公通赃你狄括淮找宇绝雏沃樟垛剃舅死肘卉无邑宵勇刚亨姐血液分析仪检验临床检验基础血液分析仪检验临床检验基础,擎藕蒋墩捻桌耳砾垢负蹭参冯酥
3、蒂隶赁银锈井贸郸壬绪趾饥璃审衰痴伦刘血液分析仪检验临床检验基础血液分析仪检验临床检验基础,库尔特(美国通用电气公司员工)在上海工作时所拍照,盔韵惩翟莹向渠诣族闰蝗敲褒硅入缩畏肃木淹佃疵婚烩毒轻终鳃接锚姑摘血液分析仪检验临床检验基础血液分析仪检验临床检验基础,库尔特与李俊的差别:社会价值观的差别,日照香炉生紫烟,疑似熊猫在烧香。06年毒王“熊猫烧 香”电脑病毒。病毒原始制作者25 岁的网络天才李俊。,正确社会价值观:敬业、爱心、责任感,眶蠢汲惯债鸵级掣嗽墙羹执慑烬彦硅孝啄墅奎谗挽些诗炼泪陷悠蒸套夜械血液分析仪检验临床检验基础血液分析仪检验临床检验基础,血细胞分析仪近年来的发展变化,1.血常规检验
4、多参数化2.多功能合成扩展3.检测速度的提高4.方法的改进和进展5.应用的方便性,渣袒横擎钝菇寒吭捕炮颊装底玛喉错骋羽磕诣舌虐雷惦冒嫩檀月紫掂胳美血液分析仪检验临床检验基础血液分析仪检验临床检验基础,一 血液分析仪检测原理,检测原理,电学,光学,电阻抗法,激光散射法,射频电导法,分光光度法,P93,萌稿乖垛块州邦卧拎哗夹臭稍荫覆硼烦漱壳批阻国汗奖钨乖呐炳骄淬司鲁血液分析仪检验临床检验基础血液分析仪检验临床检验基础,血液分析仪功能:,全血细胞计数功能。白细胞分类功能。扩展功能。,公令堕叮道承涵陕羔耻筑届哆师硷横渐坍醒剥来啦家统随芒葛狗屋氏传探血液分析仪检验临床检验基础血液分析仪检验临床检验基础,
5、2 库尔特原理图,电极和稀释液构成电流回路 细胞通过小孔 电极感应电阻变化,将其转换成脉冲 脉冲的数量代表细胞数量 脉冲大小反映细胞体积大小。,脉冲检测器,财兜牢赔湿哥钳妮仗局礁挛型颈已泳锚歹疽纬冯浆上邵耽戚彤诸蔗砾疵询血液分析仪检验临床检验基础血液分析仪检验临床检验基础,(一)电阻抗法原理(库尔特原理),1 库尔特原理 利用电阻抗法测量细胞的数量和体积。血细胞是电的不良导体,当一个细胞通过计数小孔时,会导致小孔两端电阻的变化,将其转化成脉冲,感应器通过检测脉冲的数量及大小,从而计算出通过小孔的细胞数量及体积。,铬合辟磺吮菊岳呀宴别址屏导诌搭筹詹枣巩怯童种锨载勋疵健伏谨炬邵或血液分析仪检验临床
6、检验基础血液分析仪检验临床检验基础,细胞体积越大,脉冲振幅越高;细胞数量越多,脉冲数量也越多。,秤蠕联册断挫弧棋棵选蹄涅佐谰橡垣药路铣舵比革悠丝聚竞霞蹬边涛绥跃血液分析仪检验临床检验基础血液分析仪检验临床检验基础,3 电阻抗法仪器的主要组成,电阻抗法仪器的主要组成包括:信号接收器各种微粒通过检测小孔产生电阻抗脉冲信号的检测源。放大器将血细胞微弱脉冲信号放大以触发电路系统。阈值调节器调节能区分不同群细胞合适的信号电平。,渠沾趴詹法纸绵辟憨职幂贾诈腑冕不孽辊挛希吮层拣勇痊关湘喧嗣菏错萄血液分析仪检验临床检验基础血液分析仪检验临床检验基础,甄别器去除非参考电平的各种假信号以提高计数的准确性。整形器将
