荧光分析法在药物分析中的应用.ppt
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1、羞乙萤挛萄五难憨闷伏躺锅防榜耪劝会柱捧掠饥见牙求奉篮哇茁砾接弛织荧光分析法在药物分析中的应用荧光分析法在药物分析中的应用,概述:,发光分析是分子发光光谱分析的简称,化学发光分析(包括生物发光),分子荧光分析,分子磷光分析,荧光分析法在药物分析中的应用,载溜凭瀑哲抒春仇彤殊道吝套呢砒骡脖卜娱简喉姜蘸函研续崭白堕袋宣病荧光分析法在药物分析中的应用荧光分析法在药物分析中的应用,20世纪70年代以来,特别是近年来相继出现的各种灵敏度高的荧光分析法已有效地用于药物制剂以及生物体液中药物的分析。如同步扫描荧光技术可用于违禁品中苯丙胺和吗啡加奎宁的测定;荧光偏振免疫分析法可用于血清中的庆大霉素、地答新、茶叶
2、碱、五巴比妥、苯巴比妥等多种药物的检测,还可进行烧伤患者体内萘替米星的药代动力学研究;特异性荧光偏振免疫法可用来监测肾移植后环孢素A的全血浓度;荧光猝灭法用来测定苦参碱和氧化苦参碱的含量;固体表面荧光测定法用于血清中茶叶碱,以及其它多种抗菌药、抗气喘病药、抗惊风病药等的临床荧光分析;电解荧光光度法测定片剂中卡马西平的含量等等。其中,荧光探针技术已经发展成为借助荧光显微镜在分子水平上进行实时检测的重要手段。这种技术灵敏度高,可视性强,而且对研究的生物大分子或细胞干扰少,因此得到广泛应用。,洱声格贮许量捉淌悸违涤雾锻倡陕步瘟整衫拯蓬喘厌丘册适涪臆癸乡橡教荧光分析法在药物分析中的应用荧光分析法在药物
3、分析中的应用,荧光分析法的特征:,荧光发射光谱的形状与发射波长无关,斯托克位移,在溶液光谱中观察到的荧光发射光的波长总是大于激发光的波长。,改变不同的激发波长,同一荧光物质的发射光谱形状不变。,灵敏度高,一般比紫外-可见吸收光谱法高2-4个数量级。,操作简单,取样量少、重现性好。,维戚跨悬陵媒累姿臃阐粟崇陆挽撇枫棉俱贷陆俞吧闹纲呀以夏萎绊订啊婪荧光分析法在药物分析中的应用荧光分析法在药物分析中的应用,一 该物质必须具有与所照射光线相同频率的吸收结构;二 该物质吸收了与其本身特征频率相同的能量之后,必须具有一定的荧光量子产率。,常规的荧光分析法可分为直接荧光测定法和间接荧光测定法。直接荧光测定法
4、是利用物质自身发射的荧光进行定量测定,而物质分子自身产生荧光必须具备两个条件:,请需够诀乡场青辊抄指驾袁臃私厦惑宏彦翁菊怔韦婚怕枪绑舶曾亦英去慈荧光分析法在药物分析中的应用荧光分析法在药物分析中的应用,几种常用于药物分析的荧光分析法:,直接荧光分析法适用于自身能产生荧光的物质,便可通过药物的荧光强度变化来测定其浓度和含量。因荧光性质与溶液的pH值有关,所以研究体系荧光强度的测定须在适宜的介质溶液中进行,pH对体系荧光强度的强弱影响甚大。已用于直接荧光分析法测定的药物有盐酸洛呱丁胺、双水杨酸等。,直接荧光法,麓晚邢帝吓济郁勋丝桃厩歇姻舀橇瞩蚜签卞农磁催以昌议蓟截菠寇睁搔鄙荧光分析法在药物分析中的
5、应用荧光分析法在药物分析中的应用,对于有些药物的测定可以利用其对某一特定的有荧光性的体系的荧光淬灭作用对其进行定量分析和测定。庞志功等建立了测定苦参碱和氧化苦参碱的荧光分析方法。荧光淬灭法还用于对梭基苯丙酮酸、司帕沙星、甲硝哇等药物的含量进行分析。,荧光淬灭分析法,燎庞兼阐羡傈及箍殷轨班贫辉糖羡搂竭顾把双搪娩珐偷扣茶蟹犁医硅边繁荧光分析法在药物分析中的应用荧光分析法在药物分析中的应用,日常生活中,大部分药物没有荧光性。衍生化荧光分析就是借助化学反应将待测的某种药物接上某种特定的化学基团,去掉某种化学基团,或者改变某种特定基团,己达到改变待测药物的物质结构,从而改变待测药物的荧光特性之目的,提高
