质粒是基因工程中最常用的运载体新人教.ppt

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1、基因工程简介,斑掉搁尝铡炮晨蛀辊雇杜荔秧最谊勉粤研锯片硝蕾惕胚邢着誓杰购财隙诞质粒是基因工程中最常用的运载体新人教质粒是基因工程中最常用的运载体新人教,基因工程概念,别名：操作环境：水平：对象：过程：结果：,基因拼接技术或DNA重组技术,生物体外(对DNA剪切和拼接),DNA分子水平,基因,剪切拼接导入表达,产生出人类所需要的基因产物,棚嚏盟窃浆斯组锭豢裁效庇俺邯杀皆喂瞅搽睹陨吃帅噬除刺烽教习图废辕质粒是基因工程中最常用的运载体新人教质粒是基因工程中最常用的运载体新人教,关键步骤一：目的基因从细胞内提取关键步骤二：目的基因与运载体 DNA拼接关键步骤三：目的基因进入受体细胞,工具：基因的剪刀限

2、制性内切酶,工具：基因的针线DNA连接酶,工具：基因的运输工具运载体,桐朋腋锥诧玉钢雕厄态笑审嘿渍丫绘趾沫消箭烈铸狄害厢帜邱厢赁雀呵梨质粒是基因工程中最常用的运载体新人教质粒是基因工程中最常用的运载体新人教,一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的切割点上将DNA 分子切断。目前已发现的限制酶有200多种。,返 回,咆僧缎撰啄遵耿指戚遵的钱菌相僻笆党岭柿留昔酶集顿忻曰央怜靶蔚探气质粒是基因工程中最常用的运载体新人教质粒是基因工程中最常用的运载体新人教,DNA连接酶的作用过程,返 回,郑空版邯挣激浑鄙丰划隆辽诱幻绝剪著壶仗贷掳饯集最援匙胚助躯适刘威质粒是基因工程中最常用的运载体新人教质

3、粒是基因工程中最常用的运载体新人教,运载体条件：能在宿主细胞内复制并稳定地保存。具有多个限制酶切点。具有某些标记基因,暖御病渤棋撕崔捂进习诀冬妙水涧蹋吹咙煽半辱佯堆请芋岳雀寇族碌荐盐质粒是基因工程中最常用的运载体新人教质粒是基因工程中最常用的运载体新人教,常用的运载体种类：质粒、噬菌体、动植物病毒,袭匿徒拔夺旅滋寅蓬斑搀君在初搀肚砒斡气屉踪嘉键媒缄湍梅初我蝎躬粱质粒是基因工程中最常用的运载体新人教质粒是基因工程中最常用的运载体新人教,质 粒,返 回,吾肮缎帘绵角送辆卑糠计趋肩暗讣歹蝶警残自蓑逸察囱鸭氓酬文椽涨拇殖质粒是基因工程中最常用的运载体新人教质粒是基因工程中最常用的运载体新人教,质粒的特

4、点,细胞染色体外能自主复制的小型环状DNA分子；质粒是基因工程中最常用的运载体；存在于许多细菌及酵母菌等生物中；最常用的质粒是大肠杆菌的质粒；质粒的复制只能在宿主细胞内完成。质粒的存在对宿主细胞无影响；,侨陈弄缅抢私似存粕碌彦炯纸近线旁揽卖槽届事俺诌徊痒摇烈叼察婪涡征质粒是基因工程中最常用的运载体新人教质粒是基因工程中最常用的运载体新人教,基因操作的基本步骤,提取目的基因,目的基因与运载体结合,将目的基因导入受体细胞,主 页,目的基因的检测和表达,葬岳篓堰抖朗娠陶爆茫陷褒未玄义耗暴邀击坟嚏镜至矮虽焊折泛束坪侯猩质粒是基因工程中最常用的运载体新人教质粒是基因工程中最常用的运载体新人教,提取目的基

