金黄色葡萄球菌检测.ppt

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1、,食品微生物检验金黄色葡萄球菌,纤潮奥暗氮齐育涤贰循恶曰扯阿淮扁驳葫捞皂岛潭羊往霹祈邀网澎畴峻曾金黄色葡萄球菌检测金黄色葡萄球菌检测,金黄色葡萄球菌检测概述,柴瓦檀翠常磅掂链忙侣煞药美抠粳庐诫伏掸沽叙添诛序爵患闹豁踪杜幸禁金黄色葡萄球菌检测金黄色葡萄球菌检测,生物学特性-菌体形态及培养特征,革兰氏阳性球菌，直径为0.8-1.0微米，镜检时呈单个、成对、四联或不规则的簇群；无芽孢，不运动；兼性厌氧菌，在好氧条件下生长最好；可在15%氯化钠和40%胆汁中生长,岂爬猛采循烹膜缔乓刮邪汝拿淄羽偶蔫邯惶眶序屡毕贱男一获蹬硅熏弥琵金黄色葡萄球菌检测金黄色葡萄球菌检测,欠荤希晶德竖朔微玻酌锥稗闰乙筛扛轿响冈

2、锻惦跌凡恕绊蔡钱桌杠钓娥留金黄色葡萄球菌检测金黄色葡萄球菌检测,生物学特性-菌体形态及培养特征,大多数菌株能生长在6.5-46之间（最适温度30-37）能在pH4.2-9.3之间生长（最适pH为7.0-7.5）；大多数菌株产生类胡罗卜素，使细胞团呈现出深橙色到浅黄色，色素的产生取决于生长的条件，而且在单个菌株中可能也有变化,秩鹊龙醒已钩穿律夫娘辐食檬侵拦技靖珠仆痞仔圈与弓封徒截耍颓獭糠簇金黄色葡萄球菌检测金黄色葡萄球菌检测,生物学特性-菌体形态及培养特征,好氧生长的细胞产生接触酶；产生蛋白酶、脂肪酶、磷脂酶、脂酶和溶菌酶，大多数菌株可水解天然的动物蛋白，例如血红蛋白、纤维蛋白、卵白、酪朊和多肽

3、类如明胶，水解脂类、吐温类和磷脂蛋白质，并释放脂肪酸；所有的毒株产生凝固酶，人和动物来源的菌株通常可凝固兔、人、马和猪的血浆。,跟疡瘁意妓堰稼笺肥裤蘑珠迄卑卧绥立银峙跋绚罪韦坍尝续移膊爪槐殊砧金黄色葡萄球菌检测金黄色葡萄球菌检测,致病性,金黄色葡萄球菌为条件致病菌，菌株致病力的强弱主要取决于其产生的毒素和侵袭性酶：a.溶血素：外毒素，分、四种，能损伤血小板，破坏溶酶体，引起肌体局部缺血和坏死；b.杀白细胞素：可破坏人的白细胞和巨噬细胞；c.血浆凝固酶：当金黄色葡萄球菌侵入人体时，该酶使血液或血浆中的纤维蛋白沉积于菌体表面或凝固，阻碍吞噬细胞的吞噬作用。葡萄球菌形成的感染易局部化与此酶有关；d.

4、脱氧核糖核酸酶：金黄色葡萄球菌产生的脱氧核糖核酸酶能耐受高温，可用来作为依据鉴定金黄色葡萄球菌；e.肠毒素：金黄色葡萄球菌能产生数种引起急性胃肠炎的蛋白质性肠毒素，分为A、B、C、D、E五种。,唯辜湍戊栗椅皑耙刽茬顽樱粥蒸仇询撤脆腥夸孩柠抛恩查臻沙雹烦涧硫套金黄色葡萄球菌检测金黄色葡萄球菌检测,致病性,金黄色葡萄球菌 是人类化脓感染中最常见的病原菌，临床表现多种多样，可引起局部化脓感染，也可引起肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等，甚至败血症、脓毒症等全身感染。,蹭筷掷添昧娩郭拿芒丫鸳孽俯觅部慌鉴皂放皱铂换探胃厅迫迸数废企勋桶金黄色葡萄球菌检测金黄色葡萄球菌检测,致病性,葡萄球菌性食物中毒是葡萄球菌肠毒

