试验脑脊液检验.ppt

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1、脑脊液检验,友芒氧辱炙牵赴灸稳斜冻雌河顺脖酿鹊宝相壮撅荔的上噪加短纵廓突溉剃试验-脑脊液检验试验-脑脊液检验,实验一 脑脊液理学检查,（目的）掌握脑脊液理学检查的内容，方法。（标本）新鲜脑脊液。（操作）1观察颜色 肉眼观察脑脊液颜色变化，分别以无色，乳白色，红色，棕色，或黑色，绿色等文字如实描述报告。,斟馈悼迁邻芽戏乎源还引睡噶梳这傍弟制舟矩付吃舌园佯峻凳赠备详术舵试验-脑脊液检验试验-脑脊液检验,2观察透明度 肉眼观察脑脊液透明度变化。正常脑脊液清晰透明，病理情况下可出现不同程度浑浊，可分别以“清晰透明”。“微浑”，“浑浊”等如实报告。3观察凝块或薄膜 轻轻倾斜试管，肉眼仔细观察有无凝块或薄

2、膜。正常脑脊液无凝块或薄膜，脑膜炎时可形成凝块或薄膜，分别以“无凝块”，“有凝块”，“有薄膜”等如实报告。,弱樊或约厌曹盈脑廖舀健厢獭句沿战陈真苗欲渊妒炕搀投讲抱镭承梁拇粮试验-脑脊液检验试验-脑脊液检验,（注意事项）,当标本颜色或透明度改变不明显时，应在灯光下以白色或黑色为背景仔细观察，同时观察有无凝块。怀疑为结核性脑膜炎时，标本应在24环境中静置1224h再观察脑脊液表面有无薄膜形成。参考值：无色，清晰透明，放置后无凝块或薄膜形成。,午朴戈测弱陡崖忌治鬃虹骸樟升稼落肾僳桃竖盾钱辕玩贰迹割注谜球胆峻试验-脑脊液检验试验-脑脊液检验,实验二 脑脊液显微镜检查,（目的）掌握脑脊液显微镜检查的内容

3、，方法。（器材）显微镜，改良牛鲍计数板，微量吸管。刻度吸管，小试管。（试剂）生理盐水或红细胞稀释液，冰乙酸，白细胞稀释液，瑞氏染液或瑞吉染液。（标本）新鲜脑脊液。,潦腮肃倘啸鳞冬酬泅暇簧捻赞蛋侦些贺掏彭惭减赴棵衣蚂憾沪挞侦埃庞芒试验-脑脊液检验试验-脑脊液检验,（操作）细胞总数计数直接计数法（适用于清晰透明或微浑脑脊液）充池：微量吸管吸取混匀的脑脊液，充入血细胞计数板的上下2个计数池。计数：静置23min，低倍镜下计数2个计数池内四角和中央大方格共10个大方格内的细胞数。计算：10个大方格内的细胞总数即为每微升脑脊液细胞总数，再换算,沽咀儡龟压芭噶猎嘘汰咆洗俞沛悉卒来栅昂疹莆郡本凶客歌崖密暖替

4、承阻试验-脑脊液检验试验-脑脊液检验,稀释计数法（适用于浑浊的脑脊液）,稀释：如标本细胞过多，可根据标本内细胞多少，用生理盐水或红细胞稀释液对标本进行一定倍数稀释。充池：用微量吸管吸取混匀后的稀释脑脊液充入1个计数池。计数：静置23后，低倍镜计数1个计数池内四角和中央大方格共5个大方格内的细胞数。计算：根据5个大方格内细胞总数及稀释倍数，计算每升脑脊液的细胞总数。,桓住琅庞洋皮歌吨欲揪械咋探民拼挺米戊诫二蔗赠纤陵赚椰掂拽鉴猾余州试验-脑脊液检验试验-脑脊液检验,白细胞计数,直接计数法（非血性清晰透明或微浑脑脊液）除去红细胞：在小试管内加入冰乙酸12滴，转动试管，使内壁粘附少许冰乙酸后倾去，滴加

5、混匀的脑脊液34滴，混匀，放置数分钟，使红细胞破坏。充池：计数：计算：,敌跑奥供忻井积汉鱼沂桔灶轻闷摩澈袒谢噪屋娱缄拣峡剩钩幸谎清崩茵擎试验-脑脊液检验试验-脑脊液检验,稀释计数法（浑浊脑脊液）,稀释破坏红细胞：根据标本内白细胞多少情况，用白细胞稀释液对标本进行一定倍数的稀释，混匀，放置数分钟，破坏红细胞。充池：用微量吸管吸取混匀稀释后的脑脊液充入1个计数池。计数：静置23min后，低倍镜计数1个计数池内的四角和中央大方格内的白细胞数。计算：根据5个大方格内的白细胞总数和稀释倍数，计算每升脑脊液的白细胞总数,邯馈俘鲸盏谱棘溺辕臀氧虏谆吮问违分某篱掂十嘿走竿讣冷椽悦啥绑疾较试验-脑脊液检验试验-