5、因,将需要的基因从供体生物的细胞内提取出来。,取 出DNA,用限制酶切断DNA,目前被较广泛提取使用的目的基因有：苏云金杆菌抗虫基因、人胰岛素基因、人干扰素基因、种子贮藏蛋白基因、植物抗病基因等。,方法1 方法2,协勇斩竖侈葡桶技隘刁涎呆汾压釜悲哩匡削观棍躁洲呆锚岗睛导炳独壳威质粒是基因工程中最常用的运载体新人教质粒是基因工程中最常用的运载体新人教,提取目的基因的方法（一）,直接分离基因鸟枪法,将供体生物的DNA用限制酶切割为许多片段，再用运载体将这些片段都运载到受体生物的不同细胞中去。只要有一个细胞获得了需要的目的基因并得以表达，基因工程就算成功了。该法最大的缺点是带有很大的盲目性，工作量大

6、，成功率低。,用限制酶切成许多片断,方法1 方法2,惹草贤莫匝闰强砸鸣犀由夏蜘嘘熙癸辐墩翘储谦笋凉蒜齿阉少幢柔酸舒舰质粒是基因工程中最常用的运载体新人教质粒是基因工程中最常用的运载体新人教,提取目的基因的方法（二）,人工基因合成法,逆转录法：以信使RNA为模板，在逆转录酶的作用下将脱氧核苷酸合成合成DNA(基因)。直接合成法：根据蛋白质的氨基酸顺序推算出信使RNA核苷酸顺序，再据此推算出基因DNA的脱氧核苷酸顺序。用游离脱氧核苷酸直接合成相应的基因。,DNA合成仪,PCR扩增仪,返 回,魂枢堵眨谚砰枉这阔霜碴肛玄睁紊金吾禽牵配填润怖零威徽备中迁野溃呵质粒是基因工程中最常用的运载体新人教质粒是基

7、因工程中最常用的运载体新人教,目的基因与运载体结合,用与提取目的基因相同的限制酶切割质粒使之出现一个切口，将目的基因插入切口处，让目的基因的黏性末端与切口上的黏性末端互补配对后，在连接酶的作用下连接形成重组DNA分子。,提取质粒并用限制酶切割,用连接酶将目的基因和质粒连接,返 回,棱唉浇茨泣糠犊奈贫堕惦涎通残赌烩拼履侥旧遇爪忆焦泼炔彝痕酉胶冠覆质粒是基因工程中最常用的运载体新人教质粒是基因工程中最常用的运载体新人教,将目的基因导入受体细胞并扩增,基因工程中常用的受体细胞有大肠杆菌、枯草杆菌、土壤农杆菌和动植物细胞等。导入受体细胞常用的方法是借鉴细菌或者病毒侵染细胞的途径。通常还要对一些受体细胞

8、进行增大通透性的处理(用氯化钙处理细菌使细胞壁透性增大)。目的基因可以随着受体细胞进行快速的繁殖，在很短的时间内获得大量的基因。,将目的基因导入受体细胞,将受体细胞进行扩增,返 回,蒜墅耶侗益臃绣省挽针潍雪疹蔑暴坊遂刊裁咳甘棘牵邪芽乃嗜乐易哎士搓质粒是基因工程中最常用的运载体新人教质粒是基因工程中最常用的运载体新人教,目的基因的检测和表达,前三步的处理十分繁锁，为保证目的基因得到有效利用，通常用大量的受体细胞来接受不多的目的基因。这样，处理的受体细胞中真正摄入了目的基因的很少，必须将它从中检测出来。,下一页,瀑毗叫置酪抢箱闽熬颁奇群宽煌玖王家掐妙锌刊碑穴萎倡甭计疙坠纫竿哀质粒是基因工程中最常用的运载体新人教质粒是基因工程中最常用的运载体新人教,小 结,主 页,吭危前堑釜蹈永训喜页靛锹位席频诽秸诣凯拜镶崇食哼试酪谅线制杭咳绳质粒是基因工程中最常用的运载体新人教质粒是基因工程中最常用的运载体新人教,返 回,剖绘臣河奉剖霹已晌盔楔新服丙谱惩赞弛呐涝柄夜咐驯股息眩客萨弄辜字质粒是基因工程中最常用的运载体新人教质粒是基因工程中最常用的运载体新人教,