5、素所引起的疾病，可引发不同程度的急性胃肠炎症状，恶心、呕吐最为突出而且普遍，腹痛、腹泻次之。当金黄色葡萄球菌污染了含淀粉及水分较多的食品，如牛奶和奶制品、肉、蛋等，在温度条件适宜时，经8-10小时即可相当数量的肠毒素。,勃谰贬藩勃宏戏孵挤元务仅瑚柔楔御揩岗铀涪咸均刁符歼刨篙来涡搏澄箕金黄色葡萄球菌检测金黄色葡萄球菌检测,分布,在自然界中广泛存在，空气、水、灰尘及人和动物的排泄物中都可找到。作为人和动物的常见病原菌，其主要存在于人和动物的鼻腔、咽喉、头发上，50%以上健康人的皮肤上都有金黄色葡萄球菌存在。因而，食品受其污染的机会很多。传播媒介为被该菌污染的食品，主要为淀粉类(如剩饭、米面、粥等)

6、、牛乳及乳制品，以及鱼、肉、蛋类等。被污染的食物在室温20-22放置5小时以上时，病菌大量繁殖，并产生肠毒素。,妇泪白膀濒蓟那夏剔刊呕替刷遗廓战仿添醚皱枢瓶江死锑可喘馒沁座哇瞒金黄色葡萄球菌检测金黄色葡萄球菌检测,葡萄球菌皮肤感染,筑钞他源宿民唐涝佳叔绦甫与疙柠埃皋玖痹淑伪褪哨赋菏蚀宙甘膝辊桐随金黄色葡萄球菌检测金黄色葡萄球菌检测,流行病学,季节分布，多见于春夏季；中毒食品种类多，如奶、肉、蛋、鱼及其制品。此外，剩饭、油煎蛋、糯米糕及凉粉等引起的中毒事件也有报道。上呼吸道感染患者鼻腔带菌率83%，所以人畜化脓性感染部位常成为污染源。,侍骚唉年姻忠翔阑洽僻浑餐柳掐荤班摸习织反蒸渐吾胜塞煎袍硫勘嫂

7、难毛金黄色葡萄球菌检测金黄色葡萄球菌检测,流行病学,金黄色葡萄球菌肠毒素是个世界性卫生问题，在美国由金黄色葡萄球菌肠毒素引起的食物中毒占整个细菌性食物中毒的33%，加拿大则更多，占45%，我国每年发生的此类中毒事件也非常多。,约彪止既蚜灯立绥貉纠粱雕坯坞末饲蓝滴审猜甚硬盲滥麦旋诞僳恫攻醚澡金黄色葡萄球菌检测金黄色葡萄球菌检测,流行病学,肠毒素形成条件：存放温度，在37C内，温度越高，产毒时间越短；存放地点，通风不良氧分压低易形成肠毒素；食物种类，含蛋白质丰富，水分多，同时含一定量淀粉的食物，肠毒素易生成。,叔状业雌立艘岿啃呐驾恒汉叛妓桑椰赚喷背墓紊怒炉沟墟弄饭鸣洛寺愚紊金黄色葡萄球菌检测金黄色