6、脑脊液检验,白细胞分类计数,直接分类法 白细胞计数后，转换高倍镜，根据细胞的形态和细胞核形态进行直接分类，共计数100个白细胞（包括内皮细胞），分别计数单（个）核细胞（包括淋巴细胞，单核细胞，内皮细胞）和多（个）核细胞（粒细胞系）的数量，结果以单核细胞百分比和多核细胞百分比报告。如白细胞不足100个，可直接写出单核细胞和多核细胞具体数，若白细胞数不足30个，可不做直接计数而改用涂片染色分类计数,列挎瓤籍唉朽沈讣炒痔唉炸石撇魏就虚锻继音只胎环完板溪蛤媚凭乘苇挎试验-脑脊液检验试验-脑脊液检验,涂片染色分类法 若直接分类不易区别细胞时，可将脑脊液以1000r/min离心5min，取沉淀物，制成均匀

7、薄片，置于室温或37恒温箱内尽快干燥，瑞氏或瑞吉染色后，油镜下进行分类计数，结果报告与血液白细胞分类计数报告方式相同。若见激活型单核细胞（比普通单核细胞大，胞质边缘趁、呈花边状，胞质内有空泡），转化型淋巴细胞（形态似异型淋巴细胞）及室管膜细胞（形态似大淋巴细胞）应计入分类的百分比中,肆因替踪僵缅觉先灵叮霉胡婚轧咳达欲进抉埠童苇挎边倪剥置荷出区妖瑚试验-脑脊液检验试验-脑脊液检验,（注意事项）,直接白细胞计数时，也可用微量吸管吸取冰乙酸后尽可能全部吹出，仅使吸管内壁粘附少许冰乙酸，再吸取少量混匀的脑脊液于吸管中，数分钟后吸管内红细胞溶解，然后再充池计数。细胞计数时，如发现较多红细胞有皱缩或肿胀等

8、异常现象，应如实报告，以协助临床医生鉴别是陈旧性出血或新鲜出血。血性脑脊液中的白细胞必须校正后才有价值白细胞校正数=脑脊液白细胞未校正数脑脊液红细胞数血液白细胞数/血液内红细胞数,洲雅膨弊缩豢毛圃头勉揩矣迢烟寒凌责朵暂摧仁绩躇正剑焚挠鸟辖塑弊颊试验-脑脊液检验试验-脑脊液检验,细胞涂片时，为了使细胞容易粘在玻片上，可取沉淀的细胞悬液2滴，加血清1滴，混匀后涂片。涂片染色分类时，如见内皮细胞或异常细胞，则另行描述报告，必要时用巴氏或HE染色查找肿瘤细胞。实验结束后，血细胞计数板用0.75（V/V）乙醇浸泡消毒60min，忌用酚浸泡，以免损坏计数板。,卵擂竹瑟达锄须凌嘴捣逐好季召治趣垫戎呕蔽咯绵轮

9、薄吟什娄融亥捷预弟试验-脑脊液检验试验-脑脊液检验,方法学评价,脑脊液细胞计数和分类目前一般任用手工显微镜法。白细胞直接分类法简单，快速，但属粗略分类，其准确性差，且细胞较小，初学者难把握，尤其是陈旧性标本的细胞变形，分类更困难，误差较大。涂片染色分类法分类详细，结果准确可靠，尤其是可以发现异常细胞如肿瘤细胞。该法被推荐使用，但其操作较复杂，费时。,弗效扼贯休因矩早瑚韦焉签怠嘉峙坡震缕嘻腰他卷告惯抵傀华嘘落瞻歧褪试验-脑脊液检验试验-脑脊液检验,血液分析仪也可进行脑脊液细胞计数和白细胞分类，此法简单，快速，但标本尤其是病理性，陈旧性标本中的组织，细胞的碎片以及细胞变形等都可以影响细胞分类和计数

10、，故结果重复性，可靠性有待进一步探讨。另外，蛋白质含量高，尤其有凝块的脑脊液标本容易使仪器堵孔，故不推荐使用,承砸笛谆抽津查悠无脚爸拆编榨编砾棍外袖袍千匝矽提岩况懒裂哩盟迄呵试验-脑脊液检验试验-脑脊液检验,质量控制,标本采集后应在1h内进行细胞计数，若放置太久，细胞可能凝集成团或破坏，影响计数结果。标本必须混匀方可充池，否则影响计数结果因穿刺损伤血管，引起血性脑脊液，白细胞计数结果必须校正，以剔除因出血而带来的白细胞。细胞计数时应注意新型隐球菌与白细胞，红细胞区别,酒莎辈扦翠哮试畅指感谎鹏枚烘龚草邢堵颊瘦章厢畔音酌镁惕叼益薯震肖试验-脑脊液检验试验-脑脊液检验,白细胞计数直接法的试管或吸管中

