临床检验标本采集要求指南.docx
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1、临床检验标本采集要求指南根据卫生部制订医疗机构临床实验室管理办法第十五条要求,必须有分析前质量保证措施,制订患者准备、标本采集、标本储存、标本运输、标本接收等标准操作规程,检验科结合本院实际工作情况制定临床检验标本采集要求指南,要求临床科室医护工作人员严格遵守,临床科室与检验科积极配合,共同提高我院临床检验质量和临床诊断水平。一、患者准备1 .病人状态,般需在安静状态下采集标本,因运动能影响许多项目的测定结果。活动的影响可分暂时和持续性两类。暂时性影响如使血浆脂肪酸含量减少;丙氨酸、乳酸含量增高。持续性影响,如激烈运动后使CK、LDH、ALT、AST和GLU等的测定值升高,有些恢复较慢,如AL
2、T在停止运动Ih后测定,其值仍可偏高30%50%BUN、Na等均可升高,但空腹达24h以上,可出现低血糖,血中TG、游离甘油及脂肪酸可增高。(2)高脂餐后24h采血,多数人ALP含量增高,主要来自肠源性同工酷,且与血型有密切关系,O型或B型兼为Le+分泌型者增高更为明显。(3)高蛋白质餐使血浆尿素、血氨增加,但不影响肌肝含量。(4)高比例不饱脂肪酸食物,可减低胆固醇含量;香蕉、菠萝、番茄可使尿液5-羟色胺增加数倍。(5)含咖啡因饮料,可使血浆游离脂肪酸增加,并使肾上腺和脑组织释放儿茶酚胺。(6)食物如含有动物血液,可引起粪隐血假阳性。(7)饮酒后使血浆乳酸、尿酸盐、乙醛、乙酸等增加,长期饮酒者
3、高密度脂蛋白胆固醇偏高、平均血细胞体积增加、谷氨酰转肽醐亦较不饮酒的病人为高,甚至可以将这三项作为嗜酒者的筛选检查。(8)吸烟:瘾大者血液一氧化碳血红蛋白含量可达8%,而不吸烟者含量在1%以下。此外,儿茶酚胺、血清可的松亦较不吸烟者为高,血液学方面亦有变化,白细胞数增加、嗜酸粒细胞减少、中性粒细胞及单核细胞增多、血红蛋白偏高、平均红细胞体积偏高。吸烟组血浆硫氨酸盐浓度明显高于非吸烟组。3 .药物药物对检验的影响非常复杂,在采样检查之前,以暂停各种药物为宜,如某种药物不可停用,则应了解可能对检验结果产生的影响。如:甲状腺药物:使血糖升高、胆固醇降低;咖啡因:使血糖和胆固醇增高;维生素C使总胆固醇
4、、甘油三酯、高密度脂蛋白降低;服避孕药:使甲状腺结合球蛋白、纤维酶原、转铁蛋白、血清铁和甘油三酯升高、白蛋白和血清锌降低;某些药物能够造成肝、肾功能损害,引起相关指标的变化。对检验项目的测定方法产生影响:对于用比色法检测的项目,某些药物的物理特性比如颜色会影响比色;药物参与检测时的化学反应,如有还原性的药物对于利用氧化还原法测定项目会有影响;某些药物可以抑制酶的活性,对于测定酶活性的项目会使结果降低。(详情见药物对检验结果的影响)4 .体位体位影响血液循环,由于血液和组织间液因体位不同而平衡改变,则细胞成分和大分子物质的改变较为明显,例如由卧位改为站位,血浆ALB、TP、酶、Ca、胆红素、TC