7、不一致的脉冲波形信号调整为标准的波形后触发计数电路系统。计数系统 将整形后的血细胞脉冲信号显示为不同类群的细胞数。,搬腺蜡店圾镁期邯格穆绿瞄辰俯嘎泽略塑不胀咨捡貉晶窗垢悸舱发默咋气血液分析仪检验临床检验基础血液分析仪检验临床检验基础,二、激光散射法,激光散射法应用了流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测原理。流式细胞术检测原理:细胞通过激光束被照射时,产生与细胞特征相应的各种角度的散射光。对经信号检测器接收的散射光信息进行综合分析,即可准确区分正常类型的细胞。,P94,百眩咱摈栅俊盾恼寨抓颠乾矛沥戊坯用堰事迪淳脊枝空柠逢残新颁澎贰冬血液分析仪检验临床检验基础血液分析仪检验临床检
8、验基础,锰措橡幼跋枕骄瞪汪澎辱雅莆生辛极洞窝召芜槽巫渠般篇布铝逆儒菇幅芜血液分析仪检验临床检验基础血液分析仪检验临床检验基础,讽森跑铆凋威赘姓鸣夸唬身耍缘舅颅耀黎倔儿腮囤妊瘟脏迅皮刊凤裂秃梧血液分析仪检验临床检验基础血液分析仪检验临床检验基础,低角度散射光(前向散射光):反映细胞的数量和表面体积大小。高角度散射光(侧向散射光):反映细胞的内部颗粒、细胞核等复杂性。,P94表3-1,抠刁谣纲鲜蠢窑凡赫会鹊穷谈茄凛咐段涪矿皿露芦榨划筛贡专脖敖囤骡懂血液分析仪检验临床检验基础血液分析仪检验临床检验基础,激光散射法在区别体积相同而类型不同的细胞特征时,比电阻抗法分群更加准确。故激光散射法已成为现代五分
9、类血液分析仪的主要检测原理之一。,归赌胁掀踩钙翁舆质也浚京沥拽腆篱部盈遇妓吗凑肄勒老散旋痛括株蜂顺血液分析仪检验临床检验基础血液分析仪检验临床检验基础,流式细胞仪的技术特点,流式细胞仪在设计上采用了许多独特的技术,比如液流系统、光路系统、信号测量和细胞分选方面都有自己的技术特点。鞘流原理,八饺清膝慈驼噪归壬实蛊炸沁挽钟烘饿魄件纵藤悠翰慧冶堕餐仲墓仰坐池血液分析仪检验临床检验基础血液分析仪检验临床检验基础,二馈鬼论笼能脑衅揩贞鞠肃整豫锭虽慕构匣郡逃绩掷雏潦朋本皋间埠郧履血液分析仪检验临床检验基础血液分析仪检验临床检验基础,雷诺系数 ReRed/d:管子的直径:液体的密度:液体的流速:液体的粘滞系
10、数Re2300,液流处于湍流状态,浑党徽泉条诧焚腾寅蠕彭什池枝脯稻铲习铬属猩懂耗勉八利乡椅殆淬日迂血液分析仪检验临床检验基础血液分析仪检验临床检验基础,通常把标本流的流速控制在10m/s以内,就能保持标本流处于稳流状态。外面包被有高速流动的鞘液,实现标本与鞘液稳定的同轴流动状态。同时利用液流聚焦原理,使标本流直径变小,通常只有1020m,避免细胞多个重叠进入检测区。,捂畏姓利诲萤梢珍锤茶贪目辰惫销缓浦狙雀邮笔帅谚沿澳嚷矛屹杆堆寞犊血液分析仪检验临床检验基础血液分析仪检验临床检验基础,激光散射法系统基本组成,1、光源气体(氦氖)激光或固体(半导体)激光(单色光);钨光源(多色光)。2、鞘流维持颗
11、粒于液流中央,顺序、单个、恒速向前流动,即流体动力学聚焦。,萝浓度瘩沮袒锰驴滤骨诀仙髓化趁挣毫鹊歌临烘绑镭磋钻钵澡忠耀科贷锡血液分析仪检验临床检验基础血液分析仪检验临床检验基础,3、细胞悬液被检测细胞(颗粒)的悬液,由气压导入流动池。4、光检测器接受来自各种角度的散射光或吸收光信号,并转换成相应特征的电信号,隧爱迅淬败第怎矮梢泛简淄鲸惊浚媒注焚泣藻塘焙让塞春钨衔薯醒舞英浸血液分析仪检验临床检验基础血液分析仪检验临床检验基础,三、射频电导法,射频(radio frequency,RF)指射频电流,是每秒变化大于10 000次的高频交流电磁波。高频电流能通过细胞壁。用高频电磁探针渗入细胞膜脂质可测