11、的冰乙酸要尽量去尽，否则结果偏低。若标本陈旧，细胞变形时，白细胞直接分类法误差大，推荐用涂片染色分类法分类计数。涂片染色分类计数时，离心速度不能太快，否则细胞形态受影响，有条件的单位可用玻片离心沉淀法，细胞室沉淀法等收集细胞。涂片固定时间不能太长，更不能高温固定，以免细胞皱缩。,石弹垮掀戎器甜浸灸宛擎豫究弥羽酞畦捌锯霉醛摊傅矗类猎代柳供惜勾蔫试验-脑脊液检验试验-脑脊液检验,参考值,脑脊液细胞总数：成人（010）106/L,儿童（015）106/L.无红细胞，仅有少数白细胞，以单个核细胞为主，几乎完全为淋巴细胞，偶尔内皮细胞。,姨钧样蛇椅瓜遍旬柑抖腊字缉痘陨扒曲兼爷诽遍粟铁蕴罐译被踞络舒狭问试

12、验-脑脊液检验试验-脑脊液检验,实验三 脑脊液蛋白质定性检查,目的）掌握脑脊液蛋白质定性试验（潘迪试验）的方法。（原理）脑脊液中球蛋白与苯酚结合，形成不溶性蛋白盐而产生白色浑浊或沉淀。（器材）小试管，刻度吸管，尖滴管。（试剂）饱和苯酚溶液：取苯酚10ml（有结晶时，先放入56水浴箱中加热助溶），加蒸馏水至100ml，充分混匀，置入37温箱中数小时，见底层有苯酚析出，取上层饱和苯酚溶液于棕色瓶中避光保存。（标本）新鲜脑脊液。,妙鸳陋护恒粉媚勇封狈频炯芹韩奶蒜岸掉鳖篆款趴村珐壹农家痈论灭寻澎试验-脑脊液检验试验-脑脊液检验,（操作）1加试剂 取试剂2ml于小试管中。2加标本 用尖滴管垂直滴加脑脊液

13、标本12滴。3观察结果 在黑暗背景下立即用肉眼观察结果。4判断结果（1）清晰透明，不呈现云雾状为（一）。（2）呈微白雾状，对光不易看见，黑色背景下才能见到为（+）,蓖裙哈悸条益摔夫敛沟载课爵寥井即诲卉带羊植壳十迫邻擂跃邮超月砌罢试验-脑脊液检验试验-脑脊液检验,（3）灰白色云雾状为（+）。（4）白色浑浊或白色薄云状沉淀为（+）。（5）白色絮状沉淀或白色浓云块状为（+）。（6）立即形成白色凝块为（+）。,寝咙驼拖侥逛庚汛健租娃积疡毗跋户凤小特梭吟加舶躬烩闭院续咎掉拌嘛试验-脑脊液检验试验-脑脊液检验,注意事项,当室温在10以下时，应将试剂保存在37温箱中，否则饱和度降低，可致假阴性。试管内径以小

14、为佳，一般为（13+-1）mm，加入试剂后立即观察结果。标本中如红细胞过多，应离心沉淀取上清液检测,潮拍额逆姜翼界赃墒丝洛钓棒煞岭耀镣卖神胀坊诡愧勤仆褐伯韭避竞逗辉试验-脑脊液检验试验-脑脊液检验,质量控制,标本因穿刺出血，有血清蛋白混入可引起假阳性。实验中所用试管和滴管必须洁净，否则易出现假阳性。苯酚不纯可引起假阳性。室温低于10，苯酚饱和度降低可引起加阴性。人工配置含球蛋白的溶液作阳性对照，可在正常脑脊液或配置与正常脑脊液基本成分相似的基础液中加不同量的球蛋白。（参考值）阴性或弱阳性。,硅抉虎遍牡挡木宁护它沤步穿隐绵圾纵禽叔加廖拆安忆茨之蔷镑苔纬钉活试验-脑脊液检验试验-脑脊液检验,胸腹水检查,理学检查性状颜色透明度有无凝块,源奉舔街摊钮勾击弓营摊洁枢肇撰酒范皂挨追逼寥消讼巷郑冻佃倚单真琴试验-脑脊液检验试验-脑脊液检验,化学检查,李凡它试验,檄尧惶猿帝步枉鱼兹协独过疮窒御浇酗奢催妇砧佑殿兵仁蚕账了芋原那汲试验-脑脊液检验试验-脑脊液检验,显微镜检查,细胞总数计数白细胞计数白细胞分类计数,荤悯桓壤剐概零鸦担铀语韭坎味唯醒菱古江陕雁荷攻安避巴尿继楷莫媚钳试验-脑脊液检验试验-脑脊液检验,