5、h及TG等浓度增高;Hb、HCT.RBC等亦可增加。由于体位的因素,在确立参考值时,应考虑门诊和住院病人可能存在的结果差异,故采集标本时要注意保持正确的体位和保持体位的一致性。5 .时间病人准备还应考虑病人的生物钟规律,特别是激素水平分析,如女性生殖激素与月经周期密切相关;胆固醇则在经前期最高,排卵时最低;纤维蛋白原在经前期最高,血浆蛋白则在排卵时减少。生长激素于入睡后会出现短时高峰。胆红素、血清铁以清晨最高;血浆蛋白在夜间降低;血Ca往往在中午出现最低值。故采血时间应在相同时间进行。二、标本采集标本采集是直接关系检验结果的基本要素,如果标本采集不当,即使最好的仪器设备也难以弥补在采集标本时引
6、入的误差和错误,现将各种标本的采集要点分述如下:(一)血液标本的采集血液标本可来自于静脉、动脉或毛细血管。静脉血是最常用的标本,静脉穿刺是最常用的采血方法。毛细血管采血主要用于儿童,血气分析多使用动脉血。一)静脉采血法1 .采血步骤采血前核对病人姓名、性别、年龄、编号及检验项目等,按试验项目要求,准备好相应的容器,如空白试管、抗凝管或促凝管等。病人应取坐位或卧位,采血部位通常是前臂肘窝的正中静脉。若用普通采血法,采血后应取下针头,将血液沿管壁缓慢注入试管内。2 .注意事项(I)防止溶血:造成溶血的因素有注射器和容器不干燥、不清洁;淤血时间过长;穿刺不顺利,组织损伤过多;抽血速度太快;血液注入容
7、器时未取下针头或注入速度过快产生大量泡沫;震荡过于剧烈等。若用普通注射器采血后,未取针头直接将血注入真空管内,也易造成溶血。体内溶血属合格标本,但应在报告单上注明。(2)避免充血和血液浓缩:采血时应动作迅速,尽可能缩短止血带使用时间。用止血带压迫时间最好不超过半分钟,否则将使生化结果升高或下降。(3)若病人正在进行静脉输液,不宜在输液同侧手臂采血;若女性病人做了乳腺切除术,应在手术对侧手臂采血。(4)采血的体位:体位改变可引起一系列的生理变化,使血液中的许多指标发生改变。一般采取直立位采血,其标本的测定值比卧位高5%15%。因此,采血时要注意保持正确的体位(坐位或卧位),以及体位的一致性。(5
8、)采血时只能向外抽,决不能向静脉内推,以免注入空气,形成气栓而造成严重后果。(6)很多生化成分受膳食影响,因此,采血前要确认病人是否空腹。二)动脉采血法肱动脉、股动脉、楼动脉以及其它任何部位的动脉都可以作为采血点,但多选择肱动脉和桃动脉。在摸到明显搏动处,按常规消毒,左手固定搏动处,右手持注射器,针头成60。角刺入,血液将自动进入注射器内。采血注意事项见血气分析部分。)真空采血法双向针的一端在持针器的帮助下刺入静脉,另一端插入真空试管内,血液在负压作用下自动流入试管内。由于在完全封闭状态下采血,避免了血液外溢引起的污染,并有利于标本的转运和保存。标准真空采血管采用国际通用的头盖和标签颜色显示采
9、血管内添加剂种类和试验用途。可根据需要选择相应的盛血试管。1 .普通血清管红色头盖,采血管内不含添加剂,用于常规血清生化、血库和血清学相关检验。2 .肝素抗凝管采血管内添加有肝素。肝素直接具有抗凝血酶的作用,可延长标本凝血时间。适用于红细胞脆性试验、血气分析、红细胞压积试验、血沉及普通生化测定,不适于做血凝试验。过量的肝素会引起白细胞的聚集,不能用于白细胞计数。因其可使血片染色后背景呈淡蓝色,故也不适于白细胞分类。3 .EDTA抗凝管紫色头盖,乙二胺四乙酸(EDTA,分子量292)及其盐是一种氨基多粉基酸,可以有效地螯合血液标本中的钙离子。螯合钙或将钙从反应位点移去将阻滞和终止内源性或外源性凝