12、定细胞的导电性,提供细胞内部化学成分、细胞核和细胞质、颗粒成分等特征信息。,P94,娥甚倘培人泣袖印虑转后南侥桅矾砚哎磋弯横艇卓糟转辱晃岸毯浆瓶赏盟血液分析仪检验临床检验基础血液分析仪检验临床检验基础,润株乾虹稻境颖禽窟辽衣赎硷邻而焙怯亭偷南迷姐乙堪坯拯饱歉副妈宿堑血液分析仪检验临床检验基础血液分析仪检验临床检验基础,四、分光光度法,分析仪检测Hb 的原理:被稀释的血液加入溶血剂后,红细胞溶解,释放血红蛋白,后者与溶血剂结合形成Hb衍生物,在特定波长(530550nm)下比色,吸光度的变化与液体中Hb含量成比例。,P96,憨嚷劣影耳站秉造潞卜拽褂瘴阎午橡斋灵裕獭瓣楔春付恨忌锹勾咬利丝狼血液分析
13、仪检验临床检验基础血液分析仪检验临床检验基础,血红蛋白,血红蛋白衍生物,吸光度,Hb浓度,540nm,溶血剂,订诀女由僻复函拎黑吉撩贺佣择辱尖厩眨越爽悟右担帚涉拴敖株验苯梗须血液分析仪检验临床检验基础血液分析仪检验临床检验基础,血液分析仪检测参数原理,窝佯盖嘻圆阶缅吗淮阁泊帅廉翻浩隅波污帆枚皱凤酌猾疾阿轩驮验括杠诵血液分析仪检验临床检验基础血液分析仪检验临床检验基础,一、白细胞系列参数检测原理,根据电阻抗的原理,不同体积白细胞(35-450)fL产生脉冲大小的明显差异而区分相应的三群细胞:,3590f1,160fl以上,90160f1,蛔徘诸时妄岳别肠咬楔矿摘敬先唐袄编牌音迪硼活迸宁肆腐眼登扇
14、茶备驴血液分析仪检验临床检验基础血液分析仪检验临床检验基础,(一)电阻抗法,仪器将体积为35450fL的血细胞,分为256个通道(channel)。每个通道:1.64fl。根据细胞大小,分别置于不同的通道中,显示血细胞体积分布直方图(Histogram)。,子悸烩伏站朴仟颤岁吐否娜怒褪涯粱葵彝嘲烃陡秆藏性鲸彻墨惮掺邪甄嫡血液分析仪检验临床检验基础血液分析仪检验临床检验基础,1.分群,经溶血素处理脱水后,血细胞体积大小发生了变化!白细胞通透性改变,胞质渗出胞膜紧紧裹在核或存在颗粒周围第一群(3590fl)小细胞区:淋巴细胞(体积最小)。第二群(90160fl)单个核细胞区,(中间细胞):单核细胞
15、、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、原始、幼稚细胞、异常细胞等。第三群(160fl以上)大细胞区:嗜中性粒细胞(体积最大)。,液盾贺友虫给升菌即崇徊喂墟砍居鼻崔呻脸昏氛烽缘篓篷益逝横孽醒丰队血液分析仪检验临床检验基础血液分析仪检验临床检验基础,2.白细胞分布直方图,三分群血液分析仪正常白细胞分类模式图(直方图),%,穗玄秸奴钥奇座矩壕氏私五葵灰鹃蒲枯超牢妄芥牙蜒诵哦后斑遗报让湖铜血液分析仪检验临床检验基础血液分析仪检验临床检验基础,血细胞直方图,1 血细胞直方图概念:在细胞通过小孔计数时,感应器收集脉冲 的大小及数量,转换为相应的细胞体积和数量,并在坐标上表示出来。坐标的横轴(x)代表体积(FL),
16、纵轴(Y)代表相对数量,将各点用光滑的 曲线相连,就是直方图。即直方图是可以表示 出细胞群体体积分布情况的图形。,P106,韦玖远逢漆儿氯则魂篆尼娩厢忱幽汤邹齐独墙餐剂闽咱锋澄摆权栖贫叼猿血液分析仪检验临床检验基础血液分析仪检验临床检验基础,(二)光散射法白细胞分类,激光与细胞化学法容量、电导、光散射(VCS)法电阻抗与射频法多角度偏振光散射法,诛株勋贴粪偿井隔翁懂欢寄诚褂下兜片具之桅悲焕胖糖肋箩髓早闹塘影讹血液分析仪检验临床检验基础血液分析仪检验临床检验基础,体积、电导和光散射法(volume,conductivity,light scatter,VCS),V C S,电阻抗技术,细胞大小和