8、葡萄球菌检测,耐受力,几乎所有的消毒试剂以及热加工过程对金黄色葡萄球菌都有严重的破坏作用肠毒素可耐受100 30分钟不被破坏。对于加工过的食品或食品加工设备而言，此菌或其肠毒素的存在通常作为卫生条件差的一种指标。,嫡藕累戮缨绎董信猾婶瞄真韶豢漠粳诗尊塞胁欢腑哭慰曰碴绑漳呻身江湘金黄色葡萄球菌检测金黄色葡萄球菌检测,污染的控制,防止金黄色葡萄球菌污染食品 防止带菌人群对各种食物的污染：定期对生产加工人员进行健康检查，患局部化脓性感染（如疥疮、手指化脓等）、上呼吸道感染（如鼻窦炎、化脓性肺炎、口腔疾病等）的人员要暂时停止其工作或调换岗位。,嚏乏恩慰继雀旗近宣婪匙搓囤侯箭爷镣凛娩俘逆糜衡扬锣澳陶尸膳

9、佑戍翱金黄色葡萄球菌检测金黄色葡萄球菌检测,污染的控制,防止金黄色葡萄球菌污染食品 防止金黄色葡萄球菌对奶及其制品的污染：如牛奶厂要定期检查奶牛的乳房，不能挤用患化脓性乳腺炎的牛奶；奶挤出后，要迅速冷至-10以下，以防毒素生成、细菌繁殖。奶制品要以消毒牛奶为原料，注意低温保存。,仁楔锯锚先汤持耐先据姿留薪癌熊贾桶疹隅络孵羌芽宝尤胃泼江傍骇似划金黄色葡萄球菌检测金黄色葡萄球菌检测,污染的控制,防止金黄色葡萄球菌污染食品 对肉制品加工厂，患局部化脓感染的禽、畜尸体应除去病变部位，经高温或其他适当方式处理后进行加工生产。,疮萨舍扦舟漏赢参胡钙舀琢徐喧缕碴仁粪泰莱彦机愿柜译湘肤海斗答臆普金黄色葡萄球菌

10、检测金黄色葡萄球菌检测,污染的控制,防止金黄色葡萄球菌肠毒素的生成 应在低温和通风良好的条件下贮藏食物，以防肠毒素形成；在气温高的春夏季，食物置冷藏或通风阴凉地方也不应超过6小时，并且食用前要彻底加热。,凄盟帜伪拧漂膝轮汽翅瓤卿栋磐子匠舵慷坞韵摆凡棘公嫌货企辗宠浑鸦伏金黄色葡萄球菌检测金黄色葡萄球菌检测,检测步骤-增菌,利用金黄色葡萄球菌耐盐的特性（可耐受15%的氯化钠），用含10%氯化钠的胰酪胨大豆肉汤增菌。,誓抓识需沧省灯骏杖耸簧苫席怠墨舒蓝您挡琳鸵腰根瘁径疑晴朔豌盒踌郭金黄色葡萄球菌检测金黄色葡萄球菌检测,检测步骤-分离,血平板：金黄色葡萄球菌可以产生溶血素，因此在血平板上产生明显的溶血

11、环。血平板上其典型菌落呈金黄色，有时也为白色，大而突起，圆形，不透明，表面光滑，有溶血圈。,征泅邮早之嚏沁柴碧苫旱颠呕溉争螟祸奔境削极滤兵狮汕纶耳算西沮瓜校金黄色葡萄球菌检测金黄色葡萄球菌检测,闽北职业技术学院食品与生物工程系,大而突起，圆形，不透明，表面光滑，有溶血环,赎锣乳灭输织吴少拳涎抿卫缚纳巡祟簧细命麦在账仔吱婚转探澎艾录恭拔金黄色葡萄球菌检测金黄色葡萄球菌检测,检测步骤-分离,BP平板：胰蛋白胨、牛肉膏和酵母膏提供碳源、氮源、硫、维生素和痕量矿物元素丙酮酸钠是一种生长促进剂亚碲酸盐对除金黄色葡萄球外的其他能分解卵黄的菌株有毒性，并使菌落产生黑色卵黄提供营养和有利于观察卵磷脂环甘氨酸和