10、血过程,从而防止血液标本凝固。适用于一般血液学检验,不适用于凝血试验及血小板功能检查,亦不适用于钙离子、钾离子、钠离子、铁离子、碱性磷酸酶、肌酸激酶和亮氨酸氨基肽酶的测定及PCR试验。4 .枸檬酸钠凝血试验管蓝色头盖,枸椽酸钠主要通过与血样中钙离子螯合而起抗凝作用。适用于凝血实验,抗凝剂与血液的比例是1:9。5 .枸椽酸钠血沉试验管黑色头盖,血沉试验要求的构椽酸钠浓度是3.2%(相当于O.109mol/L),抗凝剂与血液的比例为1:4采血根据不同的检验项目,选用合适的抗凝剂十分重要。1 .选择抗凝剂注意事项:(1)含有K+、Na+的抗凝剂不能用于测定K+、Na+的标本。EDTA、氟化物、草酸盐
11、等不能用于测定Ca2+的标本,因为Ca2+可与它们形成不溶性物质。(3)草酸盐、氟化物不能用于测定酶和用酶法测定的标本,因为它们有激活或抑制某些酶活性的作用,如草酸盐可抑制A-AMY、ACP.LDH的活性,氟化物则有激活尿素酶、AMY的作用。(4)草酸钾:钙离子螯合剂,常用量为l2mgml血液。草酸钾虽仍可应用,但使红细胞缩小,水分从红细胞渗入血浆,使血浆成分浓度相应偏低。(5)草酸钾氟化钠混合抗凝剂:专供葡萄糖测定用,氨化钠1g,草酸钾3g混合,混合剂4mg抗凝Iml血。(6)肝素:是一种粘多糖体,可抑制凝血酶原转化为凝血酶,使纤维蛋白原不能转化为纤维蛋白。以1525IU抗凝血液11ml。肝
12、素抗凝血不影响红细胞体积,可用于生化及血液学检验标本,但不可用于筛选DIC的3P和TT试验,因肝素与鱼精蛋白作用,发生沉淀,使3P出现假阳性以及肝素的抗凝血酶作用出现产生干扰。EDTA:与钙离子络合而抗凝,通常血液学常规检验应用其钾盐EDTA-K2或EDTA-K3。(8)使用抗凝剂要注意血与抗凝剂的比,如血沉取106mmolL的枸檬酸钠0.4ml,抽1.6ml血;凝血机制取0.2ml,抽1.8ml血;血常规用EDTA抗凝管抽1.5ml血;血生化用肝素抗凝管抽3ml血等。(9)普通管主要用于各种临床化学、临床免疫检验项目标本采集.2 .标本采集注意事项:(1)末梢采血时,务必清洁消毒,待干燥后穿
13、刺,用1次性采血器。婴儿可取自脚后跟两侧处,一般不取手指,采血中不可用力挤压,以免组织液混入血液,使血液易于凝固和稀释,出现误差。(2)采静脉血时止血带结扎过久,可引起误差。如以结扎Imin的样品结果为基数,则结扎3min,可使血浆总蛋白增加5%,胆固醇增加5%,铁增加6%,胆红素增加8%,乳酸则不能使用止血带。(3)血清标本应避免溶血,并及时分离血清,如需隔日检验,应封口后冰箱储存。(4)采血用针头过细会使血K+升高。(5)要特别注意采血不能在输液的同侧进行,更应杜绝在输液管内采血,因输液成分会影响检测结果(使相应的结果偏高,如输K+、GIU时,可使所测K+、Gkl明显增高),或使血液稀释结
14、果偏低。(6)血气和PH值测定的血液以动脉血为原则,且不可漏气。细胞培养的样品要采用无菌技术,防止污染。(7)标本采集后,必须在试管或容器上帖上检验申请单号码、住院病人应有床号、姓名,且应当场核对无误。(二)、尿液标本的采集一)采集方法尿液标本有随机新鲜尿、定时尿及24小时尿,根据检查项目选择标本的采集类型。定量生化分析多收集24小时尿液,24小时尿标本采集方法如下:嘱病人在早晨8时排尿弃去,以后每次排尿均收集于一大容器内,至次日早晨8时最后一次尿亦收集于容器内。测量并记录24小时尿液总量,然后混匀尿液,取适量尿液送检。根据采集时间可分为清晨空腹尿、随机尿、计时尿(2h、3h、12h、24h等