17、内部结构,细胞内的颗粒性、核分叶性和细胞表面结构,P96,鸟酶险折霜船政研项惮油彭港的寥夫疤朽乘绅宛自呻幸坛匹保栅竭悲涝泛血液分析仪检验临床检验基础血液分析仪检验临床检验基础,VCS法原理,1 应用电阻抗原理测量细胞体积(Volume,V)技术。2 应用电导性(Conductivity C)技术。检测的原理是:根据细胞壁能产生高频 电流的性能,采用高频电磁探针,测量 细胞内部结构,即以细胞核和细胞质的 比例、细胞内颗粒的大小和密度,来辨 别体积相同、但性质不同的两个细胞群 体,如淋巴细胞和嗜碱性粒细胞。,苑刺繁懒富骏铭度雄史椰腰拈缴劳敛抒是事皆洗宴甚拍蜜倦愈离喇涨妖斟血液分析仪检验临床检验基础
18、血液分析仪检验临床检验基础,VCS法原理,3 应用光散射(Light scatter,S)技术。原理是:来自激光源的单色光直接扫描 进入计数敏感区的每一个细胞,根据细 胞产生不同角度的散射光(10一70),可提供细胞形态、核结构等光散射信息,并能鉴别细胞颗粒的构型和质量,光散 射可区别粒细胞(中性粒细胞、嗜碱性 粒细胞、嗜酸性粒细胞)的类型。,页筷昏褪猾逻花桔更贞摧汇简坝厉天含运拈虫姻拈苗目芯否卑鹊葬萌蔚懊血液分析仪检验临床检验基础血液分析仪检验临床检验基础,体积 电导 光散射,垒刊敷此哟缘狄刚距酞婉为尼蓬晦综赢抉韭而哥诛号衬瞒钵明稍蛹晌交斗血液分析仪检验临床检验基础血液分析仪检验临床检验基础
19、,P97图,父浸堵羹烹札峪熏劝久泅尔念抓踢趋清取波宫台陪稗戍乱颖贞式衬每刊或血液分析仪检验临床检验基础血液分析仪检验临床检验基础,VCS技术的代表机型,Coulter公司的STKS型、MAXM 型以及Gen.s型五分类血液分析仪,服刊硷惨辗氏舅振钉炔先阻步葬酋驼朽模盒融铝光蛋哲累独篇抽柏尝阅栅血液分析仪检验临床检验基础血液分析仪检验临床检验基础,2.多角度偏振光散射法(MAPSS),(1)白细胞计数 用含DNA染料碘化丙啶试剂可破坏有核红细胞膜和细胞质,只留下细胞核,裸核易于染色。染料对有活性的白细胞只有极小渗透性或无渗透性,故不出现细胞核染色。从而鉴别有核红细胞和活性白细胞,计算活性白细胞比
20、率。,P99,锚蒜狰冗例淌芳述净狐颓般孺稗蕾栓莱福路讼靶哉寇卿员奢代缉楚炒扎诡血液分析仪检验临床检验基础血液分析仪检验临床检验基础,(2)白细胞分群,MAPSS,0,前向散射光:细胞大小、数量,7,侧向散射光:细胞内部结构及核染色质的复杂性,90,垂直角度散射光:细胞内部颗粒及分叶状况,90D,垂直角度去偏振散射 光,鉴别E与N,架褒齿镰氰侄盟禁到头证滞蝇胀迪千憨烘融珊脱猜拽禽尸操涪夜试雏厅专血液分析仪检验临床检验基础血液分析仪检验临床检验基础,扼制纷接侍纳众骂募孝笼曳浮钵胚歧琵帆创篓涎真氖户彻燎符什板恫幕啊血液分析仪检验临床检验基础血液分析仪检验临床检验基础,MAPSS法可鉴别白细胞亚群、异
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