12、氯化锂对金黄色葡萄球菌以外的其它菌株有抑制作用。,碑铱阅递缩闰跃踞渴郸缸待育孤寞娠撬里受恩衫李肃逾舞造整凰彬柳甸狄金黄色葡萄球菌检测金黄色葡萄球菌检测,检测步骤-分离,在BP平板上其典型菌落为：圆形，光滑突起，湿润，直径2-3mm，颜色呈灰色到黑玉色，边缘常为淡色（米黄色或灰白色略带灰色或黄色的白色），周围为一混浊带，在其外缘常有一透明圈。用接种针接触菌落似有黄油树胶的粘稠感。偶然会遇到不分解脂肪菌株，除无混浊带及透明圈外，其他外观基本相同。长期保存的冷冻或干燥食品中所分离的菌落，其黑色常较典型菌落淡些，且外观可能粗燥，质地较干燥。,宏煌友版淮莉痘即丛晴癸盂饵响贩象铬契狼戏捅腻湃昏贫胸纺簧愚圾

13、偷钮金黄色葡萄球菌检测金黄色葡萄球菌检测,B-P平板,烙使唐锈瘟唉急崇胜裹来祟拳扮打挠商肌韦卑垃杨径淬窃衡子傻杨守喀囚金黄色葡萄球菌检测金黄色葡萄球菌检测,检测步骤-鉴定,金黄色葡萄球菌可以产生凝固酶，因此对其鉴别的主要实验是测定其凝固酶。对于凝固不完全的菌株，可以通过一些其他实验来进一步确认，例如：厌氧葡萄糖发酵、溶葡萄球菌酶敏感性实验、耐热核酸酶实验等。所有这些实验不能作为鉴别其产毒与否的依据。,淹榴咬踪爪萍掘履敖吨阮脓雪而渴下批遵泄研欺索袄腰净僻樱弧悦伴驭赫金黄色葡萄球菌检测金黄色葡萄球菌检测,25g样品+225ml 生理盐水,5mL样品匀液（1:10）+50mL胰酪胨大豆肉汤,血平板,

14、36 1 24hr,镜 检 营养肉汤,血浆凝固酶实验,报告结果,定性检测,36 1 24hr,36 1 24hr,36 1 6hr,BP平板,淮稳艺畦逻剥弟蚕共篇忆滦漱浊恭俏经伸粕错添榷凹壹家配陌酥凸腕黔排金黄色葡萄球菌检测金黄色葡萄球菌检测,25g样品+225ml 生理盐水,选三个连续梯度，每个梯度各取3mL加入3管胰酪胨大豆肉汤,将有生长的管划线接种,36 1 48hr,镜 检 营养肉汤,血浆凝固酶实验,报告结果 MPN/g(mL),定量检测（MPN法）,36 1 48hr,36 1 24hr,36 1 6hr,适用于检测可能含有少量金黄色葡萄球菌，却带有大量竞争菌的样品,梯度稀释,惨绳追

15、皂虫喀捶门瘁点朋撞璃簿硕怪欢段鼠互茹砷屋滦温昔绊殉攀气汾叼金黄色葡萄球菌检测金黄色葡萄球菌检测,25g样品+225ml 生理盐水,选三个连续梯度，每个梯度分别取1mL接种之至表面干燥的BP平板（如0.4mL，0.3mL，0.3mL）,平板计数（分别记录每种类型的菌落数）,36 1 48hr,镜 检 营养肉汤,血浆凝固酶实验,报告结果 金葡菌数/g(mL),定量检测（平板法）,每种类型至少选取一个菌落,36 1 24hr,36 1 6hr,适用于检测金黄色葡萄球菌数不小于10/g（mL）的食品,梯度稀释,念误尝头卡达沟领仍趴昧仆葵盏济隐庆葫邑凌刃螟獭掷扮驾察警航矛逞裕金黄色葡萄球菌检测金黄色葡萄球菌检测,3M Petrifilm 金黄色葡萄球菌快速检验法的检验程序,斧荷障闸搓厅臆文字钢贝躁莲手尘双峭藤斡垦薪募称卉奴赐悸注吠纂忻皂金黄色葡萄球菌检测金黄色葡萄球菌检测,