15、)、午后尿、餐后尿、症状典型时尿等。(1)晨尿为住院病人留尿的主要方法,早晨起床后收集第一次尿,可用尿常规检验。(2)随机尿多为门诊就诊病人的留尿检验方法。(3)餐后尿为收集进餐后2h尿,主要用于了解葡萄糖代谢情况,用以筛查隐性糖尿病或轻症糖尿病。(4)计时尿应于计时开始时排空尿液,然后于规定时间内至截止时间留尿,计时尿多用于肾功能和有形成分排出率的评估,亦用于计算淀粉酶或肌酊的排出率。二)注意事项收集尿液标本的容器必须清洁干燥,最好是一次性使用的容器。若容器反复使用,则须用洗涤液和自来水清洗,再用蒸馆水冲洗。尿标本要防止混入月经血、阴道分泌物、精液、前列腺液、粪便等异物(随机尿送检时一般留中
16、间段尿液)。尿标本收集后应12时内送检,以免细菌作用和化学成分分解。若不能及时检验(如收集24小时尿液),将标本置冰箱保存,若加入防腐剂,保存效果更佳。(三)、粪便标本采集标本的收集、存放与运送的得当与否,直接关系到检验结果的准确性。应采取新鲜粪便,盛于洁净、干燥无吸水性的有盖容器内,不得混有尿液、水或其他物质,以免破坏有形成分,使病原菌死亡和污染腐生性原虫、真菌狗子、植物种子、花粉易混淆检验结果。采集标本时应用干净竹签选取含有粘液、脓血等病变成分的粪便;外观无异常的粪便须从表面、深处及粪端多处取材,其量至少为大拇指末段大小(约5g)o标本采集后一般情况应于Ih内检查完毕,否则可因pH及消化酶
17、等影响导致有形成分破坏分解。查痢疾阿米巴滋养体时应于排便后立即送检。从脓血和稀软部分取材,寒冷季节标本传送及检查时均需保温。检查日本血吸虫卵时应取粘液、脓血部分,孵化毛蝴时至少留取30g粪便,且须尽快处理。检查烧虫卵须用透明薄膜拭子于晚12时或清晨排便前自肛门周围皱裳处拭取并立即镜检。找寄生虫虫体及做虫卵计数时应采集24h粪便,前者应从全部粪便中仔细搜查或过筛,然后鉴别其种属;后者应混匀后检查。对某些寄生虫及虫卵的初步筛选检验,应采取三送三检。因为许多肠道原虫和某些蠕虫卵都有周期性排出现象。隐血试验,应连续检查3天,选取外表及内层粪便,应迅速进行检查,以免因长时间放置使隐血反应的敏感度降低。细
18、菌检验用标本应全部用无菌操作收集,立即送检。无粪便排出而又必须检查时,可经肛门指诊或采便管拭取标本,灌肠或服油类泻剂的粪便常因过稀且混有油滴等而不适于做检查标本。(四)、分泌物的标本采集1 .取材所用消毒的刮板,吸管或棉拭子必须清洁干燥,不粘有任何化学药品或润滑剂。2 .根据不同的检查目的可自不同部位取材。一般采用盐水浸湿的棉拭子自阴道深部或阴道后部、宫颈管口、尿道等处取材,制备成生理盐水液。(五)、特殊标本的采集一)脑脊液的采集正常脑脊液为无色、清亮水样液体,当脑组织和脑膜有病变,如感染、外伤或肿瘤时,可使脑脊液(CSF)发生变化,主要反映在颜色、透明度、细胞及各种化学成分的改变。脑脊液标本