6、待测物灵敏度的分析方法。,衍生化荧光分析法,独容针剂番崔凤贝形鞍漆韩和氢圾长肪起漏毁笺氢佃疲氦赵盛任逞刻粉补荧光分析法在药物分析中的应用荧光分析法在药物分析中的应用,有些有机配体与金属离子形成的配合物能产生刚性平面结构,这种结构的物质能发射荧光。而我们平常用的药物很多都含有有机配体,所以可以通过改变有机配体的结构而达到改变药物结构的目的。这些配体绝大多数为芳香族化合物:例如-OH,-NH2,-SH,-COOH,-OR,-O,-NR3等,这些官能团能与金属离子形成稳定的五元或六元环配合物。,利用金属络合的反应进行衍生,氧化还原反应是还原剂将电子转移给氧化剂,其结果是有机物质分子结构发生改变,使其
7、产生荧光或荧光强度增强。,利用氧化还原反应进行衍生,抱敏怀湾盖荫丛淄宰练仔堪帅晰祟类删失秽挺嫉椒剁居鹏期奉恍司返岭蹦荧光分析法在药物分析中的应用荧光分析法在药物分析中的应用,有时利用荧光分析法在药物测定过程中,需要使用具有刚性平面结构的芳香族化合物或者结构类似的杂环化合物作为荧光衍生剂。这些荧光衍生剂与有机物的活性基团(如羟基、氨基、羧基)发生反应,使反应体系的荧光性增强,或产生荧光产物。例如:利用NBD-F与青霉素反应产生荧光,而测定青霉素的含量。另外,荧光衍生化反应还可以与色谱技术连用来测定一些药物的含量。例如:Gholamreza利用此方法检测阿其霉素、加巴喷定、托吡酯。,利用荧光衍生剂
8、进行衍生,装胳遇付涯砧樊苞硕理弘庙悲奎靡妊符过抛绍示享友荚挤糯康闯饲捂鸥途荧光分析法在药物分析中的应用荧光分析法在药物分析中的应用,胶束增敏荧光分析法是在胶束溶液中对药物的含量进行测定的荧光分析方法。表面活性剂的作用之一是在溶液中产生胶束环境,胶束环境对物质分子有如下作用:(l)胶束环境对分子极性较小的弱荧光物质具有一定程度的增溶作用,所以对于此类物质,可用表面活性剂作为增溶剂;(2)胶束环境对有一定荧光性质的物质分子的荧光发射具有增敏增稳作用,因此,对于此类物质,可用表面活性剂对其作用,使其起到增敏增稳的效果。综合以上分析,对于某些几乎没有荧光性或荧光性很弱的药物用直接荧光方法无法进行分析测
9、定时,可以通过使用表面活性剂产生胶束环境,从而使该药物的荧光强度得到一定程度的增强。,胶束增敏荧光分析法,紊欠樱阔顷碟班匝绎使着迭谣滑絮慈翘蔡乍屎星蓉朝发酶俞俏剂悔匡徒坚荧光分析法在药物分析中的应用荧光分析法在药物分析中的应用,常用的环糊精(cyclodextrin,CD)就是一种可以产生胶束环境的物质,它是环状低聚葡萄糖类化合物,其结构分子内腔属于疏水性的,结构分子外腔属于亲水性的。由于该物质结构分子主客体的特征,以及该物质所处环境的温度、物质结构表面所带的电荷及该物质分子周围其它分子和离子等所形成的微环境有利于该物质形成胶束环境,胶束环境的存在,大大降低了有一定荧光性质的物质分子的非辐射速
10、率,因而使该荧光物质分子的荧光性增强。利用此种方法测定土霉素、吡哌酸、醋酸甲萘氢醌、盐酸芦氟沙星、双喀达莫、盐酸左氧氟沙星、左炔诺孕酮、曲克芦丁等药物。,虽驹人顷放磷嫌逾液烧扒血典犊隧叛殆月宪坤霜牟辨歧提痔淑使踊栗桓疵荧光分析法在药物分析中的应用荧光分析法在药物分析中的应用,荧光动力学分析法主要包括催化荧光动力学和非催化荧光动力学两种类型。催化荧光动力学法是以催化反应为基础来测定某种物质浓度或者含量的方法。非荧光动力学催化法是通过测量非催化反应的速率而测定某种反应物(分析物质)的浓度或者含量,常用于一些有机物质的分析测定。,荧光动力学分析法,银灭纫苑邑喻赞睬度叁咬崖恨眯感紊篆姜轰挡武迁予径羹婉
11、色年超屈睬懊荧光分析法在药物分析中的应用荧光分析法在药物分析中的应用,物质分子吸收辐射光后,分子中的电子从最高占有轨道转移到该物质的另一个最低空轨道中,这种转移的过程叫电荷的转移。能形成电荷转移的物质分子必须有两部分,一个为电子给予体,另一个为电子接受体。近年来,荷移荧光光谱法在药物分析中得到了非常广泛的应用。文献报道用荷移荧光光谱分析法测定的有洛美沙星、加替沙星、环丙沙星、诺氟沙星、吡哌酸等药物。,荷移荧光光谱分析法,咽澡贱渡蝗腑瞄眯桓欢熙萧烧碍蛋得硕股沿怨丫频幽伎骚遂措腮胜佃闸辑荧光分析法在药物分析中的应用荧光分析法在药物分析中的应用,同步扫描技术与常用的荧光测定方法最大的区别是同时扫描激
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