19、的采集由医生进行。脑脊液的穿刺部位较多,有腰椎穿刺、小脑延髓池穿刺,婴儿时期的前囱门作侧脑室穿刺等。因腰椎穿刺简单易行且危险性小,最为常用。将脑脊液标本收集于三支无菌试管中,第1管作细菌检查,第2管作生化检查,第3管作细胞计数。脑脊液标本应尽量避免凝固和混入血液,标本采集后要立即送检,以免因标本放置时间过长使其成分变化,如葡萄糖分解,使葡萄糖含量降低。二)浆膜腔积液的采集正常情况下,人体胸腔、腹腔、心包膜等有少量液体,它们主要起着润滑浆膜的作用,当浆膜发生病变时,如炎症、循环障碍、恶性肿瘤浸润等,浆膜腔液产生增多并积聚在浆膜腔内,称为浆膜腔积液。检测浆膜腔积液的某些化学成分,如蛋白质、葡萄糖、
20、酶及肿瘤标志物等,有助于了解浆膜腔积液的性质和病因。一般由临床医生用浆膜腔穿刺术获得标本。(三)标本的处理标本处理不当将可能引起比分析更大的误差。因此,应根据分析目的选择合适的抗凝剂、防腐剂和处理方法。一)、抗凝剂应用物理或化学方法除去或抑制血液中的某些凝血因子,阻止血液凝固,称为抗凝。阻止血液凝固的化学试剂称为抗凝剂(anticoagulant)。对抗凝剂的一般要求是用量少、溶解度大、不影响测定。生化检验常用的抗凝剂有以下儿种:1 .肝素是一种含有硫酸基团的粘多糖,其抗凝机理主要是对抗凝血活前和凝血前的形成和活性,阻止血小板聚集。肝素抗凝血常用于血气分析和部分生化项目的测定,使用I.Og/L
21、的肝素溶液0.5ml可抗凝5ml血液。2 .草酸钾一氟化钠草酸钾可与血中钙离子生成草酸钙沉淀,从而阻止血液凝固。草酸钾溶解度大,抗凝作用强。氟离子能结合钙而抗凝,但抗凝效果较弱。氟离子可抑制糖酵解中的烯醇化酶,防止糖酵解,若未加氟化钠,血标本中葡萄糖含量将以每小时6%的速度下降。而在氟化钠的存在下,血糖浓度在25C可稳定24小时,4可稳定48小时。因此,草酸钾一氟化钠是血糖测定标本常使用的抗凝剂。二)、防腐剂尿液检验最好留取新鲜标本及时检查,否则尿液生长细菌,使尿液中的化学成分发生变化。在留取24小时或12小时尿液时,尿液标本应置冰箱保存或加入防腐剂,常用的防腐剂有:1 .浓盐酸盐酸使尿液保持
22、酸性,阻止细菌繁殖,同时防止一些化学物质因尿液碱化而分解,通常用量为O.51.Oml浓盐酸/100mI尿液,适用于24小时尿儿茶酚胺、秀草扁桃酸(VMA)、17一羟皮质类固醇和17一酮类固醇等定量测定。2 .甲苯甲苯可在尿液表面形成薄膜,防止细菌繁殖,用量1.02.Oml甲苯/10Oml尿液,适用于尿肌酊、尿糖、蛋白质、丙酮等生化项目的测定。3 .冰醋酸用量5IOml冰醋酸/24小时尿液,适用于24小时尿醛固酮测定。4 .麝香草酚可抑制细菌生长,用量为0.Ig麝香草酚/100ml尿液。用10%的麝香草酚异丙醇溶液可增加麝香草酚的溶解量,达到抑菌及保护代谢物的作用,适用于尿钾、钠、钙、氨基酸、糖
23、、尿胆原、胆红素等测定。5 24h尿多用于化学组分的测定,亦用于泌尿道抗酸杆菌的检查。尿液原则上以不用防腐剂为好,如需12h或24h尿,首选以冷藏为妥,根据不同的检验目的加用合适的防腐剂,加40%甲醛0.5ml于尿液100ml中,适用于细胞及管型等有形成分的检查;激素检验常以盐酸IOml作为24h尿的防腐剂或硼酸Ig加于尿液100rnI,麝香草酚0.1g加于尿100rnI供抗酸杆菌浓集检查,加二甲苯0.5ml于尿液100ml中,。适用于尿糖、尿蛋白的检查。三)、粪便标本采集后及时送检,如作原虫阿米巴检查应保持一定的温度,且立即送检,立即检查,如检查蜕虫则不必送检粪样,而应于晨起时排便前用棉拭擦
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